【摘要】：牙鲆(Paralichthys olivaceus)是一種重要的海水經(jīng)濟魚類,雌性個體較雄性個體生長快,在生產(chǎn)上雌魚飼養(yǎng)周期較短,因而具有很高的經(jīng)濟價值。性別分化與性腺發(fā)育一直是魚類發(fā)育和繁殖生物學研究的重要方向。近年來,越來越多的研究表明miRNA在脊椎動物發(fā)育和生殖中發(fā)揮重要作用。我們在先前的研究中意外發(fā)現(xiàn)色素框同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)是牙鲆雌雄性腺差異表達的miR-200家族作用的潛在靶基因。CBX2是多梳蛋白(Polycomb group complex,PcG)家族的關鍵成員之一,它作為重要的轉錄因子在哺乳動物的性發(fā)育中發(fā)揮著關鍵作用。如果該基因突變或功能缺失將導致性反轉,但關于CBX2在除哺乳動物外的其他脊椎動物性別分化與性腺發(fā)育中的功能,至今尚不清楚。因而本研究在牙鲆中鑒定了cbx2基因,并采用多種分子生物學技術分析了其表達譜以及其與miR-200家族與多個性別相關基因的作用關系,為揭示miRNA通過調節(jié)cbx2基因表達而參與牙鲆性腺發(fā)育的分子機制奠定基礎。本研究利用分子克隆技術克隆了牙鲆cbx2基因的cDNA序列,該cDNA序列含有1 584bp的開放閱讀框,編碼527個氨基酸;運用生物信息學方法分析牙鲆CBX2蛋白質的理化性質與空間結構,結果顯示蛋白質分子量和等電點分別為56578.98和10.03,是一種親水性蛋白,且偏堿性,該蛋白無信號肽,無跨膜區(qū)域,且編碼該蛋白的氨基酸中以絲氨酸(Sr)的含量為最高;其二級結構中含有1個染色質結構域和4個低復雜結構域,該染色質結構域常結合甲基化氨基酸殘基;空間結構分析發(fā)現(xiàn),牙鲆CBX2蛋白以α螺旋和無規(guī)則卷曲為主;并比較了脊椎動物中cbx2的基因結構、氨基酸同源性、系統(tǒng)進化,表明cbx2基因在脊椎動物進化中較為保守,牙鲆cbx2與尼羅羅非魚與青溕的基因結構更為相似,其氨基酸同源性與杜氏，

本文編號：2699919