【摘要】:青蛙和蟾蜍是常見的兩棲動(dòng)物,是生物群落中重要的組成部分之一。吸蟲和絳蟲是常見的兩棲動(dòng)物寄生蟲,嚴(yán)重影響蛙類的正常生長(zhǎng)發(fā)育,甚至引起個(gè)體死亡。近年來,隨著人類對(duì)蛙類資源利用的增加,人與蛙類的接觸越來越頻繁,部分人獸共患寄生蟲同樣對(duì)人類健康帶來潛在風(fēng)險(xiǎn)。因此,研究蛙類吸蟲和絳蟲,不僅可以保護(hù)蛙類,而且有利于提高人們防范人獸共患寄生蟲病的意識(shí)。本文擬通過對(duì)兩種蛙吸蟲和絳蟲的感染情況調(diào)查和種類鑒定,為做好人獸共患寄生蟲病的防控和保護(hù)蛙類資源提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。1.兩類寄生蠕蟲感染情況的初步調(diào)查為初步了解蛙類吸蟲和絳蟲的感染情況,于2013年7月至2014年7月,共剖檢蛙3種182只,分別為黑斑蛙(Rana nigromaculata)90只、虎紋蛙(Rana rugulosa)8只、中華大蟾蜍(Bufo gargarizans)84只。按臟器檢查、收集寄生蟲,統(tǒng)計(jì)感染率和感染強(qiáng)度。結(jié)果顯示,黑斑蛙和中華大蟾蜍體內(nèi)均檢出吸蟲和絳蟲,虎紋蛙體內(nèi)未檢出寄生蟲。其中,黑斑蛙檢出率為86.67%,體內(nèi)檢出吸蟲1625條,絳蟲47條,感染率分別為78.89%和13.33%,平均感染強(qiáng)度為22.89和3.92。中華大蟾蜍檢出率為85.71%,體內(nèi)檢出吸蟲1628條,絳蟲2條,感染率分別為85.71%和2.38%,平均感染強(qiáng)度為22.61和1。調(diào)查結(jié)果表明,本次剖檢黑斑蛙和中華大蟾蜍吸蟲的感染情況,處于一個(gè)相對(duì)較高的水平,高于國(guó)內(nèi)的其他相關(guān)報(bào)道,而絳蟲的感染情況較低,低于大部分國(guó)內(nèi)報(bào)道。本次調(diào)查檢出絳蟲為裂頭蚴,是一種人獸共患寄生蟲,雖數(shù)量很少,但依然會(huì)對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅。2.單殖吸蟲的種類鑒定為確定黑斑蛙膀胱內(nèi)單殖吸蟲的具體種類,采用形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)相結(jié)合的方法進(jìn)行種類鑒定。隨機(jī)選取30條蟲體用于形態(tài)學(xué)鑒定,4條蟲體用于分子生物學(xué)鑒定。分子生物學(xué)結(jié)果顯示,4條蟲體18S r RNA基因序列相似性均在99%以上,構(gòu)建的18S r RNA系統(tǒng)發(fā)育樹中,4條蟲體均位于多盤科(Polystomatidae)雙睪屬(Diplorchis)分支內(nèi)。結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定對(duì)蟲體的觀察,器官的測(cè)量和相關(guān)文獻(xiàn)的對(duì)比,確定本次檢出的單殖吸蟲為黑斑蛙雙睪吸蟲(Diplochis nigromaculatus)。本種吸蟲在國(guó)內(nèi)僅北京和江蘇有記錄,這是該吸蟲在上海的首次檢出。3.復(fù)殖吸蟲的種類鑒定為確定從黑斑蛙和中華大蟾蜍體內(nèi)檢出的吸蟲種類,采用觀測(cè)形態(tài)結(jié)構(gòu)的方法對(duì)2696條吸蟲進(jìn)行種類鑒定。選取部分蟲體,制作封片標(biāo)本,觀測(cè)封片蟲體的形態(tài)結(jié)構(gòu),查閱相關(guān)文獻(xiàn),與國(guó)內(nèi)已報(bào)道的吸蟲進(jìn)行比較。結(jié)果表明,檢獲的2696條吸蟲均為復(fù)殖吸蟲,隸屬于4科4屬6種,其中3種鑒定到種,分別為重盤科(Diplodiscidae)重盤屬(Diplodiscus)的短腸重盤吸蟲(D.mehrai),黑斑蛙重盤吸蟲(D.nigromaculati),似巨頸科(Macroderoididae)累智屬(Rauschiella)的蛙累智吸蟲(R.ranae)。余下3種僅能鑒定到屬,分別為重盤科重盤屬吸蟲未定種(Diplodiscus sp.),枝腺科(Lecithodendriidae)擬側(cè)殖屬吸蟲未定種(Pleurogenoides sp.),舐血科(Haematoloechidae)舐血屬吸蟲未定種(Haematoloechus sp.)。本次鑒定結(jié)果,為上海市蛙類寄生蟲研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。4.絳蟲的種類鑒定為確定從黑斑蛙和中華大蟾蜍檢獲絳蟲的種類,采用分子生物學(xué)鑒定法,隨機(jī)選取8條蟲體,提取DNA,擴(kuò)增內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)基因,對(duì)擴(kuò)增的基因片段進(jìn)行Blast序列對(duì)比以確定其種類,并通過構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹檢驗(yàn)分析結(jié)果的可靠性。結(jié)果表明,擴(kuò)增獲得的基因序列與裂頭科(Diphyllobothriidae)迭宮屬(Spirometra)猬迭宮絳蟲(S.erinacei)ITS序列相似程度最高,可初步確定本次檢獲的絳蟲是猬迭宮絳蟲,且全部為其幼蟲裂頭蚴。系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,本次檢獲裂頭蚴和蛇源裂頭蚴在一個(gè)分支內(nèi),而以哺乳動(dòng)物為宿主的裂頭蚴在另一分支,證明蛇源和蛙源裂頭蚴親緣關(guān)系較近。5.中國(guó)蛙類吸蟲種類與地理分布為了解我國(guó)蛙類寄生吸蟲的種類與地理分布,作者查閱了報(bào)道我國(guó)蛙類吸蟲的相關(guān)文獻(xiàn),依據(jù)吸蟲分類系統(tǒng)和科屬種的字母順序整理成文。共記錄在中國(guó)檢出的吸蟲4目13科29屬88種,其中多盤目1科2屬13種,棘口目1科2屬12種,后睪目1科1屬3種,斜睪目10科24屬60種。列出了每種吸蟲的中文名稱、拉丁文名稱、命名人與命名年、寄生宿主與部位、地理分布及文獻(xiàn)來源等信息,為較全面掌握我國(guó)蛙類寄生吸蟲的種類與分布情況提供了基礎(chǔ)材料。
【學(xué)位授予單位】:上海師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S947.2
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2678709