水稻是全球主要的糧食作物之一,提高水稻的產(chǎn)量和品質,不僅對于國家糧食安全具有重要的意義,而且也是人們健康的需要。水稻具有極其廣泛的適應性,在我國東北到西南的廣大地區(qū)均有種植,這表明水稻對環(huán)境具有廣泛的適應性。水稻籽粒產(chǎn)量屬于復雜的數(shù)量性狀,不僅決定于產(chǎn)量性狀本身,而且植株的生長發(fā)育也對籽粒產(chǎn)量具有重要的影響。雖然一些調(diào)控水稻籽粒和植株生長發(fā)育的基因被分離和克隆,在一定程度上解析了水稻產(chǎn)量形成的分子機制,但microRNA(miRNA)調(diào)控水稻生長發(fā)育和產(chǎn)量形成的研究較少。miRNA屬于小分子非編碼RNA,在植物生長發(fā)育的各個階段及產(chǎn)量形成均具有重要的調(diào)控作用。水稻MIR319家族包含兩個成員,相關研究表明該miRNA家族不但參與了植物生長發(fā)育過程中的生物與非生物脅迫應答,而且與植物的育性相關。本研究采用短片段靶基因模擬技術(STTM)敲除OsmiR319家族,通過農(nóng)桿菌介導的水稻愈傷組織的遺傳轉化進行水稻轉基因,進而篩選陽性轉基因突變體,并對OsmiR319的功能進行初步分析。本研究的主要研究結果:(1)本研究采用引物擴增的方法構建STTM319,STTM390,STTM397,STT...

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【學位級別】：碩士

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圖1miRbase中miRNA前體及成熟序列

中共發(fā)現(xiàn)了16個miRNA，依次分別命名為miR156至miR171，豐富了植物基因的研究領域。目前，已在不同的物種發(fā)現(xiàn)了大量的miRNA，并且在miRNA數(shù)據(jù)庫釋版本中，都會增加大量的miRNA前體、成熟序列等（圖1），在miRNA數(shù)據(jù)庫最新ase....

圖2植物miRNA轉錄、翻譯以及作用機制[21]

物合成IR基因轉錄并經(jīng)過一系列的剪切加工而成的小分子RNAAPolymeraseⅡ，PolⅡ）以及轉錄因子的共同作用下，轉3′端PloyA尾巴的MIRNA初級轉錄本（Primary-miRNDicer-LIke1）[12]蛋白的剪切加工作，生成帶有莖環(huán)結pre....

圖3水稻miR319家族Fig.3Thefamilyofosa-miR319

可以分別加工為3個成熟的miR319(a-c)。在miRBase20中，水稻miR31個miRNA前體位于位于1號染色體，分別是MIR319a和MIR319b，可以分miR319(a，b)。而在miRBase21中，Osa-miR319的2....

圖3STTM319結構及亞克隆載體示意圖

14圖3STTM319結構及亞克隆載體示意圖[134]Fig3.STTMPCRconstructionstrategyandtheSTTMstructureTTM319低表達miR319載體引物設計究根據(jù)Tang等[134]構建STTM載體方法....

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