甘蔗是喜溫作物,甘蔗新臺(tái)糖22號(hào)(ROC22)具有高產(chǎn)高糖等優(yōu)良特性但耐寒性差,桂糖28號(hào)(GT28)是耐寒品種,用ROC22和GT28進(jìn)行體細(xì)胞融合,可望獲得耐寒性更強(qiáng)且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的雜交后代。但甘蔗雜合體細(xì)胞再生植株目前仍存在很大的困難,原生質(zhì)體是基因功能分析檢測(cè)的優(yōu)質(zhì)材料,可為研究體細(xì)胞融合過(guò)程中的分子機(jī)理以及解決雜合體細(xì)胞再生植株困難提供新的途徑。本研究以ROC22和GT28甘蔗品種為材料,探究了甘蔗原生質(zhì)體RNA提取困難的原因及影響甘蔗原生質(zhì)體RNA的提取條件,篩選了最適宜甘蔗RNA提取的方法,以甘蔗幼葉和酶解后的原生質(zhì)體為材料,運(yùn)用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)篩選了甘蔗體細(xì)胞融合過(guò)程中幼葉酶解前后的差異表達(dá)基因,分析了甘蔗雜合體細(xì)胞在不同激素濃度下再生相關(guān)關(guān)鍵基因的表達(dá)情況。研究結(jié)果表明:(1)影響甘蔗原生質(zhì)體RNA提取的兩大因素是原生質(zhì)體RNase活性和滲透壓。原生質(zhì)體RNase活性與原生質(zhì)體的活力呈極顯著負(fù)相關(guān),滲透壓與原生質(zhì)體RNase活性呈顯著正相關(guān)。提取高質(zhì)量的甘蔗原生質(zhì)體總RNA需要保證原生質(zhì)體的活力至少在70%以上,用改良Trizol法提取的甘蔗原生質(zhì)體總RNA純度好且產(chǎn)量高...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１不同原生質(zhì)體活力對(duì)核酸酶活性的影響??Ｆｉｇ．２－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮａｓｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??

Ｆｉｇ．２－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮａｓｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??２．２．２不同甘蔗原生質(zhì)體活力對(duì)核酸含量的影響??ＲＮＡ含量隨原生質(zhì)體的活力升高而逐漸升高（圖２－２Ａ－Ｄ），原生質(zhì)體活力為０時(shí)，??ＲＯＣ２２和ＧＴ２８原生質(zhì)體的....

圖2.2不間活力的原生質(zhì)體

ｂ?４０?、??ｔ?２０??＾?０?，?，?，?，?，??０?３０?５０?７０?９０??衷生寬體活力??＼ｌａｂｉＨｔｙ?（％）??圖２－１不同原生質(zhì)體活力對(duì)核酸酶活性的影響??Ｆｉｇ．２－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮａｓｅ?ａｃｔ....

圖２－３不同原生質(zhì)體活力對(duì)ＲＮＡ含量的影響??Ｆｉｇ．?２－３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮＡ?ｃｏｎｔｅｎｔ??

Ｆｉｇ．?２－３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮＡ?ｃｏｎｔｅｎｔ??２．２．３不同甘蔗原生質(zhì)體活力對(duì)ＲＮＡ提取效果的影響??如圖２－４表明，當(dāng)原生質(zhì)體活力為７０％和９０％時(shí)，２８Ｓ、１８Ｓ和５ＳｒＲＮＡ三條帶均??符合ＲＮＡ完整性的要....

圖２－４不同活力的原生質(zhì)體提取的總ＲＮＡ的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)??

原生質(zhì)體活力??ＹｋｂｉＨｔｙ?（％）??圖２－３不同原生質(zhì)體活力對(duì)ＲＮＡ含量的影響??Ｆｉｇ．?２－３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｎ?ＲＮＡ?ｃｏｎｔｅｎｔ??２．２．３不同甘蔗原生質(zhì)體活力對(duì)ＲＮＡ提取效果的影響??如圖２－４表明，當(dāng)原生....

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