斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeus monodon）是對(duì)蝦中體型最大、經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的海水養(yǎng)殖品種,為當(dāng)前世界三大養(yǎng)殖蝦類(lèi)之一,也是我國(guó)傳統(tǒng)養(yǎng)殖蝦類(lèi)中優(yōu)質(zhì)的對(duì)蝦品種。我國(guó)已培育有生長(zhǎng)快的“南海1號(hào)”新品種和多個(gè)優(yōu)良性狀的新品系,但面對(duì)我國(guó)養(yǎng)殖區(qū)域環(huán)境差異大,對(duì)蝦品種多樣性要求高的現(xiàn)狀,繼續(xù)推進(jìn)斑節(jié)對(duì)蝦的遺傳育種研究,開(kāi)展選育技術(shù)的創(chuàng)新和持續(xù)的良種選育,是對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)健康持續(xù)發(fā)展的有利保證。斑節(jié)對(duì)蝦的頭胸甲長(zhǎng)、腹節(jié)長(zhǎng)、體長(zhǎng)和體質(zhì)量等生長(zhǎng)性狀是影響斑節(jié)對(duì)蝦質(zhì)量和產(chǎn)量的重要經(jīng)濟(jì)性狀。應(yīng)用分子遺傳標(biāo)記,對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦生長(zhǎng)性狀的遺傳基礎(chǔ)進(jìn)行解析,找到與優(yōu)良生長(zhǎng)性狀關(guān)聯(lián)的標(biāo)記或基因,是斑節(jié)對(duì)蝦遺傳選育與品種改良研究的重要內(nèi)容。本論文根據(jù)斑節(jié)對(duì)蝦cDNA文庫(kù)的EST序列,利用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（RACE）克隆斑節(jié)對(duì)蝦組織蛋白酶L基因、胰蛋白酶基因、α淀粉酶基因;通過(guò)RT-PCR檢測(cè)基因在斑節(jié)對(duì)蝦各組織中的分布,以及在卵巢發(fā)育各期或各生長(zhǎng)階段的表達(dá)特征,探究這些基因在斑節(jié)對(duì)蝦中的表達(dá)調(diào)控機(jī)制和功能。通過(guò)在四個(gè)野生群體中的重測(cè)序篩選SNP,采用SnaPshot技術(shù)對(duì)候選SNP位點(diǎn)分型檢測(cè),將基因型結(jié)果和生長(zhǎng)性狀進(jìn)行... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

’RACE原理示意圖（TaKaRa）

圖 2-2 pMD18-T Vector 結(jié)構(gòu)示意圖 (TaKaRa)Fig.2-2 The structure of pMD18-T Vector (From specification of TaKaRa)2.1.2.4.4 轉(zhuǎn)化與細(xì)菌培養(yǎng)(a) E.coli DH5α 感受態(tài)細(xì)胞的制備:1）從 E.coli DH5α 平板上挑取單克隆菌落，接種于裝有 5 mLLB 液體培養(yǎng)基的離心管中，37 ℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜。2）取 0.5 ml 過(guò)夜菌液接種于裝有 50 ml LB 液體培養(yǎng)基三角瓶中，37 ℃振蕩培養(yǎng) 3-4 h，至 A600nm值達(dá)到 0.4（0.3-0.5）時(shí)制備的感受態(tài)效果最好。3）將菌液轉(zhuǎn)入 1 個(gè) 50 mL 無(wú)菌離心管中，冰浴 10~30 min。4）4℃條件下，4000 rpm 離心 10 min。棄上清，倒置離心管使培養(yǎng)液流出，可以置于濾紙上 1 min，使菌體盡量空干。5）小心加入 16 ml solutionA 懸浮菌體，冰浴 15 min。6）4℃，3500 rpm，離心 10 min，收集菌體。7）徹底棄上清液，菌體懸浮于 solution B。

圖 2-3 斑節(jié)對(duì)蝦總 RNAFig.2-3 Total RNAof Penaeus monodon PCR 產(chǎn)物結(jié)果二擴(kuò) PCR 反應(yīng)后，凝膠電泳檢測(cè)發(fā)現(xiàn)結(jié)果較好且條帶清晰明亮，適合切膠回收，可以繼續(xù)基


本文編號(hào)：2950805