群體感應(yīng)現(xiàn)象是指細(xì)菌產(chǎn)生自誘導(dǎo)物或信號(hào)分子進(jìn)入環(huán)境中,通過(guò)感知細(xì)菌群體密度,從而開(kāi)啟特定基因的表達(dá)機(jī)制。革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的最常見(jiàn)的信號(hào)分子為N-�；�-L-高絲氨酸內(nèi)酯（N-acyl-L-homoserine lactones,AHLs）。在淡水魚腐敗菌中,AHLs能夠調(diào)節(jié)腐敗菌的濃度,并提高腐敗菌的腐敗能力,加速魚肉的腐敗過(guò)程。檢測(cè)腐敗菌的AHLs對(duì)研究魚肉腐敗有著重要的作用。本文以魚肉腐敗過(guò)程中特征腐敗菌產(chǎn)AHLs的含量變化為研究對(duì)象,應(yīng)用PCR-DGGE技術(shù)從東北淡水魚中篩選出在低溫條件下魚肉到達(dá)腐敗點(diǎn)時(shí)的特征腐敗菌;通過(guò)熒光染色、流式測(cè)定及透射電鏡等方法確定AHLs能夠誘導(dǎo)肥大細(xì)胞產(chǎn)生特異性反應(yīng);通過(guò)海藻酸鈉和氧化石墨烯形成生物相容性材料成功構(gòu)建傳感模型,將其與肥大細(xì)胞電化學(xué)傳感技術(shù)相結(jié)合對(duì)3種AHLs標(biāo)品進(jìn)行快速檢測(cè),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;同時(shí)模擬魚肉腐敗過(guò)程,對(duì)腐敗魚肉中的AHLs進(jìn)行檢測(cè)。為淡水魚腐敗過(guò)程中AHLs檢測(cè)提供新的理論和依據(jù),為AHLs的常規(guī)檢測(cè)提供了一種新型的、精確的檢測(cè)方法。本文主要研究方法和結(jié)果如下:1.以東北三種淡水魚—鳙魚、鯽魚和鯉魚為研究對(duì)象,應(yīng)用PCR-D... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?Ｖ３區(qū)ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果??Ｆｉｇ．２－２?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ－Ｖ３??

２．３結(jié)果與分析??２．３．１?ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??以２７Ｆ和１４９２Ｒ為引物的一次擴(kuò)增產(chǎn)物大小為１５００?ｂｐ左右（圖２－１），以３３８Ｆ和??５１８Ｒ為引物的二次擴(kuò)增產(chǎn)物大小為１９０?ｂｐ左右（圖２－２），所有樣品均有較亮的擴(kuò)增條帶。??本實(shí)驗(yàn)的ＰＣＲ擴(kuò)增條件合適，用于后續(xù)的ＤＧＧＥ電泳分析。??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??２００擎?＇??圖２－１?１６Ｓ?ｒＤＮＡＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果??Ｆｉｇ．２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??圖２－２?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?Ｖ３區(qū)ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果??Ｆｉｇ．２－２?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ－Ｖ３??注：泳道Ｍ為ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ，１？４為鑛魚樣品，５？８為觸魚樣品，９？１２為鍵魚樣品，每種樣品分別對(duì)??新鮮點(diǎn)和腐敗點(diǎn)取樣，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)２個(gè)平行。??

ｃ?〇??圖３－１３種八吼５信號(hào)分子對(duì)肥大細(xì)胞凋亡的熒光觀察（八）對(duì)照組；（８）１０｜＾〇４－吧１＾ＨＳＬ；?（Ｄ）?１０ｎＭ３ＯＣｉ２－ＨＳＬ??Ｆｉｇ．３－１?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｍａｓｔ?ｃｅｌｌ?ｗｉｔｈ?ｔｈｒｅｅ?ＡＨＬｓ．?（Ａ）?ｃｏｎｔｒｏｌ．?（Ｂ）?１０｜ｉ１０ｐＭ?Ｃ６－ＨＳＬ．?（Ｄ）?１０［ｉＭ?３ＯＣ１２－ＨＳＬ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]遼寧省淡水魚中孔雀石綠殘留量檢測(cè)[J]. 崔松林.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(13)
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碩士論文
[1]淡水魚中耐冷菌菌群分析與特征腐敗菌生物學(xué)特性研究[D]. 高祥英.揚(yáng)州大學(xué) 2015
[2]冷藏養(yǎng)殖大黃魚特定腐敗菌及其群體感應(yīng)信號(hào)分子DKPs鑒定與功能的研究[D]. 顧清清.浙江工商大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2901475