【摘要】：本課題針對魚類運輸過程中出現(xiàn)的應(yīng)激問題,綜合分析了運輸應(yīng)激的作用機制,并通過向水體中添加維生素C(Vc)獲得了緩解氨氮和運輸應(yīng)激的效果,為解決水產(chǎn)動物氨氮和運輸應(yīng)激問題提供了新的思路和研究方向,具有重要的應(yīng)用意義。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.水中添加Vc對鯉魚氨氮急性毒性的緩解作用的研究。選取鯉魚運輸和養(yǎng)殖過程中的重要應(yīng)激源氨氮,建立急性氧化應(yīng)激模型,并研究水中添加Vc對模型中鯉魚氧化應(yīng)激的緩解作用。首先進(jìn)行鯉魚的氨氮急性毒性研究,得到氨氮對鯉魚的96 h全致死最低濃度為145.00 mg/L,對應(yīng)非離子氨濃度為3.00 mg/L;96 h LC50為79.75 mg/L,對應(yīng)非離子氨濃度為1.65 mg/L。其次,在氨氮致死145.00 mg/L濃度下,添加不同濃度Vc,得到30 mg/L濃度下,96 h脅迫時間內(nèi),實驗魚全部存活。并且發(fā)現(xiàn)Vc濃度可以在該實驗環(huán)境下6 h內(nèi)維持穩(wěn)定,并測得鯉魚血清中Vc濃度顯著升高。2.水中添加Vc緩解鯉魚氧化應(yīng)激反應(yīng)的機理研究。利用氨氮脅迫建立鯉魚氧化應(yīng)激模型,在50%96 h LC50氨氮(40 mg/L TA-N,0.83 mg/L NH3-N)濃度下添加Vc,分別設(shè)置對照組(0 mg/L TA-N)、模型組(40 mg/L TA-N)和緩解組(40 mg/L TA-N+25 mg/L Vc),進(jìn)行96 h氨氮脅迫實驗。結(jié)果顯示,與對照組相比,經(jīng)12、24、48和96 h氨氮脅迫后,模型組鯉魚血清生化指標(biāo),如皮質(zhì)醇和血糖含量,谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和堿性磷酸酶(AKP)活性,抗氧化指標(biāo),如超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)含量,肝臟熱休克蛋白70(HSP70)表達(dá)量均不同程度的升高,出現(xiàn)顯著性變化,并且隨著脅迫時間的延長,鯉魚鰓組織結(jié)構(gòu)受到的損傷逐漸加重。上述指標(biāo)的變化,說明氨氮脅迫成功誘導(dǎo)魚體內(nèi)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),影響鯉魚的正常生理狀態(tài),本實驗氧化應(yīng)激模型建立成功。與模型組相比,添加Vc的緩解組鯉魚中的上述指標(biāo)在不同的脅迫時間下表現(xiàn)出不同程度的下降趨勢,變化顯著。緩解組鯉魚鰓組織結(jié)構(gòu)較模型組受到的損傷較輕。這說明水中添加的Vc可以有效緩解由氨氮脅迫引起的鯉魚體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng),減輕氧化損傷。3.水中添加Vc緩解鯉魚運輸應(yīng)激的研究。分為對照組、模型組和緩解組(25 mg/L Vc),模型組和緩解組設(shè)置為200 g/L擁擠密度下汽車以60 km/h速度運輸5 h。與對照組相比,經(jīng)5 h的運輸應(yīng)激后,模型組鯉魚血清生化指標(biāo),如皮質(zhì)醇和血糖含量,ALT、AST和AKP活性,抗氧化指標(biāo),如SOD、CAT和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性,MDA含量,肝臟HSP70和熱休克蛋白90(HSP90)表達(dá)量均不同程度的升高,出現(xiàn)顯著性變化。肝臟腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達(dá)量未出現(xiàn)顯著性變化。模型組鯉魚鰓組織結(jié)構(gòu)受到損傷,肌肉氨基酸組成和質(zhì)構(gòu)特性也出現(xiàn)顯著性變化。這說明運輸應(yīng)激誘導(dǎo)魚體產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),對機體產(chǎn)生不利影響,造成氧化損傷,運輸應(yīng)激模型成功建立。與模型組相比,緩解組鯉魚血清中皮質(zhì)醇和血糖含量,ALT、AST和AKP活性均顯著降低。SOD、CAT活性和MDA含量也顯著低于模型組。緩解組鯉魚肝臟中HSP70表達(dá)量也顯著降低,HSP90表達(dá)量變化不顯著,TNF-α表達(dá)量顯著升高。緩解組鰓組織結(jié)構(gòu)并未受損,結(jié)構(gòu)功能完整。以上結(jié)果表明運輸應(yīng)激對鯉魚產(chǎn)生了不利影響,誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),而水中添加的Vc可以進(jìn)入魚體內(nèi),在一定程度上緩解氧化應(yīng)激,減輕或避免氧化損傷。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S965.116

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