【摘要】：神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育表達(dá)下調(diào)蛋白8(NEDD8)是一種類泛素蛋白,其所介導(dǎo)的類泛素化修飾Neddylation被以Cullin為支架的復(fù)合體型E3泛素連接酶所必須。并因此參與了多種生理功能的調(diào)控,是生物體最為重要的蛋白修飾方式之一。Neddylation的類泛素化修飾已在哺乳動(dòng)物中被廣泛深入研究,但是,該蛋白修飾途徑是否影響無脊椎動(dòng)物固有免疫反應(yīng)及其作用機(jī)理尚嚴(yán)重不明。因此,我們以中華絨螯蟹這一我國(guó)重要淡水養(yǎng)殖物種為研究對(duì)象,對(duì)Neddylation修飾途徑在抗菌免疫中的功能進(jìn)行了初步研究,其結(jié)果將有助于更好地理解無脊椎動(dòng)物固有免疫的作用方式,并為中華絨螯蟹養(yǎng)殖業(yè)的細(xì)菌性病害問題解決提供理論支持。我們?cè)谥腥A絨螯蟹(Eriocheir sinensis)中克隆得到了泛素類似蛋白NEDD8,命名為Es NEDD8。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)其僅具有一個(gè)UBQ結(jié)構(gòu)域,并且在不同物種間高度保守,暗示其亦可能具有類似泛素蛋白的修飾功能。通過qRT-PCR技術(shù)分析表明EsNEDD8及其底物Cullin家族基因廣泛表達(dá)于中華絨螯蟹各個(gè)組織中;體內(nèi)攻毒實(shí)驗(yàn)表明EsCullin家族響應(yīng)病原菌脅迫呈現(xiàn)出不同趨勢(shì)的動(dòng)態(tài)表達(dá)模式,暗示其可能參與了該蟹的抗菌免疫反應(yīng)。在體外培養(yǎng)的中華絨螯蟹血細(xì)胞中分別敲降Cullin家族基因,并以兩種細(xì)菌刺激血細(xì)胞,結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗菌肽表達(dá)量出現(xiàn)不同程度的下調(diào)。為進(jìn)一步探究其可能的作用機(jī)制,本研究利用高度選擇性NAE酶小分子抑制劑MLN4924抑制NEDD8與Cullin結(jié)合,并以不同細(xì)菌刺激,結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗菌肽表達(dá)量顯著下調(diào),表明EsNEDD8通過Cullin介導(dǎo)的類泛素化修飾途徑調(diào)控抗菌肽表達(dá)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),Cullin的Neddylation修飾被抑制會(huì)導(dǎo)致ERK磷酸化效率的明顯下降,并抑制細(xì)菌所誘導(dǎo)Toll通路重要信號(hào)分子Dorsal的細(xì)胞核轉(zhuǎn)運(yùn)。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)Neddylation途徑修飾Cullin調(diào)控ERK磷酸化,進(jìn)而影響Dorsal進(jìn)入細(xì)胞核,從而調(diào)控相關(guān)抗菌肽的表達(dá),影響抗菌活性。
【圖文】：

圖 1.1 透射電鏡下的中華絨螯蟹血細(xì)胞[2]A. 透明細(xì)胞 B. 半顆粒細(xì)胞 C. 半顆粒細(xì)胞 D. 顆粒細(xì)胞Fig. 1.1 Transmission electron microscopy of E. sinensisA. Hyalinocytes B. Semigran ulocytes C. Semigran ulocytes D. Gran ulocytes粒細(xì)胞內(nèi)含有大量嗜酸性的顆粒，類似果蠅的晶狀細(xì)胞，，是儲(chǔ)存酚氧細(xì)胞類群，因此主要功能為介導(dǎo)黑化[3](表 1.1)。

華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文B 同源物) 被泛素化修飾后經(jīng)蛋白酶體途徑降解，從而使核轉(zhuǎn)錄因子 Dorsa進(jìn)入細(xì)胞核，進(jìn)一步啟動(dòng)免疫活性物質(zhì)抗菌肽的表達(dá)。而在哺乳動(dòng)物中，脂多糖可直接與 Toll 樣受體 4 結(jié)合，IκB 經(jīng)泛素化修經(jīng)蛋白酶體途徑降解，使 NF-κB 入核并激活下游信號(hào)。最新研究報(bào)道，在對(duì)蝦中 (圖 1.2)，革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌都可以與 Toll 樣受體直接結(jié)激活 Toll 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[16]。
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S945

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王亞會(huì);施文正;王錫昌;趙j;李方超;;中華絨螯蟹鮮活及死后品質(zhì)評(píng)價(jià)[J];中國(guó)食品學(xué)報(bào);2018年03期

2 ;中華絨螯蟹新品種——“長(zhǎng)江1號(hào)”、“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2016年12期

3 ;中華絨螯蟹新品種——“長(zhǎng)江1號(hào)”、“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2017年01期

4 ;中華絨螯蟹新品種——“長(zhǎng)江1號(hào)”、“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2017年05期

5 ;中華絨螯蟹“諾亞1號(hào)”[J];海洋與漁業(yè);2017年06期

6 蘭欣;徐承旭;;長(zhǎng)江口中華絨螯蟹天然資源恢復(fù)效果突顯[J];水產(chǎn)科技情報(bào);2017年05期

7 徐跑;董在杰;莊紅根;朱文彬;郭風(fēng)英;;中華絨螯蟹“諾亞1號(hào)”[J];中國(guó)水產(chǎn);2017年07期

8 ;中華絨螯蟹選育新品種——“長(zhǎng)江1號(hào)”、“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2016年01期

9 ;中華絨螯蟹選育新品種——“長(zhǎng)江1號(hào)”、“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2016年02期

10 江平;;中華絨螯蟹“長(zhǎng)江2號(hào)”[J];農(nóng)村新技術(shù);2016年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 徐志善;孫欽軍;王錫念;包建強(qiáng);;中華絨螯蟹營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味的研究進(jìn)展[A];2017年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2017年

2 孟慶國(guó);顧偉;王文;;中華絨螯蟹螺原體抗原相關(guān)蛋白篩選[A];中國(guó)甲殼動(dòng)物學(xué)會(huì)第十一屆年會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

3 楊志彪;趙云龍;楊健;;水體銅對(duì)中華絨螯蟹蛻皮、生長(zhǎng)和存活的影響[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)、中國(guó)海洋與湖沼學(xué)會(huì)甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)2004年甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2004年

4 朱清順;周剛;張彤晴;;長(zhǎng)江水系中華絨螯蟹良種選育與生態(tài)養(yǎng)殖[A];生態(tài)學(xué)與全面·協(xié)調(diào)·可持續(xù)發(fā)展——中國(guó)生態(tài)學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)論文摘要薈萃[C];2004年

5 吳冰醒;楊先樂;;氧氟沙星與左氧氟沙星在中華絨螯蟹體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和殘留消除規(guī)律研究[A];2014年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2014年

6 戴恒鑫;李應(yīng)森;王武;劉偉;張關(guān)海;;中華絨螯蟹蟹種優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)生態(tài)培育模式的研究[A];第二屆全國(guó)現(xiàn)代生態(tài)漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展論文集[C];2010年

7 邱高峰;劉萍;房君江;馮海洋;;成熟促進(jìn)因子在中華絨螯蟹卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟中的作用[A];中國(guó)甲殼動(dòng)物學(xué)會(huì)第十一屆年會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

8 溫小波;陳立僑;周忠良;艾春;;中華絨螯蟹仔蟹對(duì)必需脂肪酸的營(yíng)養(yǎng)需求量[A];第七屆全國(guó)海洋湖沼青年學(xué)者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2000年

9 艾春香;陳立僑;高露姣;溫小波;;維生素C對(duì)中華絨螯蟹血清及組織中超氧化物歧化酶和磷酸酶的影響[A];中國(guó)海洋與湖沼學(xué)會(huì)甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)、中國(guó)海洋與湖沼學(xué)會(huì)生態(tài)學(xué)分會(huì)2000年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2000年

10 成永旭;南天佐;吳旭干;;中華絨螯蟹第一、第二次產(chǎn)卵的生殖性狀和苗種質(zhì)量的比較研究[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)、中國(guó)海洋與湖沼學(xué)會(huì)甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)2004年甲殼動(dòng)物學(xué)分會(huì)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 本報(bào)記者 胡婧;中華絨螯蟹新品種“江海21”成果轉(zhuǎn)讓超千萬[N];中國(guó)漁業(yè)報(bào);2018年

2 楊娟 劉一珉;我市培育出一種新品螃蟹 通過國(guó)家審定[N];常州日?qǐng)?bào);2017年

3 淳宣;中華絨螯蟹標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)綜合示范區(qū)通過驗(yàn)收[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2007年

4 許本宏邋林鳴;中華絨螯蟹特色哪里來[N];中國(guó)質(zhì)量報(bào);2007年

5 趙文;東臺(tái)打造中華絨螯蟹原生態(tài)品牌[N];江蘇科技報(bào);2009年

6 阿米娜　阿爾法特;沙雅中華絨螯蟹熱銷區(qū)內(nèi)外[N];新疆日?qǐng)?bào)(漢);2011年

7 江蘇省淡水水產(chǎn)研究所研究員 徐在寬;高效水產(chǎn)品種推薦——中華絨螯蟹[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2002年

8 姜奕軻;東海所回收人工放流中華絨螯蟹[N];中國(guó)漁業(yè)報(bào);2011年

9 江蘇省水產(chǎn)技術(shù)推廣站;江蘇省中華絨螯蟹育苗生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2006年

10 于志;江蘇高淳建設(shè)全國(guó)中華絨螯蟹“種子庫”[N];中華合作時(shí)報(bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 馮德祥;環(huán)境因子與維生素影響多氯聯(lián)苯對(duì)中華絨螯蟹的毒性[D];華東師范大學(xué);2017年

2 李丹;中華絨螯蟹跨膜型Dscam的可變剪接及免疫調(diào)控機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2018年

3 王海華;長(zhǎng)江中下游中華絨螯蟹資源變動(dòng)與保護(hù)策略[D];上海海洋大學(xué);2018年

4 楊宗英;中華絨螯蟹肝胰腺壞死綜合癥發(fā)病原因及致病機(jī)理初步研究[D];上海海洋大學(xué);2018年

5 黃孝鋒;長(zhǎng)江口中華絨螯蟹仔蟹對(duì)關(guān)鍵環(huán)境因子需求及其人工替代棲息地構(gòu)建[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 程琳;典型污染物對(duì)成年中華絨螯蟹的短期生態(tài)毒理效應(yīng)及作用機(jī)理研究[D];華東師范大學(xué);2018年

7 唐伯平;中華絨螯蟹觸角的形態(tài)發(fā)育學(xué)及絨螯蟹的分類學(xué)和方蟹總科的分子系統(tǒng)學(xué)研究[D];華東師范大學(xué);2003年

8 高志千;中華絨螯蟹種群分子遺傳變異研究[D];南京師范大學(xué);1998年

9 呂孫建;中華絨螯蟹血細(xì)胞吞噬功能與凋亡分子機(jī)制的研究[D];浙江大學(xué);2015年

10 李偉微;基于中華絨螯蟹EST序列的深度發(fā)掘—免疫和營(yíng)養(yǎng)相關(guān)基因的克隆與表達(dá)研究[D];華東師范大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李佩瑤;中華絨螯蟹形態(tài)與性別發(fā)育相關(guān)的Hox家族和Fruitless基因進(jìn)行鑒定及表達(dá)分析[D];中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院海洋研究所);2017年

2 李路;中華絨螯蟹精子發(fā)生過程中組蛋白H1及其變體和分子伴侶的表達(dá)特征[D];河北大學(xué);2019年

3 杜錦梅;水通道蛋白在中華絨螯蟹生精細(xì)胞的表達(dá)及分布特征[D];河北大學(xué);2019年

4 楊蕾;中華絨螯蟹類泛素化修飾Neddylation在抗菌免疫中功能研究[D];華東師范大學(xué);2019年

5 于萍;微塑料對(duì)中華絨螯蟹毒性效應(yīng)的初步研究[D];華東師范大學(xué);2019年

6 劉啟彬;中華絨螯蟹幼蟹階段生長(zhǎng)和存活的初步研究[D];上海海洋大學(xué);2015年

7 江賢峰;中華絨螯蟹EsSor和EsAntp基因的鑒定及其在幼體發(fā)育過程中的表達(dá)分析[D];南京師范大學(xué);2015年

8 朱杰;莠去津?qū)χ腥A絨螯蟹生精細(xì)胞DNA和減數(shù)分裂的影響[D];河北大學(xué);2018年

9 朱健明;菜粕、棉粕中NSPs對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)、腸道形態(tài)與功能影響的研究[D];蘇州大學(xué);2017年

10 劉玉涵;中華絨螯蟹轉(zhuǎn)鐵蛋白在螺原體致病過程中的功能研究[D];南京師范大學(xué);2018年

本文編號(hào)：2642543