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抑殺雜交鱧源舒伯特氣單胞菌的中草藥篩選與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2020-04-23 04:07
【摘要】:近年來(lái),隨著高密度養(yǎng)殖雜交鱧(Channa maculata♀×C.argus♂)技術(shù)的推廣,致使養(yǎng)殖水體水質(zhì)較差,病害頻頻發(fā)生,制約其可持續(xù)健康發(fā)展。其中,舒伯特氣單胞菌(Aeromonas schubertii)所引起的內(nèi)臟類(lèi)結(jié)節(jié)病是鱧科魚(yú)類(lèi)常見(jiàn)疾病之一。中草藥作為在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的藥物,不僅在我國(guó)具有歷史悠久、資源豐富、毒副作用小、無(wú)殘留等優(yōu)勢(shì),而且具有抗菌、增強(qiáng)免疫等作用。因此,利用中草藥提高魚(yú)體的免疫力,減少病害發(fā)生是維持雜交鱧養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要舉措。試驗(yàn)一選取五倍子、黃柏、烏梅等60味中草藥作為原料,采用水提法,制成濃度為1g/m L的藥液,采用瓊脂擴(kuò)散法和二倍稀釋法,利用來(lái)自患病雜交鱧體內(nèi)分離出的的舒伯特氣單胞菌進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),以抑菌圈直徑和MIC作為評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選出抑菌效果較好的中草藥。試驗(yàn)結(jié)果表明,初步篩選出了五倍子、大黃、黃柏、黃連、地榆、丁香、木瓜、訶子、五味子、兒茶、烏梅11味中草藥對(duì)舒伯特氣單胞菌抑菌較好的抑菌效果;通過(guò)二次篩選,確定以初步篩選出的五倍子、大黃、烏梅等11味中草藥進(jìn)行組方試驗(yàn)研究。試驗(yàn)二采用正交t值法進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì),將初步篩選出的烏梅等11味中草藥進(jìn)行配伍,以瓊脂擴(kuò)散法測(cè)出的抑菌圈直徑為評(píng)價(jià)指標(biāo),經(jīng)主藥篩選、輔藥交互作用和劑量選擇三個(gè)步驟,篩選出的復(fù)方中草藥由烏梅和木瓜按一定的比例組成;并以急性毒性試驗(yàn)對(duì)該復(fù)方進(jìn)行安全性評(píng)價(jià),以雜交鱧為試驗(yàn)對(duì)象,結(jié)果表明,復(fù)方中草藥制劑的半致死濃度LD50≥8×105mg/L,依據(jù)急性毒性(LD50)劑量分級(jí)表可判定所選中草藥制劑為無(wú)毒物,屬安全制劑。試驗(yàn)三、四選用初始體重(22.42±0.99)g,體長(zhǎng)(15.45±1.02)cm的雜交鱧為試驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)分為8組,每組30尾,每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。將單方烏梅和復(fù)方中草藥分別以0.5%、1.0%、2.0%劑量加入到基礎(chǔ)飼料中,以基礎(chǔ)飼料和1%木瓜添加量的飼料為對(duì)照,飼喂60d后,分別測(cè)定增重率、特定生長(zhǎng)率、豐滿(mǎn)度、內(nèi)臟比等生長(zhǎng)指標(biāo)、形體指標(biāo)和內(nèi)臟指數(shù),以研究單方和復(fù)方中草藥對(duì)雜交鱧生長(zhǎng)性能的影響。結(jié)果表明,飼喂試驗(yàn)飼料60d后,隨著復(fù)方添加量的增大,平均末體重、絕對(duì)增重量、增重率和特定生長(zhǎng)率出現(xiàn)緩慢降低的趨勢(shì),最大值均出現(xiàn)在0.5%復(fù)方添加組,分別比基礎(chǔ)飼料組增加了14.93%、20.92%、22.46%、11.47%。同時(shí),測(cè)定肝臟、肌肉、血清中SOD、MDA、CAT、ACP和AKP的活性,以研究單方和復(fù)方中草藥對(duì)雜交鱧非特異性免疫功能的影響。結(jié)果表明,各添加組之間形體指數(shù)差異不顯著,而脾臟指數(shù)的最大值出現(xiàn)在2%烏梅添加組,比基礎(chǔ)飼料組增加了47.83%。各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的SOD活性與對(duì)照組相比,均有不同程度的提高,其中,1%烏梅添加量對(duì)肝臟和血清SOD影響最大,2%復(fù)方添加量對(duì)肌肉SOD影響最大;各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的MDA含量與對(duì)照組相比,均有不同程度的降低,其中,1%烏梅添加量對(duì)肝臟MDA影響最大,0.5%復(fù)方、2%烏梅添加組肌肉中的MDA含量最低,2%烏梅添加組血清中MDA含量最低;0.5%、1%、2%復(fù)方和2%烏梅添加組與基礎(chǔ)飼料組相比,CAT活性均有明顯提高現(xiàn)象,其中2%烏梅添加組對(duì)肝臟和血清中CAT活性的影響最大,2%復(fù)方添加組對(duì)肌肉中CAT活性的影響最大;各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的ACP和AKP活性與對(duì)照組相比,沒(méi)有太大的變化。綜合上述試驗(yàn)結(jié)果,可以表明,0.5%復(fù)方添加量對(duì)雜交鱧的生長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用;2%烏梅添加量能顯著影響雜交鱧非特異性免疫功能。
【學(xué)位授予單位】:西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:S943

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本文編號(hào):2637334

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