后生動物體腔或腸腔內(nèi)有許多微生物群落,這些群落中既有對宿主生命活動有益的菌群,也有損害宿主新陳代謝,破壞宿主腸道微環(huán)境,甚至導(dǎo)致宿主患病的有害菌。例如,導(dǎo)致對蝦產(chǎn)生腸炎病的產(chǎn)氣菌,產(chǎn)生紅肢病的鰻弧菌以及產(chǎn)生爛眼病的霍亂弧菌等。除此之外,宿主腸道內(nèi)還有大量中性菌。宿主如何耐受如此多的細(xì)菌并保持其胃腸道內(nèi)微生物群落的穩(wěn)態(tài)尚未得到充分揭示。以前的研究表明,除了抗菌肽之外,雙氧化物酶（Dual oxidase,DUOX）系統(tǒng)在腸道微生物群落的穩(wěn)態(tài)中起著重要作用。在生物腸道細(xì)胞中,DUOX系統(tǒng)可以產(chǎn)生活性氧（Reactive oxygen species,ROS）,而產(chǎn)生的ROS則可直接破壞微生物的DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,使這些物質(zhì)降解從而殺滅微生物。DUOX系統(tǒng)受多種途徑調(diào)控,目前較少研究的是G蛋白偶聯(lián)受體（G protein-coupled receptor,GPCR）途徑。GPCR是一種7跨膜受體,廣泛分布于各種動物,并且在這些動物中發(fā)揮著非常重要的功能,如視覺、嗅覺、味覺和免疫等。在GPCR調(diào)控的DUOX表達(dá)途徑中,GPCR結(jié)合配體活化后,可經(jīng)由快速的鈣離子（Calcium io... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．２．利用ＲＮＡｉ敲降ＭｙＧＰＣＲｓ的表達(dá)，經(jīng)口感染鰻弧菌后對奸腸道內(nèi)過氧化氫的水平檢??測

妨ＤＣ／ａＷ和歸ＤＬ／ＯＹ２的轉(zhuǎn)錄水平都顯著降低。然而，當(dāng)尸Ｃ斯被敲低后，??邱Ｘ）Ｌ／〇Ｙ７的表達(dá)水平?jīng)]有變化；當(dāng)歸ＧＰＣ７？（５和歸（？尸０？／２被敲低后歸’Ｚ）ｆ／ＯＹ２??的表達(dá)水平?jīng)]有變化（圖２．４）�？傊�，我們篩選得到了?２種ＧＰＣＲ，＾＿ＧＰＣ／？７??和歸ＧＰＣｉ？川，它們可以調(diào)控ＲＯＳ的產(chǎn)生。??Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ??〇?１．？１?〇?．?．?５?１－５１?．２?，?５ｌ?．２?！?５．?￡?．?６．??Ｓｇ?Ｓｇ?１５１?丁?這?Ｓ１．５?１，５?Ｓｇ??ａｇ１＊０－?ｒ１１］?〇．§?ｉ．〇?Ｐｎ?ｑ．§１＊０＇?ｒｎ?ｍ?□．〇?ｉ．〇－?ｒ２１］【§?＂?士?〇．§?ｉ．〇－?Ｆｉ?＾??〇?Ｓ，?ｉ?Ｓ?Ｂ?＊?２?＾?圍巧?２?５?ｑ?ｍ??？?§０－５?＿?５?窆０５?ＪＬ?？ｓ０－５＇?Ｈ?？?ｇ＊°－５＇?５５０．５．?＊?５５０．５－?＿??ｉ°Ｊｌ，ｌｌ?ｉ°〇〇ｌＵｉ－?ｊ°ＪＵＩ?ｊ〇?Ｊｌ．ｌｍ?ｉ°〇，Ｌｌ＊－??ｎｙｍ??〇?＾??§?§?§?§?ｉ?ｉ??１＇�。�?Ｊ?Ｓｃ?１Ｓ１?Ｓｇ?１，！１?ＳＳ?１，ｓｌ?Ｉｃ?１＇�。�?Ｓｇ?１�。�??ｉ？：：ＩＤｉ?ｉ；：：ｌ［ｋ?ｉ？：：ｌＤｉ?ｉｔ：：ＩＤ＾?ｉ？：：Ｄ＾?ｉ？：：ｌＱＩ??ｍ?ｎ?ｆ??ｃ?ｃ?ｃ??｜？?１－５１?Ｉｎ?１－５ｉ??瞇?１．。．円?ｌ｜ｉ．〇?ｒ＾

從消化道轉(zhuǎn)錄組測序獲得了場＇ＧＰＣＡ７和姆的ｃＤＮＡ序列。??姆ＧＰＣ７？７ｃＤＮＡ全長５９１６?ｂｐ，開放閱讀框５１４２?ｂｐ，編碼具有１７１３個(gè)氨基酸的??蛋白質(zhì)，理論分子量為１９３．８?ｋＤａ，理論等電點(diǎn)為８．５?（圖２．５?Ａ）。結(jié)構(gòu)域分析顯??示，除７個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域（２４５?ａａ）外，Ａｆ／ＧＰＣＲ７的Ｎ端具有信號肽結(jié)構(gòu)域（２１?ａａ），??之后是兩個(gè)Ｃ型凝集素結(jié)構(gòu)域（１５１?ａａ、１２２?ａａ），一個(gè)ＧＰＳ結(jié)構(gòu)域（５３?ａａ）以??及一個(gè)低復(fù)雜度區(qū)域（１７?ａａ）（圖２．５?Ｂ）。我們獲得的川的ＤＮＡ序列??長２７３６?ｂｐ，開放閱讀框２３９７?ｂｐ，編碼具有７９８個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，理論分子量??為８８．２?ｋＤａ，理論等電點(diǎn)為８．９４?（圖２．５?Ｃ）。結(jié)構(gòu)域分析顯示，姆ＧＰＣＲ１０含有??一個(gè)７跨膜結(jié)構(gòu)域（２９４?ａａ）以及４個(gè)低復(fù)雜性區(qū)域（１５?ａａ、２０?ａａ、１３?ａａ、１０?ａａ）??（圖?２．５?Ｄ）。??為了分析歸＇ＧＰＣＲ７和Ｍ／ＧＰＣＲ１０的分子進(jìn)化關(guān)系，我們使用ＭＥＧＡ５．０構(gòu)??建了一個(gè)系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。所有ＧＰＣＲｓ被分為２大支：其中第一大支的ＧＰＣＲｓ??又分為兩個(gè)亞支：節(jié)肢動物（包括對蝦和昆蟲）和脊椎動物；第二大支的ＧＰＣＲｓ??分為３個(gè)亞支：對蝦、昆蟲和脊椎動物等。７＾ＧＰＣＲ７和１０分別位于兩個(gè)大的分??支中。說明Ａ々ＧＰＣＲ７和１０分別屬于ＧＰＣＲ的不同類群（圖２．６Ａ）。姆？ＧＰＣＷ??和姆ＧＰＣＲ／Ｏ的進(jìn)化樹和序列比對顯示，這兩種ＧＰＣＲ進(jìn)化上都不保守，與日??本囊對蝦進(jìn)化上相近的凡納濱對蝦中的脂蛋白受體與婦ＧＰＣＲ７的相似性只有??４０．６％，而腺苷Ａ２受體與的相似性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]南美白對蝦養(yǎng)殖環(huán)境及其腸道細(xì)菌多樣性分析[J]. 孫振麗,宣引明,張皓,蔣明,潘云生,張益明,龔葉平,陸小平,余德山,薛仁宇,胡小龍,曹廣力,貢成良.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2016(03)
[2]南美白對蝦腸道細(xì)菌菌群分析[J]. 宛立,王吉橋,高峰,楊士勇,王年斌.  水產(chǎn)科學(xué). 2006(01)



本文編號：2934838