【摘要】：牙鲆(Paralichthys olivaceus)是一種重要的海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),雌性個(gè)體較雄性個(gè)體生長(zhǎng)快,在生產(chǎn)上雌魚(yú)飼養(yǎng)周期較短,因而具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。性別分化與性腺發(fā)育一直是魚(yú)類(lèi)發(fā)育和繁殖生物學(xué)研究的重要方向。近年來(lái),越來(lái)越多的研究表明miRNA在脊椎動(dòng)物發(fā)育和生殖中發(fā)揮重要作用。我們?cè)谙惹暗难芯恐幸馔獍l(fā)現(xiàn)色素框同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)是牙鲆雌雄性腺差異表達(dá)的miR-200家族作用的潛在靶基因。CBX2是多梳蛋白(Polycomb group complex,PcG)家族的關(guān)鍵成員之一,它作為重要的轉(zhuǎn)錄因子在哺乳動(dòng)物的性發(fā)育中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。如果該基因突變或功能缺失將導(dǎo)致性反轉(zhuǎn),但關(guān)于CBX2在除哺乳動(dòng)物外的其他脊椎動(dòng)物性別分化與性腺發(fā)育中的功能,至今尚不清楚。因而本研究在牙鲆中鑒定了cbx2基因,并采用多種分子生物學(xué)技術(shù)分析了其表達(dá)譜以及其與miR-200家族與多個(gè)性別相關(guān)基因的作用關(guān)系,為揭示miRNA通過(guò)調(diào)節(jié)cbx2基因表達(dá)而參與牙鲆性腺發(fā)育的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。本研究利用分子克隆技術(shù)克隆了牙鲆cbx2基因的cDNA序列,該cDNA序列含有1 584bp的開(kāi)放閱讀框,編碼527個(gè)氨基酸;運(yùn)用生物信息學(xué)方法分析牙鲆CBX2蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)與空間結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示蛋白質(zhì)分子量和等電點(diǎn)分別為56578.98和10.03,是一種親水性蛋白,且偏堿性,該蛋白無(wú)信號(hào)肽,無(wú)跨膜區(qū)域,且編碼該蛋白的氨基酸中以絲氨酸(Sr)的含量為最高;其二級(jí)結(jié)構(gòu)中含有1個(gè)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域和4個(gè)低復(fù)雜結(jié)構(gòu)域,該染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域常結(jié)合甲基化氨基酸殘基;空間結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),牙鲆CBX2蛋白以α螺旋和無(wú)規(guī)則卷曲為主;并比較了脊椎動(dòng)物中cbx2的基因結(jié)構(gòu)、氨基酸同源性、系統(tǒng)進(jìn)化,表明cbx2基因在脊椎動(dòng)物進(jìn)化中較為保守,牙鲆cbx2與尼羅羅非魚(yú)與青溕的基因結(jié)構(gòu)更為相似,其氨基酸同源性與杜氏，

本文編號(hào)：2699919