腦膜炎是羅非魚無乳鏈球菌病的特征性臨床癥狀,建立羅非魚無乳鏈球菌腦膜炎模型,并制定相應的臨床癥狀及組織病理學評分系統(tǒng),對研究羅非魚無乳鏈球菌病的致病機制具有十分重要的意義。1、無乳鏈球菌感染尼羅羅非魚的腦膜炎造模構建：將健康羅非魚43尾,隨機分為4組：1個對照組（n=10）和3個實驗組（n=33）。其中,3組實驗組根據(jù)不同感染劑量分為：1.0×106cfu組（n=11）、1,0×107cfu組（n=11）、1.0×108cfu組（n=11）。實驗組分別將1.0×107、1.0×108、1.0×109cfu/mL的無乳鏈球菌菌液腹腔注射尼羅羅非魚復制腦膜炎模型,0.1mL/尾：對照組相同劑量注射0.85%生理鹽水。對實驗組感染尼羅羅非魚連續(xù)觀察直至瀕死或死亡,記錄其臨床癥狀、剖檢病變、腦組織（端腦、中腦、小腦、延腦）病理學變化,并結合細菌學檢測,按照擬定的評分系統(tǒng)評價各組腦膜炎的造模效果,確定最佳造模方案。實驗結果顯示：1、大體病理學變化：各實驗攻毒組尼羅羅非魚感染后2d均出現(xiàn)不同程度死亡,未見明顯神經(jīng)癥狀。感染后3 d至以后的幾天魚體開始出現(xiàn)異常活動的神經(jīng)癥狀及突眼、角膜混濁等病理變化... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 文獻綜述及目的意義
    1 文獻綜述
        1.1 羅非魚
        1.2 無乳鏈球菌
        1.3 患病癥狀
        1.4 腦膜炎模型的研究
        1.5 腦膜炎的致病機制
        1.6 腦膜炎相關的毒力因子
        1.7 透明質酸酶
    2 目的意義
第二章 無乳鏈球菌感染尼羅羅非魚的腦膜炎模型
    1 實驗材料
        1.1 實驗菌株及動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 菌株的復壯和稀釋
        2.2 腦膜炎模型的誘導
        2.3 腦膜炎的臨床觀察
        2.4 腦膜炎的細菌學檢查
        2.5 腦膜炎的解剖檢查
        2.6 腦膜炎的組織病理學觀察
    3 實驗結果
        3.1 臨床癥狀及評分
        3.2 腦膜炎的解剖學檢查
        3.3 腦膜炎的細菌學觀察
        3.4 腦膜炎的組織病理學觀察及評分
    4 分析與討論
第三章 無乳鏈球菌人工感染尼羅羅非魚腦組織動態(tài)病理學觀察
    1 實驗材料
        1.1 實驗菌株及動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 菌株的復壯和稀釋
        2.2 人工感染
        2.3 解剖檢查
        2.4 H.E.染色法樣品制備及觀察
    3 實驗結果
        3.1 解剖學動態(tài)觀察
        3.2 組織病理學動態(tài)觀察
    4 分析與討論
第四章 無乳鏈球菌透明質酸酶多克隆抗體制備
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑載體
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 無乳鏈球菌透明質酸酶（hyaluronidase）hylB基因的擴增
        2.2 透明質酸酶hylB基因的克隆
        2.3 透明質酸酶hylB基因表達菌株的構建
        2.4 重組菌株BL21-pET-32a（+）-htlB的誘導表達
        2.5 重組蛋白RHy1B的純化
        2.6 重組蛋白RHy1B的復性
        2.7 無乳鏈球菌透明質酸酶兔抗高免血清的制備及純化
        2.8 瓊脂擴散的方法檢測血清抗體效價
    3 實驗結果
        3.1 無乳鏈球菌透明質酸酶hylB基因的克隆
        3.2 無乳鏈球菌透明質酸酶hylB基因表達菌株的構建
        3.3 無乳鏈球菌透明質酸酶重組蛋白的表達
        3.4 重組蛋白RHy1B的純化
        3.5 抗血清的制備和檢測
    4 分析與討論
結論
參考文獻
致謝
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]廣州地區(qū)羅非魚無乳鏈球菌分離鑒定及致病生物學研究[D]. 陳榮榮.南京農(nóng)業(yè)大學 2012
[2]拉氏（魚歲）腦部組織形態(tài)學觀察及急性溫度應激對其腦部FOS蛋白表達的影響[D]. 劉獻中.陜西師范大學 2008
[3]齊口裂腹魚消化道及腦中六種腦腸肽的免疫組織化學研究[D]. 樊均德.四川農(nóng)業(yè)大學 2007
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[5]非生物型組合人工肝治療急性肝衰竭動物高顱壓的實驗研究[D]. 王凱.鄭州大學 2006
[6]免疫組化檢測PRRSV方法的建立及其應用于PRRSV感染仔豬后病毒在各器官分布定植規(guī)律的研究[D]. 張平英.四川農(nóng)業(yè)大學 2005



本文編號：2915089