【摘要】：中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis),是我國重要的經(jīng)濟(jì)蟹類之一。為了研究組蛋白H1在中華絨螯蟹非濃縮核形成中的作用及在其精子發(fā)生過程中的動態(tài)變化,本文采用PCR和RACE技術(shù)獲得了中華絨螯蟹組蛋白H1基因的全長c DNA序列。通過生物信息學(xué)方法對該基因進(jìn)行了分析,其中包括:組蛋白H1的氨基酸分析,三級結(jié)構(gòu)分析和比較,同源性分析,系統(tǒng)樹分析和基因組結(jié)構(gòu)特征分析。同時(shí)采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析了組蛋白H1及H1-delta在中華絨螯蟹精巢發(fā)育不同時(shí)期的表達(dá)特征。研究結(jié)果如下:中華絨螯蟹組蛋白H1基因的全長c DNA序列為804 bp,包括79 bp的5′非編碼區(qū)(5′UTR)、185 bp的3′非編碼區(qū)(3′UTR)和540 bp的開放閱讀框(ORF),共編碼179個(gè)氨基酸,所編碼多肽的相對分子量為18.28 k Da,理論等電點(diǎn)p I為10.93。此研究首次成功確定、克隆并測序了中華絨螯蟹H1基因的全長c DNA序列。對比中華絨螯蟹、家鼠和鯽魚的H1結(jié)構(gòu)域的三級結(jié)構(gòu),證明H1的結(jié)構(gòu)域在進(jìn)化上是保守的。氨基酸序列同源性分析發(fā)現(xiàn),組蛋白H1在同一屬間的保守性很高(90%以上),但在不同屬間的保守性卻較低(50%左右),尤其是C末端結(jié)構(gòu)差異很大。實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)的結(jié)果顯示,H1及H1-delta在中華絨螯蟹精巢不同發(fā)育期均具有表達(dá),且表達(dá)量均在精母細(xì)胞時(shí)期達(dá)到最大,之后逐漸下降,到精子期時(shí)下降至最低。H1在精原細(xì)胞期、精母細(xì)胞期、精細(xì)胞期的表達(dá)量與精子期相比均呈現(xiàn)出顯著差異(P0.05),而H1-delta的表達(dá)量只有精母細(xì)胞期與精子期有顯著差異。這些研究將為探討組蛋白在中華絨螯蟹精子發(fā)生中的動態(tài)變化及進(jìn)一步探究中華絨螯蟹精子核的非濃縮成因提供依據(jù)。
【圖文】：

圖 1 精子發(fā)生過程中核堿性蛋白的替代過程Fig.1 Replacement of the basic nuclear proteins during spermatogenesis上述堿性蛋白的替換現(xiàn)象外，在精子形成過程中堿性蛋白的修飾作用對染

圖 2 中華絨螯蟹雄性生殖系統(tǒng)（胡自強(qiáng)，，1997）精小管；3.輸精管；4.貯精囊；5.副性腺；6.射精Male reproductive system in E. sinensis (Hu Ziqiangl sperm duct; 3. ductus deferens; 4. seminal vesicle;
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S917.4

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本文編號：2684796