本實驗自在青島膠州凡納濱對蝦水泥養(yǎng)殖池塘中采集到1株生長穩(wěn)定,環(huán)境突變后恢復(fù)能力強(qiáng)的微藻(NQD201401),對其進(jìn)行了分離和鑒定,探究了溫度、光照、鹽度以及營養(yǎng)條件對該株藻生長的影響,并初步研究了其固定化保存的工藝條件。經(jīng)16SrDNA基因序列測定,并通過在NCBI上進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果顯示該藻株(NQD201401)與微擬球藻(Nannochoropsis qaditana)相似性到達(dá)100%；系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建與分析結(jié)果與NCBI上比對結(jié)果一致。單因素溫度、光照、鹽度實驗結(jié)果表明,該藻株最適生長宜溫度(27士1)℃、鹽度20、光照120μmol·m-2s-1;以此最適生長條件設(shè)計實驗,利用Design Expert8.0軟件,以溫度、鹽度、光照為自變量,以最終藻的數(shù)量為因變量進(jìn)行綜合培養(yǎng)實驗;實驗所得數(shù)據(jù)輸入Design Expert 8.0軟件,進(jìn)行響應(yīng)面模型分析,得到回歸方程如下：Y=2.58613-0.34148xX1+0.15582×X2+0.31539×X3+0.025695×X1×X2+0.17847xX1× X3+0.046528×X2×X3-0.54675xX12-0.27668×X22-0.35721×X32(R2=0.8655)該回歸方程中Y值為響應(yīng)值(藻細(xì)胞數(shù)量),X1、X2、X3分別代表溫度、鹽度和光照。優(yōu)化結(jié)果顯示,在培養(yǎng)液為f/2時,該藻在溫度25.8℃、鹽度23、光照140μmol·m-2s-1時藻細(xì)胞可達(dá)到最大密度,最大值可為(2.714±0.925)×107cell/mL。不同氮磷含量對該株藻生長的影響實驗結(jié)果提示：在環(huán)境磷濃度小于0.11mg/L時,該藻生長受到限制；環(huán)境氮水平對該株藻的生長影響較小,當(dāng)?shù)妆葹?.8 (NaNO37.5gm/L, NaH2PO444mg/L)時該株藻生長最好。鐵元素對該株藻生長影響實驗結(jié)果表明：檸檬酸鐵含量39mg/L時藻的生長密度最大,在檸檬酸鐵含量為390mg/L時,該藻生長緩慢,明顯受到抑制,而在0.39mg/L時,藻達(dá)到穩(wěn)定期時間短,但藻細(xì)胞密度低。錳元素對該株藻生長影響實驗結(jié)果表明,MnCl2·4H2O0.178mg/L時,藻細(xì)胞密度最大,生長速率最快。進(jìn)行了加的斯微擬球藻(N. qaditana) NQD201401固定化實驗,初步探究了不同海藻酸鈉、聚乙烯醇對固定化小球的影響,獲得其最佳條件為海藻酸鈉6%,在3%的CaCl2溶液中固定30min,最大包埋藻細(xì)胞數(shù)量為106cell/mL
【學(xué)位單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：S917.3
【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 綜述
    1 前言
        1.1 微藻在生態(tài)系統(tǒng)中的作用
        1.2 微藻對養(yǎng)殖環(huán)境中的水質(zhì)影響
        1.3 微藻對養(yǎng)殖水體中病害的影響
        1.4 營養(yǎng)元素對微藻生長的作用
            1.4.1 氮、磷對微藻的生長的作用與影響
            1.4.2 微量元素對微藻生長的作用與影響
        1.5 環(huán)境因素對微藻生長的影響
    2 微藻的分離提純與無菌化方法的簡介
        2.1 微藻的分離提純方法
            2.1.1 平板分離法
            2.1.2 微吸管分離法
            2.1.3 96孔板分離法
            2.1.4 水滴分離法
        2.2 微藻的無菌化
            2.2.1 物理方法
            2.2.2 化學(xué)方法
    3 微藻的鑒定
        3.1 傳統(tǒng)鑒定方法
            3.1.1 形態(tài)學(xué)分類方法
            3.1.2 色素體分類方法
        3.2 分子鑒定法
    4 藻種的保存及固定化
        4.1 藻種保存方法
        4.2 微藻的固定化
    5 本實驗研究的目的及意義
第二章 養(yǎng)殖池塘藻類種群變動與優(yōu)勢藻
    1 前言
    2 采樣調(diào)查
        2.1 采樣地點
        2.2 采樣時間和模式
        2.3 樣品計數(shù)與分類方法
    3 采樣結(jié)果
    4 討論
第三章 微藻的分離與鑒定
    1 優(yōu)勢藻種的分離
        1.1 實驗材料
        1.2 分離提純方法
    2 分子生物學(xué)分類鑒定
        2.1 微藻樣本測序
        2.2 微藻鑒定結(jié)果
            2.2.1 系列分析
            2.2.2 進(jìn)化樹的構(gòu)建
    3 討論
第四章 溫度、光照、鹽度與營養(yǎng)元素對加的斯微擬球藻(N.gaditana)NQD201401的生長的影響
    1 引言
    2 溫度、光照、鹽度實驗
        2.1 試驗材料
        2.2 實驗設(shè)計
        2.3 實驗方法
            2.3.1 溫度實驗方法
            2.3.2 光照實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 溫度實驗
        3.3 鹽度實驗
    4 培養(yǎng)條件優(yōu)化分析
        4.1 實驗材料
        4.2 實驗設(shè)計
        4.3 數(shù)據(jù)處理
    5 營養(yǎng)元素對微擬球藻(NQD201401)生長的影響
        5.1 引言
        5.3 實驗結(jié)果
    6 最佳生長條件下藻株的生長
        6.1 實驗方法
        6.2 實驗結(jié)果
    7 討論
第五章 微擬球藻的固定化技術(shù)初探
    1 引言
    2 包埋小球的制做
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗設(shè)計
        2.3 實驗方法
        2.4 實驗結(jié)果與分析
    3 包埋藻量選擇
        3.1 實驗材料
        3.2 實驗設(shè)計
        3.3 實驗方法
        3.4 數(shù)據(jù)處理
        3.5 實驗結(jié)果
        3.6 討論
參考文獻(xiàn)
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致謝
個人簡歷

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本文編號：2849228