抗病毒中草藥的篩選及其對擬穴青蟹部分血清免疫因子的影響

發(fā)布時間：2020-06-10 05:03

【摘要】：擬穴青蟹(Scylla paramamosain)俗稱青蟹,是我國沿海地區(qū)非常重要的養(yǎng)殖品種。但是,隨著養(yǎng)殖面積的擴大和養(yǎng)殖密度的增加,青蟹病害呈越來越高發(fā)的趨勢。由病毒、細菌和寄生蟲等導致的病害問題,嚴重阻礙了青蟹養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。近年來,江浙、廣東、福建等青蟹主要養(yǎng)殖地區(qū)出現(xiàn)了嚴重的疾病,青蟹雙順反子病毒-1(Mud crab dicistrovurus-1)和青蟹呼腸孤病毒在養(yǎng)殖青蟹和野生青蟹中都有較高的攜帶率,是導致疾病發(fā)生的重要病原。對于病毒病來說,沒有有效的治療藥物,提前預防是降低病害發(fā)生,減少經濟損失的重要途徑。中草藥不僅能夠殺菌消毒、促進水生動物的生長,而且能夠增強其免疫功能、提高抗病能力。本文通過利用中草藥水提取物浸泡擬穴青蟹,通過比較成活率,篩選抗病毒中草藥,并研究這些中草藥對青蟹部分血清免疫因子的影響,探討抗病機理。首先,經過預備實驗,用200種中草藥水提取物對擬穴青蟹進行浸泡,篩選出能夠提高擬穴青蟹成活率的中草藥。篩選出的中草藥有:虎杖、青葙子、香薷、天花粉、番石榴葉、苦參、車前草、射干、菟絲子、夏枯草、百部、白芷、柴胡、龍膽草、石榴皮和連翹16種中草藥,他們的成活率分別為:51.1%,38%,40%,56%,50%,40%,42%,60%,30%,38%,40%,40%,47%,31%,42%,50%。對照組成活率為33%,除了龍膽草和菟絲子外,其他中草藥浸泡擬穴青蟹的成活率均高于對照組。由累計死亡率結果可知,各組擬穴青蟹在用藥后第三天均開始死亡。檢測死亡擬穴青蟹蟹鰓后,發(fā)現(xiàn)番石榴葉、車前草和石榴皮水提取物浸泡擬穴青蟹沒有檢測出病毒。說明這三種中草藥水提取物能夠抑制青蟹病毒繁殖。其次,通過對青蟹的幾個免疫因子進行調查。發(fā)現(xiàn)在殼長和體重相似的情況下,不同肥滿度青蟹的免疫功能不同。養(yǎng)殖青蟹血清中的LSZ、PO、ACP、AKP活性與肥滿度之間的相關性極顯著,其中LSZ活性符合二次曲線方程、PO活性符合S曲線方程、AKP活性和ACP活性冪方程的規(guī)律。而野生青蟹只有SOD與肥滿度之間相關性極顯著,符合對數(shù)方程規(guī)律。最后,研究了番石榴葉、連翹、天花粉和甘草水提物對擬穴青蟹免疫功能的影響。其中,番石榴葉水提取物浸泡青蟹后,擬穴青蟹血清ACP、AKP、SOD和LSZ等免疫相關酶活性都呈現(xiàn)先升高,而后降低并趨于平穩(wěn)的變化趨勢。實驗組青蟹血清AKP活性和LSZ活性于24小時時達到最大值,且均顯著高于對照組(P0.05);而ACP活性和SOD活性于48小時時達到最大值,且均顯著高于對照組(P0.05);72小時時對照組青蟹PO活性突然急劇升高,且顯著高于實驗組(P0.05),其余時間實驗組與對照組間差異不顯著(P0.05);AKP只在24h達到最大值,并顯著高于對照組(P0.05)。連翹組青蟹血清ACP活性PO活性、AKP活性在48h達到最大值,并顯著高于對照組(P0.05),SOD和LSZ活性在24h達到最大值,與對照組差異不顯著(P0.05);天花粉組青蟹血清ACP和AKP在24達到最大值,并且顯著高于對照組(P0.05),LSZ和PO活性在48h達到最大值,顯著高于對照組(P0.05),SOD活性在各時間點與對照ACP組差異不顯著;甘草組青蟹血清ACP和AKP在24達到最大值,并且顯著高于對照組(P0.05),LSZ和PO活性在48h達到最大值,顯著高于對照組(P0.05),SOD活性在各時間點與對照組差異不顯著。說明被篩選出的中草藥在提高青蟹免疫功能方面具有不同的作用。總之,本研究通過從大量中草藥中篩選能夠提高青蟹免疫功能的中草藥,然后通過調查幾個青蟹免疫因子后,研究了中草藥對青蟹幾個不同免疫因子的影響,說明中草藥在提高青蟹免疫功能方面具有的不同作用,為青蟹的健康養(yǎng)殖和病害的防治提供了理論依據(jù)。
【圖文】：

肥滿度,青蟹,活力

圖 1 養(yǎng)殖青蟹 LSZ 與肥滿度之間的關系肥滿度在 15.29~41.57 的養(yǎng)殖青蟹血清 PO 活力在 0.9~130.67 U蟹 PO 活力與其肥滿度之間相關性極顯著。R 方為 0.109，對相關系驗，其肥滿度與 PO 活性符合 S 曲線規(guī)律，，r=-0.306**

青蟹,肥滿度,血清