近年來,EPA（二十碳五烯酸）在人類健康保健方面的應(yīng)用越來越受到關(guān)注,EPA的消費(fèi)市場(chǎng)也隨著人類的需求而不斷擴(kuò)大。微藻由于其總脂含量豐富,不飽和脂肪酸種類多樣性,EPA含量高,細(xì)胞繁殖生長(zhǎng)快、細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單而被認(rèn)為是最具潛力的EPA生產(chǎn)原料來源。本研究從廣西北部灣海域紅樹林保護(hù)區(qū)中采樣,利用平板涂布分離法、平板劃線分離法、微吸管分離法分離海洋微藻,通過尼羅紅染色法初篩分離得到10株總脂含量較高海洋微藻。經(jīng)氣相色譜檢測(cè)EPA含量,得到5株產(chǎn)EPA微藻,其中2株微藻HD02和HE06的EPA含量分別為0.22%和0.16%,產(chǎn)率分別為33.4μg·L-1·d-1和25.8μg·L-1·d-1,其倍增時(shí)間分別為2.7 d和2.5 d,懸浮生長(zhǎng),具有一定的工業(yè)化應(yīng)用價(jià)值。經(jīng)形態(tài)觀察及18s DNA序列分析,鑒定HD02為橋?yàn)吃鍖�、HE06為菱形藻屬。采用正交試驗(yàn)對(duì)這兩株海洋微藻進(jìn)行了培養(yǎng)條件優(yōu)化,以提高其生物產(chǎn)量以及EPA產(chǎn)率。優(yōu)化結(jié)果顯示:橋?yàn)吃錒D02的最適培養(yǎng)條件硅元素80mg/L、硝酸鈉75 mg/L、維生素B1 50μg/L、維生素B12 0.5μg/L、生物素8μg/L、IAA 4 ... 

【文章來源】：廣西民族大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

廣西北部灣紅樹林Fig2.1mangrovesforestinthenorthGulfofGuangxiZhuangAutonomous

PCR 條件為：95℃預(yù)變性 2 min，95℃變性 30 s，55℃退火 30 s，72℃延伸 90 s，3環(huán)，最后 72℃終延伸 2 min。PCR 產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測(cè)后進(jìn)行測(cè)序。2.2 結(jié)果本實(shí)驗(yàn)從廣西北海山口鎮(zhèn)國(guó)家級(jí)紅樹林自然保護(hù)區(qū)、廣西欽州茅尾海自治區(qū)級(jí)紅樹林區(qū)、廣西東興市北侖河口國(guó)家自然生態(tài)保護(hù)區(qū)、廣西防城港珍珠灣紅領(lǐng)巾紅樹林保護(hù)分離到 75 株海洋微藻。2.2.1 尼羅紅染色初篩通過尼羅紅染色法從 75 株分離株中獲得 10 株熒光強(qiáng)度較高的海洋微藻。圖 2.2 中，1、HE07 的總脂含量最為明顯，在各個(gè)細(xì)胞內(nèi)分布比較均勻，說明其脂肪酸含量高，內(nèi)有較大較明顯黃色脂肪滴，說明其含有較高的非極性脂類和中性脂，而 HE05、HE0紅色，內(nèi)含極性脂為主[29]。HD02 與 HE06 細(xì)胞形態(tài)相似，兩者細(xì)胞內(nèi)的脂肪滴不明但許多細(xì)胞內(nèi)都含有兩個(gè)小的脂肪滴。

測(cè)定結(jié)果 和 DHA 的標(biāo)準(zhǔn)品氣相圖譜中可以看出，標(biāo)準(zhǔn)品 EPA 的出峰時(shí)間在 25.37，根據(jù)氣相結(jié)果建立的 EPA 標(biāo)準(zhǔn)方程 R 值達(dá)到到 99.94。從圖 2.4 微藻的氣相測(cè)定結(jié)果中可以看出微藻 HD留時(shí)間為 21.9 時(shí)均出現(xiàn)了不同大小的峰值，說明這些微藻然總脂峰值較好，在保留時(shí)間 21.9 處卻沒有峰值，說明 HE EPA。微藻 HE08 中細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸含量不高，也沒有出現(xiàn) 曲線計(jì)算得出藻株HD01、HD02、HE05、HE06、HQ01的EPA含0.16%、0.14%。EPA 測(cè)定結(jié)果最終得到五株含量在 1000 μ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2905454