茶兒茶素是茶樹次生物質(zhì)代謝的重要成分,對人體健康有益,且在茶葉色、香、味品質(zhì)形成過程中具有重要作用。深入研究茶兒茶素生物合成途徑中的結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控基因,將對提升茶葉加工品質(zhì)及發(fā)掘茶樹優(yōu)異種質(zhì)資源產(chǎn)生積極的推動作用。迄今為止關(guān)于酯型兒茶素的合成途徑已經(jīng)較為清晰,1-O-沒食子酰-β-葡糖苷(βG)是沒食子轉(zhuǎn)移過程中活化的沒食子酸載體,它既是沒食子酸供體,也是沒食子酸受體。我們在前期研究獲得了10余個糖基轉(zhuǎn)移酶,通過基因表達分析,發(fā)現(xiàn)其中一個候選基因UGGT的表達量與EGCG含量顯著相關(guān),推測UGGT酶負(fù)責(zé)βG的形成。本研究采用PCR技術(shù)擴增獲得了UGGT基因的CDS序列,并對該序列進行了生物信息學(xué)分析,然后通過原核表達和異源植物表達,在體外及體內(nèi)驗證了該基因的功能。本論文主要結(jié)果如下:1、以黃金茶1號幼嫩芽葉為材料,通過設(shè)計特異性引物Cs UGGTF\Cs UGGTR克隆了Cs UGGT基因的CDS序列,其閱讀開放框為1467 bp,編碼488個氨基酸,蛋白分子量估計為54547.67,理論等電點為5.30,該基因推測的氨基酸序列與核桃、歐洲櫟、葡萄、蓖麻、草莓、葡萄柚UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1酯型兒茶素生物合成路徑圖

第一章緒論的區(qū)別僅在于C環(huán)3號位有無沒食子酰基化。上世紀(jì)八十年代技術(shù)，在茶樹新梢中探究沒食子酸與酯型兒茶素合成的關(guān)系，與簡單兒茶素（EC和EGC）反應(yīng)從而�；甚バ蛢翰杷乜蒲行〗M于2005年[48]提出1-O-沒食子酰-β-葡糖苷（βG）是沒食食子載體，它....

圖2-2CsUGGT基因克隆的PCR圖譜

析基酸序列的預(yù)測CBI數(shù)據(jù)庫及DNAst片段包含一個完整的源性分析GGT氨基酸序列與其件將CsUGGT基因的對比（圖2-3），該基柚的相似性分別為832CsUGGT基因克隆的NA標(biāo)準(zhǔn)帶200；1：CsUectrophoresisgraphofPCR:....

圖2-4茶樹CsUGGT的親疏水性預(yù)測

蛋白的系統(tǒng)發(fā)育樹分析ALIGN軟件將編碼CsUGGT的氨基酸序列與其他物種基酸進行系統(tǒng)進化分析，分析結(jié)果見圖2-5。從圖中轉(zhuǎn)移酶類蛋白可大致分成三類：黃麻、可可、棉花、；麻瘋樹、蓖麻、草莓、歐洲櫟、核桃為一類；山葡樹為一類。說明茶樹中編碼CsUGGT的氨基酸序列與中的....

圖3-1轉(zhuǎn)化CsUGGT-T重組質(zhì)粒菌落PCR檢測注：M：DNA標(biāo)準(zhǔn)帶200;1-5：為隨機挑選的5個單菌落

1轉(zhuǎn)化CsUGGT-T重組質(zhì)粒菌落DNA標(biāo)準(zhǔn)帶200;1-5：為隨機挑選heelectrophoresisgraphofPCRresutransferedtherecombinantplasmidAMarker200;1-5:Random....

本文編號：3976671