小麥籽粒黃色素是面粉及面制品黃度形成的主要原因,其主要成分是類胡蘿卜素。ε-番茄紅素環(huán)化酶（LCYE）是小麥類胡蘿卜素生物合成途徑的關鍵酶,前人對其研究多集中于QTL定位、基因克隆和分子標記開發(fā),而基因功能和遺傳調控機制尚不明確。本研究利用TILLING技術篩選EMS誘變群體,對Lcye功能及遺傳調控機制進行研究,以期深入認識小麥籽粒黃色素含量形成的分子機制。在2491份M₂代EMS誘變群體中共檢測到21個Lcye基因的點突變,包含6個錯義突變,2個同義突變和13個內含子突變,Lcye基因在該誘變群體中的突變頻率為1/266.1kb。PARSENP軟件預測分析顯示,M090815（C2202T）和M091648（G3284A）兩個錯義突變可能嚴重影響蛋白質功能。MEME分析結果表明, M090815和M092230 （G2195A）突變位點位于Lcye基因保守結構域內。6個錯義突變植株與野生型雜交構建的F₂代群體中, M090815突變位點顯著降低籽粒黃色素含量,證實該位點對LCYE功能具有重要影響。qRT-PCR（quantitative ...

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PARSESNP軟件分析結果顯示,錯義突變體M090815(C2202T)和M091648(G3284A)的PSSM值分別為26.9和27.7,SIFT值均為0,推測這些突變位點可能對LCYE蛋白功能產生嚴重影響(表4)。2.3突變體Lcye基因表達和黃色素含量分析

突變體M090815構建的F2群體中,不同基因型植株籽粒Lcye及其同源基因表達水平如圖2所示�；ê�7～21d,純合突變型植株籽粒Lcye基因總表達量降低至野生型的59.0%～83.0%,雜合型降低至71.5%～91.1%,花后28d各基因型表達差異不顯著。除了Lcye-B1....

圖2突變體M090815的F2群體中不同基因型植株籽粒Lcye及其同源基因的相對表達量2.4LCYE功能結構域預測

基于擬南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryzasativa)、大麥(Hordeumvulgare)等27個物種已知的Lcye基因cDNA序列(附表1),利用MEMESuite5.1.0預測LCYE功能結構域,共檢測到3個結構域(圖4)。6個錯義突....

本文編號：4010210