【摘要】：中華鱘(Acipenser sinensis Gray),主要生活在我國(guó)東海和黃海大陸架,是唯一秋季產(chǎn)卵(長(zhǎng)江中華鱘)的物種,具有典型溯河洄游產(chǎn)卵的習(xí)性：由于過(guò)度捕撈、水體污染以及水利工程建設(shè)等諸多因素,導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境遭到嚴(yán)重破壞,野生種群不斷下降,分布區(qū)域逐漸縮小。1996年被國(guó)際自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)列入紅皮書(shū),劃分到瀕危等級(jí)。達(dá)氏鱘(Acipenser dabryanus),主要分布在長(zhǎng)江上游干流及金沙江下游,是鱘魚(yú)類(lèi)相對(duì)小型的淡水定居性魚(yú)類(lèi),沒(méi)有長(zhǎng)距離的產(chǎn)卵洄游行為。為長(zhǎng)江上游一級(jí)急切保護(hù)魚(yú)類(lèi),是長(zhǎng)江珍稀瀕危魚(yú)類(lèi)的典型代表。本論文對(duì)從出生至繁殖均生活在人工養(yǎng)殖環(huán)境中的中華鱘和達(dá)氏鱘子一代精子生物學(xué)進(jìn)行研究,探討精子活力與陽(yáng)離子及葡萄糖之間的關(guān)系,并與野生親本中華鱘精子活力進(jìn)行比較,以期對(duì)現(xiàn)行淡水人工規(guī)�；庇夹g(shù)有積極指導(dǎo)作用。本論文也對(duì)子一代中華鱘精子在超低溫冷凍保存下的效果進(jìn)行了研究,重點(diǎn)開(kāi)展超低溫對(duì)精子中能量代謝酶和抗氧化酶活性影響的研究,通過(guò)不同時(shí)間段的冷凍比較精子所受的影響,初步探討造成冷凍損傷的原因,為子一代中華鱘精子冷凍保存研究和應(yīng)用奠定理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。其主要內(nèi)容概要如下：1、配制不同濃度Na+、K+、Ca2+、Mg2+和葡萄糖溶液,對(duì)子一代中華鱘與子一代達(dá)氏鱘新鮮精子活力進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果如下：子一代中華鱘精子在Na+濃度為4%‰時(shí),精子壽命和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間均達(dá)到最高,分別為263.33 s和45.33 s。K+濃度為0.01%o時(shí),精子壽命最長(zhǎng),為132.33 s,而最佳快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間(46.00s)則出現(xiàn)在K+濃度為0.008‰時(shí)。精子壽命和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間在Ca2+中變化規(guī)律相似,均在Ca2+4%‰濃度時(shí)達(dá)到最高值,分別為53.67s和130.67 s。Mg2+濃度為3‰時(shí),精子壽命達(dá)到最高值117.33 s,而快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間最高值(27.20 s)出現(xiàn)在Mg2+濃度為2‰時(shí)。葡萄糖濃度為4%‰時(shí),精子壽命達(dá)到最高值282.80 s,當(dāng)濃度為3‰時(shí),快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間達(dá)到最高值55.88 s。子一代達(dá)氏鱘精子在Na+濃度為2.5‰時(shí),精子壽命最長(zhǎng),為219.67s,在濃度為2%‰時(shí)精子的快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間最長(zhǎng),為66.67s；精子對(duì)K+濃度在0.004%‰時(shí)精子壽命和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間最長(zhǎng),分別為124.67s、52.67s。而后隨濃度的增加活力明顯受到抑制；與Na+、K+相反,隨著Mg2+、Ca2+濃度的增加,分別超過(guò)3‰、1‰濃度后精子產(chǎn)生聚集現(xiàn)象；隨著葡萄糖濃度的增加,精子壽命和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間逐漸延長(zhǎng)。表明,Na+、K+溶液可以延長(zhǎng)子一代中華鱘和子一代達(dá)氏鱘精子的快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間和壽命時(shí)間,在 Mg2+、Ca2+較低濃度下都表現(xiàn)出對(duì)精子產(chǎn)生較強(qiáng)的抑制作用,外源性葡萄糖可被子一代精子利用,適量的濃度提高精子活力,延長(zhǎng)精子精子壽命。與野生親本中華鱘精子相比,子一代中華鱘精子壽命和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間均有所下降。2、對(duì)子一代中華鱘精子超低溫冷凍保存30d、45d和60d。解凍離心后檢測(cè)子一代中華鱘精子和精漿中能量代謝酶,包括總ATP酶、琥珀酸脫氫酶(SDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和酸性磷酸酶(ACP)；抗氧化酶,包括超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽還原酶(GR)。結(jié)果表明,超低溫冷凍前后精子和精漿中酶的活性呈顯著性差異(P0.05)。超低溫冷凍后精子中除GR外總ATP酶、SDH、LDH、 CK、ACP、SOD、CAT、GSH-PX活性顯著下降,精漿中的酶顯著上升。另外,精子和精漿中能量代謝酶和抗氧化酶系統(tǒng)在低溫冷凍保存中隨保存時(shí)間的變化而發(fā)生變化。低溫冷凍保存30d時(shí),精子中除GR外其他酶的活性均高于45d和60d,呈顯著性差異(P0.05)；精漿中酶的活性則與之相反。冷凍30d、45d和60d之間呈顯著性差異(P0.05),表明隨著冷凍時(shí)間的延長(zhǎng),精子所受到的損傷效應(yīng)更為嚴(yán)重。隨低溫冷凍時(shí)間的延長(zhǎng),精子中GR的活性呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),精漿與之相反。超低溫冷凍對(duì)子一代中華鱘精子和精漿中酶活性的影響大,冷凍時(shí)間的控制對(duì)低溫冷凍來(lái)說(shuō)也是重要因素。
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S917.4
【圖文】：

圖１．１中華爵外形特征逡逑：■，邐邋Ｆｉｇ．邋１．１邋Ｓｈａｐｅ邋ｏｆ邋Ｃｈｉｎｅｓｅ邋ｓｔｕｒｇｅｏｎ邋（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒ邋ｓｉｎｅｎｓｉｓ）逡逑中華爵，隸屬于爵科鱷屬，是我國(guó)特有的江海澗游性魚(yú)類(lèi)，主要分布我國(guó)逡逑的東海、黃海、珠江及長(zhǎng)江干流。１９８８年被列為國(guó)家一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，目前被逡逑國(guó)際自然保護(hù)聯(lián)盟（ＩＵＣＮ邋）列為極危等級(jí)（Ｃ地ｃａｌｌｙ邋Ｅｎｄａｎｇｅｒｄｅ，Ｃ民）逡逑

圖１．１中華爵外形特征逡逑：■，邐邋Ｆｉｇ．邋１．１邋Ｓｈａｐｅ邋ｏｆ邋Ｃｈｉｎｅｓｅ邋ｓｔｕｒｇｅｏｎ邋（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒ邋ｓｉｎｅｎｓｉｓ）逡逑中華爵，隸屬于爵科鱷屬，是我國(guó)特有的江海澗游性魚(yú)類(lèi)，主要分布我國(guó)逡逑的東海、黃海、珠江及長(zhǎng)江干流。１９８８年被列為國(guó)家一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，目前被逡逑國(guó)際自然保護(hù)聯(lián)盟（ＩＵＣＮ邋）列為極危等級(jí)（Ｃ地ｃａｌｌｙ邋Ｅｎｄａｎｇｅｒｄｅ，Ｃ民）逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2716866