【摘要】：目前已有大量的研究表明高氟會抑制魚類的生長發(fā)育,但對其影響機制還尚無定論。內分泌的調節(jié)對機體的生長發(fā)育至關重要,下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT)軸是內分泌系統(tǒng)的成員之一。為探究氟是否通過影響魚類HPT軸影響魚類正常生長發(fā)育,本試驗選用兩月齡健康斑馬魚,隨機分為3組,分別為對照組(0mg/L),40mg/L和80 mg/L氟暴露組。分別在氟暴露45 d和90 d時,對斑馬魚的生長發(fā)育狀況進行記錄,并通過HE染色對斑馬魚甲狀腺進行組織病理學觀察,用酶聯(lián)免疫ELISA檢測魚體內T3和T4激素水平,最后對斑馬魚頭部和肝臟組織提取總RNA,應用實時熒光定量PCR方法檢測HPT軸相關基因的表達。試驗結果如下：1.對生長發(fā)育分析結果顯示,氟暴露45 d時,雌雄斑馬魚體重、增重率、特定增重率及肥滿度均表現(xiàn)為40 mg/L促進80 mg/L抑制,體長及增長率均表現(xiàn)為隨著濃度的升高生長抑制作用越大。氟暴露90天時除雄魚肥滿度外,其他各性別各指標均隨著濃度的上升而下降。2.甲狀腺組織病理學結果顯示,氟暴露可造成斑馬魚甲狀腺濾泡的病變,包括濾泡腫大、上皮細胞呈扁平狀、增生和內褶,膠質萎縮或呈泡沫狀等。且隨著暴露濃度增大和時間的延長,甲狀腺濾泡的病變越嚴重；肝臟組織病理學結果顯示,40 mg/L氟暴露組在45 d時就發(fā)生了脂肪樣變、血栓等病變,且暴露濃度越高越嚴重。在氟暴露90d時,雌魚肝臟脂肪樣變、血栓情況加深,雄魚80 mg/L組肝細胞大量溶解,細胞核聚集,肝組織嚴重受到損傷。3.甲狀腺激素T3和T4 ELISA結果顯示,氟暴露可影響斑馬魚體內甲狀腺激素T3和T4的水平及T3/T4的比值,且影響程度隨暴露時間、濃度及性別不同而不同。總體上分析,暴露45 d時,氟可提高T3和T4水平,但T3/T4比值降低。氟暴露90 d時,除80mg/L組雌魚T3水平和T3/T4比值降低外,其他各組T3水平和T3/T4比值均升高,但T4水平均降低。4.對氟暴露后斑馬魚HPT軸CRH、TSH、TG、NIS, TTR、DIO1、DIO2、TRα、TRβ和iUGT1ab等10個基因的表達量結果分析顯示：氟暴露45 d時,雌斑馬魚40 mg/L組除CRH與TRRα外,其他8個基因表達均顯著下調,80 mg/L組除TG、NIS、TTR及TRα外,其他6個基因表達均顯著下調；雄魚氟暴露45 d時,40mg/L組除CRH, NIS及D1O1外，其他7個基因表達均顯著上調,80 mg/L組除UGT1ab與TTR基因外,其他8個基因表達均顯著上調。氟暴露90 d時,雌魚40 mg/L組DIO1、DIO2 mRNA和80 mg/L組TG、DIO1、 DIO2、TRα、TRβ mRNA表達顯著上調,40 mg/L組TTR、TRα和80 mg/L組UGT1ab mRNA表達顯著下調,其余都未有顯著變化；雄魚40 mg/L組TSH、TG、DIO1、TTR、TRα和80mg/L TG、DIO1、TRα mRNA表達均顯著上調,40mg/L組CRH和80mg/L組CRH、DIO2、TTR、UGT1ab mRNA表達顯著下調。試驗結果表明,氟暴露可通過影響斑馬魚甲狀腺和肝臟組織形態(tài)、甲狀腺激素水平影響其生長發(fā)育,且隨著暴露濃度的增加及暴露時間的延長影響逐漸增加。氟對斑馬魚HPT軸10個相關基因的表達均有影響,且影響的大小與暴露濃度、時間和性別有關,提示氟可通過影響斑馬魚HPT軸中基因的表達來干擾機體內甲狀腺激素的含量,進而影響機體的生長發(fā)育。本試驗研究結果為氟影響斑馬魚生長發(fā)育機制提供基礎依據(jù)。
【學位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S917.4
【圖文】：

圖３－１l#暴露４５邋ｄ和９０邋ｄ時斑馬魚Ｔ３含量逡逑Ｆｉｇ．３－１邋Ｔｈｅ邋Ｔ３邋ｃｏｎｃｅ打ｔｒａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｚｅｂｒａｆｉｓｈ邋ａｆｔｅｒ邋ｅｘｐｏｓｅｄ邋ｔｏ邋ｆｌｕｏｒｉｄｅ邋ｆｏｒ邋４５邋ａｎｄ邋９０邋ｄａｙｓ逡逑酶聯(lián)免疫結果顯示（圖３－１）：雄魚染毒４５邋ｄ時Ｔ３含量對照組＜４０ｍｇ／Ｌ組＜８０ｍｇ／Ｌ逡逑組，４０邋ｍｇ／Ｌ組與對照組相比片＞０．０５，沒有顯著性差異，但８０邋ｍｇ／Ｌ組與對照組和４０邋ｍｇ／Ｌ逡逑組相比公＜0．0５，有顯著性差異。染毒９０ｄ時，４０ｍｇ／Ｌ組與對照組相比公＞０．０５，沒有顯逡逑著性差異；８０邋ｍｇ／Ｌ組與對照組和４０邋ｍｇ／Ｌ組相比Ｔ３含量明顯增多，＾＜０．０５，有顯著性逡逑差異。染毒４５邋ｄ化與對照組相比雌魚４０邋ｍｇ／Ｌ組Ｔ３含量明顯升高，統(tǒng)計分析ｆ邋＜０．０５，逡逑兩者有顯著性差異；８０邋ｍｇ／Ｌ組Ｔ３含量與對照組相比沒有明顯差異，但與４０邋ｍｇ／Ｌ組相比逡逑有顯著性降低。染毒９０邋ｄ時，與對照組相比雌魚４０邋ｍｇ／Ｌ組和８０邋ｍｇ／Ｌ組Ｔ３含量分別增逡逑多和減少

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【引證文獻】

相關會議論文 前2條

1 于燕妮;官志忠;劉家騮;;慢性氟中毒對甲狀腺的影響[A];中國營養(yǎng)學會首屆微量元素專題討論會論文摘要匯編[C];1985年

2 曹謹玲;陳劍杰;王俊東;武向添;李運東;謝凌天;;氟在鯉魚組織中的分布及對鰓的毒性研究[A];2012年中國水產(chǎn)學會學術年會論文摘要集[C];2012年

本文編號：2798512