為了滿足隨世界人口增長(zhǎng)而不斷增長(zhǎng)的糧食需求,人們通過(guò)大量施用化肥來(lái)補(bǔ)充土壤肥力以保證糧食儲(chǔ)量與產(chǎn)量。但長(zhǎng)期過(guò)量施用化肥不僅使農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)下降,更嚴(yán)重的是可能會(huì)產(chǎn)生一系列環(huán)境污染問(wèn)題。因此微生物菌劑這種環(huán)境友好型肥料逐漸進(jìn)入人們視野。20世紀(jì)50年代,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)一部分植物根際促生菌(PGPR)可以通過(guò)合成IAA(吲哚乙酸,植物生長(zhǎng)素)來(lái)影響作物的生長(zhǎng),被稱作IAA產(chǎn)生菌,BacillusSubtilis168更是作為IAA產(chǎn)生菌的模式菌株被大量使用。生物質(zhì)炭制備過(guò)程簡(jiǎn)單來(lái)源廣泛,同時(shí)能提供養(yǎng)分以及具有疏松多孔結(jié)構(gòu)有利于促生菌的定殖。對(duì)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)來(lái)講,生物質(zhì)炭-促生菌菌劑既能達(dá)到促進(jìn)植物生長(zhǎng)的目的,又是經(jīng)濟(jì)、高效、高產(chǎn)的選擇。但目前關(guān)于IAA生物合成關(guān)鍵基因或關(guān)鍵酶的鑒定及性質(zhì)研究較少,并且正是由于生物質(zhì)炭來(lái)源廣泛,所以那一種生物質(zhì)炭才是IAA產(chǎn)生菌較好的載體以及用該種生物質(zhì)炭制備的微生物菌劑對(duì)水稻的生長(zhǎng)到底有何種促生作用,目前還不甚了解。因此本研究從設(shè)計(jì)IAA產(chǎn)生菌功能基因引物,準(zhǔn)確定量土壤中IAA產(chǎn)生菌功能基因開(kāi)始;再篩選適宜的生物質(zhì)炭材料作為載體,制備生物質(zhì)炭-促生菌菌劑,最后研究其...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１：高粱種子（ａ）對(duì)照，未接種促生菌；（ｂ）接種＾ｆｚｏｓ＾Ｗ／＿Ｚ？ｎｘ＾７ｍｓｅＳＭ野生??株；（ｃ）接種敲除ＩＡＡ合成功能基因（由ｄＣ）突變株，培養(yǎng)１４天后根部生長(zhǎng)情況圖

一直到２００７年，在Ｓｐａｅｐｅｎ的文章中呈現(xiàn)出了細(xì)菌合成ＩＡＡ的５條主要路徑圖。??并指出細(xì)菌合成ＩＡＡ的通路與植物合成ＩＡＡ通路有很大的相似程度。這５條主??要路徑被延用至今，各條通路中的關(guān)鍵步驟及相關(guān)功能基因不斷被完善如圖１－２??所示，然而雖然在大多數(shù)細(xì)菌中都檢測(cè)到可以產(chǎn)....

圖１－２如ｃ／Ｕｚ／ｔｏｔｅ?１６８中ＩＡＡ生物合成通路圖??Ｆｉｇ．?１－２?ＩＡＡ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?Ｂａｃｉｌｌｕｓ?Ｓｕｂｔｉｌｉｓ?１６８（ｒｅｃｏｍｐｏｓｅｄ?ｂｙ?Ｓｐａｅｐｅｎ?ｅｔ?ａｌ．，??２０１１；ｓｈａｏ?２０１５；ｚｈａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１５）??

．－：＾－??圖１－１：高粱種子（ａ）對(duì)照，未接種促生菌；（ｂ）接種＾ｆｚｏｓ＾Ｗ／＿Ｚ？ｎｘ＾７ｍｓｅＳＭ野生??株；（ｃ）接種敲除ＩＡＡ合成功能基因（由ｄＣ）突變株，培養(yǎng)１４天后根部生長(zhǎng)情況圖。??Ｆｉｇ．ｌ－ｌ：Ｔｈｅ?ｓｏｒｇｈｕｍ?ｓｅｅｄ（ａ）ｃｏｎｔｒｏｌ，ｄｏｎ５....

圖2-IiaaM基因序列NCBI搜索檢索結(jié)果

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?第二章ＩＡＡ產(chǎn)生菌相關(guān)功能基因引物的設(shè)計(jì)??２．２．２功能基因原始序列的收集??功能基因原始序列的收集均來(lái)自于ＮＣＢＩ網(wǎng)站（Ｎａｔｉｏｎａｌ?Ｃｅｎｔｅｒ?ｆｏｒ??Ｂｉｏｔｅｃｎｏｌｏｇｙ?Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ），根據(jù)基因名稱進(jìn)行搜索（圖２－１），之后將....

圖２－３：?（ａ）?２０１６年提取水稻根際土壤微生物ＤＮＡ，用６組引物進(jìn)行擴(kuò)增之后的電泳??結(jié)果成像圖；（ｂ）?２０１７年提取水稻根際土壤微生物ＤＮＡ，用６組引物進(jìn)行擴(kuò)增之后的電泳??給結(jié)果成像圖；（ｃ）用第４組引物，進(jìn)行ＰＣＲ程序優(yōu)化后的電泳結(jié)果成像圖；（ｄ）切膠純??化ＰＣＲ?（遐火溫度５６°Ｃ，?２５個(gè)循環(huán)）電泳結(jié)果成?

帶切肢回收的核酸序列重新擴(kuò)增后確沒(méi)有擴(kuò)增出上方的條帶。這一現(xiàn)象有可能是??由于引物的非特異性結(jié)合而造成的結(jié)果，即在上方較長(zhǎng)的ＤＮＡ片段中，有兩個(gè)??相似的前引物或后引物結(jié)合位點(diǎn)（圖２－３ｅ），引物在結(jié)合時(shí)除了結(jié)合在較長(zhǎng)ＤＮＡ??片段的首尾還結(jié)合在了其中間某一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，造成一個(gè)短....

本文編號(hào)：4040997