【摘要】：血卵渦鞭蟲(chóng)(Hematodinium)是一類(lèi)感染多種海水甲殼動(dòng)物的致病性寄生性甲藻。近年來(lái),該藻導(dǎo)致的流行病頻繁暴發(fā),嚴(yán)重影響了全球多種野生經(jīng)濟(jì)甲殼動(dòng)物的漁業(yè)生產(chǎn),對(duì)我國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展也造成了嚴(yán)重威脅。研究血卵渦鞭蟲(chóng)的發(fā)病規(guī)律、致病機(jī)制以及宿主對(duì)其免疫防御機(jī)制是防控該類(lèi)病害的基礎(chǔ)。因此,本論文分別從血卵渦鞭蟲(chóng)流行病學(xué)、生活史、致病機(jī)理及宿主免疫防御方面進(jìn)行系統(tǒng)探究,以期為血卵渦鞭蟲(chóng)流行病的防控提供一定的數(shù)據(jù)參考和理論依據(jù)。本論文主要研究結(jié)果如下:1.采用血涂片和分子生物學(xué)方法對(duì)我國(guó)東部沿海地區(qū)野生和養(yǎng)殖蟹類(lèi)感染血卵渦鞭蟲(chóng)狀況進(jìn)行調(diào)查,發(fā)現(xiàn)血卵渦鞭蟲(chóng)在我國(guó)分布十分廣泛。在遼寧、山東、浙江地區(qū)的野生三疣梭子蟹和廣東的野生擬穴青蟹(Scylla Paramamosain)中均發(fā)現(xiàn)了血卵渦鞭蟲(chóng)的感染;對(duì)山東青島三疣梭子蟹重要養(yǎng)殖基地蝦蟹混養(yǎng)池塘的連續(xù)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn),血卵渦鞭蟲(chóng)病在三疣梭子蟹整個(gè)養(yǎng)殖周期內(nèi)持續(xù)發(fā)生,感染率呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì),最高值出現(xiàn)在7月末,可達(dá)90%。伴隨著三疣梭子蟹血卵渦鞭蟲(chóng)病的暴發(fā),混養(yǎng)池塘中斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)大批量死亡,經(jīng)檢測(cè)確定為血卵渦鞭蟲(chóng)感染所致,這在國(guó)內(nèi)外尚屬首次發(fā)現(xiàn)和報(bào)道。2.通過(guò)分子生物學(xué)和體外培養(yǎng)技術(shù)手段,研究了感染養(yǎng)殖三疣梭子蟹和斑節(jié)對(duì)蝦的血卵渦鞭蟲(chóng)的生物學(xué)特征。成功建立了血卵渦鞭蟲(chóng)的體外培養(yǎng),觀測(cè)到其生活史過(guò)程中歷經(jīng)的絲狀滋養(yǎng)體、類(lèi)變形蟲(chóng)狀滋養(yǎng)體、團(tuán)塊狀聚合體、裂殖體、蛛網(wǎng)狀滋養(yǎng)體、孢子體、孢子母細(xì)胞、孢子前細(xì)胞和孢子生活史階段。分子遺傳分析結(jié)果顯示感染三疣梭子蟹和斑節(jié)對(duì)蝦的血卵渦鞭蟲(chóng)的種群同源性高達(dá)99.2%,與我國(guó)其他地區(qū)發(fā)現(xiàn)的血卵渦鞭蟲(chóng)屬于同一類(lèi)群(Hematodinium perezi II)。3.通過(guò)血涂片法和HE染色法初步探究了血卵渦鞭蟲(chóng)感染三疣梭子蟹后的增殖過(guò)程和致病機(jī)理。發(fā)現(xiàn)血卵渦鞭蟲(chóng)主要寄生于宿主肝胰腺、心臟等主要器官的血腔和血竇內(nèi),其大量增殖可導(dǎo)致宿主肝胰腺、心臟、鰓和肌肉等重要器官、組織發(fā)生系統(tǒng)性病變,最終宿主消化、代謝、呼吸等功能的紊亂和喪失引發(fā)死亡。4.初步研究了三疣梭子蟹抵御血卵渦鞭蟲(chóng)侵染的免疫響應(yīng)中發(fā)揮重要作用的抗氧化酶GPx。首次克隆獲得三疣梭子蟹GPx基因全長(zhǎng)c DNA序列,系統(tǒng)發(fā)育分析顯示其優(yōu)先與甲殼動(dòng)物GPxs聚為一枝;三疣梭子蟹GPx蛋白序列的預(yù)測(cè)三維結(jié)構(gòu)由3個(gè)α-螺旋和7個(gè)β-折疊片層組成,其催化位點(diǎn)為硒半胱氨酸(U),位于α1螺旋和β3折疊片層結(jié)構(gòu)中;遭受血卵渦鞭蟲(chóng)侵染后,GPx基因在三疣梭子蟹血細(xì)胞、肝胰腺、心臟和肌肉組織中的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平發(fā)生顯著性變化,表明GPx在三疣梭子蟹抵御血卵渦鞭蟲(chóng)的免疫響應(yīng)過(guò)程中可通過(guò)緩解甲殼宿主體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)從而對(duì)宿主產(chǎn)生重要的防護(hù)功能。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院海洋研究所)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S945
【圖文】：

圖 1.1 血卵渦鞭蟲(chóng)的全球分布圖Fig. 1.1 Global distribution of Hematodinium spp.（Small，2012）表 1.1 血卵渦鞭蟲(chóng)的主要海水甲殼類(lèi)宿主（李才文和許文軍，2014）Table 1.1 Major crustacean species infected by Hematodinium spp.宿主類(lèi)別 種名 發(fā)生地點(diǎn) 參考文獻(xiàn)螃蟹Callinectes sapidus 美國(guó)東海岸Newman & Johnson, 1973;Johnson, 1986Callinectes similes 美國(guó)東海岸 Messick & Shields, 2000Cancer borealis 美國(guó)紐約灣 MacLean & Ruddell, 1978Cancer irroratus 美國(guó)紐約灣 MacLean & Ruddell, 1978Cancer pagurus法國(guó)比斯開(kāi)灣英吉利海峽Latrouite et al, 1988;Stentiford et al, 2002

圖 1.2 血卵渦鞭蟲(chóng)在我國(guó)東部沿海的分布（Small，2012）. 1.2 Geographic distribution of Hematodinium spp. in the eastern coast of （Small，2012）卵渦鞭蟲(chóng)引發(fā)的三疣梭子蟹“牛奶病”、“黃水病”等病蟹均會(huì)化，主要表現(xiàn)為食欲下降，精神萎靡，反應(yīng)能力差，行動(dòng)遲緩水處，出現(xiàn)“趴池”現(xiàn)象直至死亡。病蟹外殼及內(nèi)部組織器官變，嚴(yán)重者主要表現(xiàn)為體色暗淡，部分附肢容易脫落，第五附的關(guān)節(jié)膜處可見(jiàn)呈濁白色的病變。打開(kāi)前蓋，可見(jiàn)肝胰腺模糊呈，呈土黃色或黑褐色，甲殼腔內(nèi)的血淋巴由正常的藍(lán)青色且具

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本文編號(hào)：2730568