【摘要】：為探究中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥致病機(jī)理和發(fā)病規(guī)律,建立該病疾病模型,確定該病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),本實(shí)驗從流行病學(xué)調(diào)查入手,通過走訪發(fā)病塘口、詢問受災(zāi)養(yǎng)殖戶相關(guān)養(yǎng)殖及災(zāi)害情況,共完成調(diào)查問卷60余份,采集80只自然發(fā)病的疑似中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥病蟹,從中選取12只具有典型臨床癥狀且病變程度不同的病蟹組成自然病蟹組,將這12只自然病蟹編為1-12號,并對其肝胰腺和肌肉組織進(jìn)行PCR實(shí)驗,檢測其中白斑綜合癥病毒和微孢子蟲含量。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,江蘇省興化市是中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥的主要疫區(qū),2015年和2016年受災(zāi)最為嚴(yán)重,2015年為疫情爆發(fā)的最高峰,2016年發(fā)病率僅略微下降,但仍對養(yǎng)殖戶造成巨大損失,2017年則明顯好轉(zhuǎn),發(fā)病率大幅降低;病原檢測結(jié)果顯示,病蟹肝胰腺和肌肉檢出微孢子蟲的陽性率33.3%和0,由于比例較低,因此認(rèn)為微孢子蟲作為肝胰腺壞死癥的可能性較小,有可能是繼發(fā)感染微孢子蟲;肝胰腺和肌肉組織中WSSV檢出率均為9成,但是并未表現(xiàn)出白斑綜合征的癥狀,說明病蟹體內(nèi)雖然含有WSSV,但是病毒含量并未達(dá)到癥狀產(chǎn)生所需的最低濃度,據(jù)此判斷病蟹作為WSSV攜帶者的可能性較大,而WSSV作為肝胰腺壞死癥病原的可能性較小。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),2015年、2016年,調(diào)查地區(qū)河蟹養(yǎng)殖戶均在4月底5月初進(jìn)行殺蟲,同年5月中旬之后便開始出現(xiàn)中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥病蟹數(shù)量明顯增加的情況,6、7月份該病大規(guī)模爆發(fā),由此可見疫情的暴發(fā)與藥物的施用存在時間上的關(guān)聯(lián),從而確定了以殺蟲藥物誘導(dǎo)作為該病的研究方向。經(jīng)過預(yù)實(shí)驗的殺蟲藥物篩選,正式實(shí)驗的驗證,發(fā)現(xiàn)在阿維菌素濃度為8μg/L的水環(huán)境條件下,采用半靜態(tài)染毒法對健康中華絨螯蟹進(jìn)行持續(xù)誘導(dǎo),可使其產(chǎn)生肝胰腺腫大、部分肝小管白化、肝胰腺完全白化、肝胰腺壞死、腹腔積水、鰓絲顏色變暗癥狀,經(jīng)對比與患中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥的自然病蟹的癥狀相似度較大。進(jìn)一步從組織病理學(xué)角度研究誘導(dǎo)組與自然組病蟹的相似性發(fā)現(xiàn),兩組病蟹在相同的癥狀階段,其肝胰腺和肌肉的組織病理癥狀具有較高的相似程度,最終依據(jù)肝小管的病理癥狀,將中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥的完整發(fā)病過程分為4個階段,并依次命名為:肝胰腺增生期、部分肝小管白化期、肝胰腺完全白化期和肝胰腺壞死期;鰓部組織表現(xiàn)出受所生活環(huán)境水質(zhì)情況強(qiáng)烈影響的狀況,誘導(dǎo)組呈現(xiàn)出階段性的變化,前三階段時未發(fā)現(xiàn)鰓部健康,至肝胰腺壞死期出現(xiàn)水腫及充血癥狀,而自然組病蟹由于采集自不同的池塘,鰓部癥狀體現(xiàn)出明顯的個體差異,癥狀種類較多如:水腫、充血、鰓小葉上皮細(xì)胞融合等。對兩組病蟹肝胰腺中乳酸脫氫酶(LDH)、乙酰膽堿酯酶(AChE)、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)在各癥狀時期的活力測定并對比,結(jié)果顯示隨著肝胰腺病變的加重,誘導(dǎo)組和自然組病蟹肝胰腺酶活力變化趨勢保持一致,其中乳酸脫氫酶和乙酰膽堿酯酶活性呈持續(xù)降低趨勢,而谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性呈先升高再降低的趨勢。最后結(jié)合全文各章實(shí)驗研究結(jié)果,總結(jié)并討論了中華絨螯蟹肝胰腺壞死癥的致病機(jī)制,闡釋了肝胰腺腫大、肌肉萎縮和腹腔積水三種癥狀的產(chǎn)生機(jī)制機(jī)制及其相互的關(guān)聯(lián)。
【圖文】：

走訪調(diào)查Fig1-1Visitinvestigation

調(diào)查表
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S945

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本文編號：2616525