【摘要】：本文研究人工感染熒光假單胞菌對(duì)草魚血清抗氧化指標(biāo)、非特異性免疫指標(biāo)以及免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響,為草魚抗病機(jī)制的研究提供了有價(jià)值的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。1、選取兩種品系草魚幼魚:普通草魚(P組)180尾初始體重為(54.32±9.74)g,初始體長為(13.92±1.68)cm,抗病草魚(K組)180尾初始體重約(58.44±7.26)g,初始體長為(14.86±2.07)cm,組內(nèi)隨機(jī)分為3個(gè)平行,腹腔注射2×10~7CFU/mL熒光假單胞菌菌液0.1 ml/尾,試驗(yàn)組依次標(biāo)記為1~21 d,對(duì)照組記為D。計(jì)算21 d內(nèi)不同時(shí)間段死亡尾數(shù)和累計(jì)死亡率。結(jié)果顯示試驗(yàn)組K組相比P組累計(jì)死亡率低4.5%,由此可見人工感染熒光假單胞菌后抗病草魚品系比普通草魚品系抗病力較強(qiáng)。2、取同上兩種品系草魚幼魚人工感染后,于0 d,1 d,3 d,7 d,14 d,21 d分別采集血清,試驗(yàn)組依次標(biāo)記為1~5,對(duì)照組記為0,分析不同時(shí)間點(diǎn)草魚血清中各項(xiàng)抗氧化指標(biāo)SOD,CAT,GSH-Px,MDA,非特異性免疫指標(biāo)ALB,TP,ALT,AST,AKP,ACP,LYZ表達(dá)變化情況。結(jié)果顯示,P組中T-SOD呈先升后降趨勢(shì)(P0.05),CAT、MDA、ALT、AST、AKP、ACP、LYZ均呈先升后降的顯著性上調(diào)(P0.05),GSH-Px呈持續(xù)升高趨勢(shì)(P0.05),A/G呈先降后升趨勢(shì)(P0.05);K組中除ACP呈持續(xù)升高趨勢(shì)(P0.05)不同于P組,其余整體升降趨勢(shì)均與P組基本一致。與對(duì)照組比較發(fā)現(xiàn)兩種品系草魚均在接受人工感染刺激后產(chǎn)生了基礎(chǔ)的內(nèi)環(huán)境自由基適應(yīng)性修復(fù),兩組以CAT、ACP變化倍率最為顯著,綜合對(duì)比結(jié)果顯示抗病草魚品系比起普通草魚品系應(yīng)對(duì)感染更為敏感且快速。3、選擇7個(gè)免疫相關(guān)基因TLR4、MyD88、TRAF6、NEMO、NF-κB、IL-1β及IL-6,分析人工感染熒光假單胞菌后兩種品系草魚皮膚、鰓、腸組織中的各基因時(shí)空表達(dá)以及相關(guān)Toll樣受體信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路與免疫相關(guān)因子的調(diào)控。結(jié)果表明:7種目標(biāo)基因均能由熒光假單胞菌刺激誘導(dǎo)表達(dá);兩種品系草魚中7種基因均能激活兩種免疫信號(hào)通路及相關(guān)下游組分的表達(dá);IL-1β在熒光假單胞菌感染草魚后黏膜免疫系統(tǒng)中表達(dá)最為顯著。
【學(xué)位授予單位】：天津農(nóng)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S943

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本文編號(hào)：2801573