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鱖彈狀病毒病減毒活疫苗候選株的篩

發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 03:23
  鱖彈狀病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)是嚴(yán)重危害我國(guó)鱖魚養(yǎng)殖業(yè)的一種重要病原。近年來鱖彈狀病毒病在我國(guó)多地頻發(fā),致死率高,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。由于鱖彈狀病毒病流行周期長(zhǎng),可感染各年齡段的魚體,因此研制疫苗進(jìn)行免疫防治非常必要。雖然成魚可以注射免疫,但是魚苗最適的免疫方式是浸泡免疫;钜呙绲拿庖叻绞蕉鄻,可以注射也可以浸泡,且具有保護(hù)效果好、劑量低等優(yōu)點(diǎn),因此研制活疫苗是鱖彈狀病毒病免疫防治的關(guān)鍵。本研究以鱖魚(Siniperca chuatsi)為研究模型,通過魚體實(shí)驗(yàn)從6株魚類彈狀病毒分離株中篩選出一株弱毒株——加州鱸彈狀病毒三水株(Micropterus salmoides rhabdovirus Sanshui,MSRV-SS)。利用噬斑試驗(yàn)對(duì)MSRV-SS進(jìn)行純化,獲得一株純系克隆株MSRV-SS-7。通過對(duì)該克隆株的安全性和有效性研究,確定了該克隆株可作為防治鱖彈狀病毒病的活疫苗候選株。取得的主要結(jié)果如下:1、弱毒株的篩選以鱖魚為研究模型,通過魚體攻毒實(shí)驗(yàn)和滴度比較,從6株魚類彈狀病毒中篩選出一株弱毒株MSRV-SS;用... 

【文章來源】:上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】:88 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

鱖彈狀病毒病減毒活疫苗候選株的篩


感染不同病毒的各實(shí)驗(yàn)組累計(jì)死亡曲線

對(duì)照組,鱖魚,病毒載量,實(shí)驗(yàn)組


同實(shí)驗(yàn)組的日平均病毒載量圖;F為各實(shí)驗(yàn)組的平均病毒載量Fig. 1- 2 The average viral loads of each experimental groupdaily average viral loads of different groups; F showed the averageach experimental group.RV-SS 對(duì)鱖魚的免疫保護(hù)力出的弱毒株MSRV-SS是否可為鱖魚提供抵抗強(qiáng)毒的免RV-SS 免疫一組鱖魚,18 天觀察期中該免疫組和對(duì)照用強(qiáng)毒 SCRV-GM 感染免疫組和對(duì)照組鱖魚,觀察期毒載量檢測(cè)結(jié)果,統(tǒng)計(jì)兩組累計(jì)死亡率。如圖 1-3 疫組死亡率為 0,而對(duì)照組累計(jì)死亡率為 100%,所以感染 SCRV-GM 后,其 RPS 為 100%?偟膩碚f,MS力,且可保護(hù)鱖魚抵抗強(qiáng)毒 SCRV 的感染。所以 MS。

噬斑,稀釋度,滴度


-2 MSRV-SS 10-4和 10-5稀釋度在 CPB 細(xì)胞單層上形成的染 48h 后形成的噬斑,噬斑用中性紅染液染色 3h;噬ues formed in CPB cells monolayers of MSRV-SS dilution irepresentative plaques 48h post-infection, showing plaques lution after 3h of incubation. Plaques were showed by arrow滴度的比較MSRV-SS對(duì)鱖魚無致病力,為得到最理想的弱毒隆株中篩選出復(fù)制增殖能力強(qiáng)的一株。病毒滴度,所以本實(shí)驗(yàn)將 11 株 MSRV-SS 克隆株以 0.01MTCID50試驗(yàn)測(cè)定病毒滴度。11 株克隆株滴度見表SS-7 的滴度最高,說明其在細(xì)胞中的復(fù)制增殖量以克隆株 MSRV-SS-7 的復(fù)制增殖能力最強(qiáng)。表 2-3 11 株 MSRV-SS 克隆株的滴度

【參考文獻(xiàn)】:
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博士論文
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本文編號(hào):2898778

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