發(fā)布時(shí)間：2024-05-16 22:36

　　水稻作為我國(guó)主要的糧食作物,保證其產(chǎn)量對(duì)糧食安全戰(zhàn)略具有重要意義。水稻產(chǎn)量不但受粒型、千粒重、結(jié)實(shí)率的影響,還與株高、葉型、穗型、穗粒數(shù)等密切相關(guān)。因此,對(duì)水稻產(chǎn)量相關(guān)基因進(jìn)行克隆分析便顯得十分重要。我們之前的研究發(fā)現(xiàn),水稻粒型調(diào)控某因OsGRF4可以與OsGIF1直接互作形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體作用于其下游的靶基因,進(jìn)而調(diào)節(jié)水稻粒型。然而,對(duì)于OsGIF1是否參與水稻其它發(fā)育過(guò)程,是否影響其他農(nóng)藝性狀仍不清楚。因此,為了探究OsGIF1的功能,本研究通過(guò)包括敲除、過(guò)表達(dá)、表達(dá)模式分析和亞細(xì)胞定位在內(nèi)的一系列研究手段,對(duì)該基因的功能進(jìn)行進(jìn)一步的分析。主要結(jié)果如下:1、利用CRISPR/CAS9技術(shù)對(duì)OsGIF1進(jìn)行敲除分析。結(jié)果顯示,在兩個(gè)不同的靶點(diǎn)區(qū)域,OsGIF1的30株敲除單株表現(xiàn)出了五種不同類型的純合基因突變:A/T堿基插入,3/18/10堿基缺失,說(shuō)明目標(biāo)基因定點(diǎn)編輯成功。對(duì)突變體和野生.型的表型對(duì)比觀察顯示,OsGIF1敲除植株主要在株高上出現(xiàn)不同程度的變矮,分別表現(xiàn)為輕微矮化,中度矮化,極度矮化。這種植株的矮化與OsGIF1基因敲除所致的蛋白序列變化程度相關(guān),如A,T堿基插入會(huì)導(dǎo)致...

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１水稻粒型基因調(diào)控圖示??

負(fù)向調(diào)控生長(zhǎng)素信號(hào)，當(dāng)Ｍｖｒ功能缺失時(shí)導(dǎo)致生長(zhǎng)素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常，從而擬南芥??子中生長(zhǎng)素ＩＡＡ含量增加，最終表型為種子急劇增大［４１］。在水稻中??碼一個(gè)降解細(xì)胞分裂素的酶，該基因主要是受上游基因ＡＳｒ調(diào)控［４２］。＜＾７／〇／〇５〇０２??花序分裂組織中調(diào)控細(xì)胞分裂素的含量，進(jìn)而....

圖３?ＯｓＧ／Ｆ／敲除降低水稻株高??（Ａ）?ＯｓＧ／Ｆ／敲除植株莖的表型，（Ｂ）ＱｓＧ／Ｆ／敲除植株株高，（Ｃ）?ＯｓＧ／ｆＶ敲??

Ｔ４０８－６明顯矮化，Ｔ４０９－１７極度矮化（如圖３，?Ａ和Ｂ）；同時(shí)，??與對(duì)照相比，ＯｓＧ／Ｆｉ敲除植株的穗型差異明顯，穗型變小，單穗穗粒數(shù)（空＋癟＋實(shí)）??減少，但Ｔ４０８－１４，?Ｔ４０８－６，?Ｔ４０９－１７之間也有差異，Ｔ４０８－１４的單穗穗粒數(shù)雖低于對(duì)??照但不顯著....

圖４?ａｓｃ？／Ｆ／敲除影響葉片發(fā)育??（Ａ）?ＯｓＧ７Ｆ／，Ｂ長(zhǎng)，Ｃ，Ｄ卷，（卷＝１－（葉??

圖5OsGlF1敲除影響水稻粒型及結(jié)實(shí)

Ｃ和Ｆ）。這一結(jié)果表明，ＯｓＧ／Ｆ／產(chǎn)量，這與我們以前對(duì)０ｓＧＲＦ４?（—個(gè)同樣調(diào)控籽粒大小并且與ＯｓＧＩＦｌ直接互作的??蛋白）的功能研究結(jié)果相一致［６８］。??３．１．２．４?ＯｓＧ／？敲除對(duì)水稻花器官的影響??觀察發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照相比時(shí)，敲除突變體植株的穗結(jié)實(shí)率出現(xiàn)明顯的降低，....

本文編號(hào)：3975008