發(fā)布時(shí)間：2024-04-19 21:56

　　小麥突變體近年來(lái)逐漸成為分子生物學(xué)和遺傳學(xué)研究的重要材料,花發(fā)育相關(guān)的小麥突變體的挖掘、創(chuàng)制以及特異性突變體的篩選是研究花器官形成和花發(fā)育基因功能最高效和便捷的途徑。目前由于小麥轉(zhuǎn)基因技術(shù)不成熟和自然環(huán)境條件下單基因突變難,導(dǎo)致了小麥花發(fā)育相關(guān)的突變體比較少。因此,在很大程度上限制了小麥花發(fā)育相關(guān)基因的功能分析。具有Ae.crassa細(xì)胞質(zhì)(屬D²型細(xì)胞質(zhì))的小麥C303A表現(xiàn)為由雄蕊心皮化引起的完全雄性不育。因此,利用C303A雄蕊是研究小麥花發(fā)育分子生物學(xué)研究重要的原材料。鑒于此,本研究以雄蕊心皮化C303A和同型保持系303B為供試材料。使用顯微技術(shù)對(duì)C303A和303B各發(fā)育時(shí)期的小穗、花藥和絨氈層進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)和表型觀察;為了進(jìn)一步研究異源細(xì)胞質(zhì)對(duì)雄蕊心皮化基因的影響,在確定雄蕊心皮化關(guān)鍵時(shí)期之后從轉(zhuǎn)錄組水平、生理指標(biāo)和候選基因MADS-box基因家族分析等多個(gè)維度研究了異源細(xì)胞質(zhì)導(dǎo)致雄蕊心皮化性狀的表達(dá),以此揭示異源細(xì)胞質(zhì)由于核質(zhì)互作導(dǎo)致雄蕊心皮化的分子機(jī)理。獲得的主要結(jié)果如下:1.通過(guò)體式顯微鏡和石蠟切片等方法對(duì)雄蕊心皮化C303A花藥和小穗進(jìn)行觀察。...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物雄性不育
        1.1.1 細(xì)胞核雄性不育
        1.1.2 細(xì)胞質(zhì)雄性不育
        1.1.3 光溫敏雄性不育
    1.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與花藥發(fā)育研究
    1.3 花器官發(fā)育模型
        1.3.1 ABCDE模型的提出和發(fā)展
        1.3.2 水稻ABCDE基因的表達(dá)調(diào)控
        1.3.3 小麥ABCDE功能基因的研究進(jìn)展
    1.4 雄蕊心皮化
    1.5 目的意義及技術(shù)路線
        1.5.1 目的意義
        1.5.2 技術(shù)路線
第二章 C303A的花藥形態(tài)特點(diǎn)與細(xì)胞學(xué)特征
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 植株形態(tài)及花藥表型觀察
        2.2.2 石蠟切片觀察
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 植株形態(tài)與花藥的表型分析
        2.3.2 花藥發(fā)育過(guò)程的細(xì)胞學(xué)觀察
    2.4 討論
        2.4.1 花藥表型的鑒定
        2.4.2 花藥的細(xì)胞學(xué)觀察
第三章 基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序挖掘雄蕊心皮化代謝通路及候選基因
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 植物材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 花藥總RNA的提取
        3.2.2 cDNA文庫(kù)構(gòu)建
        3.2.3 原始數(shù)據(jù)的處理及參考序列比對(duì)
        3.2.4 差異表達(dá)基因的篩選與生物信息學(xué)分析
        3.2.5 生理指標(biāo)的測(cè)定
        3.2.6 MADS-box轉(zhuǎn)錄因子分析
        3.2.7 q RT-PCR驗(yàn)證
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 RNA測(cè)序和差異基因篩選
        3.3.2 差異表達(dá)基因的功能分類
        3.3.3 MADS-box轉(zhuǎn)錄因子分析與鑒定
        3.3.4 雄蕊心皮化的轉(zhuǎn)錄互作調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
        3.3.5 差異表達(dá)基因的q RT-PCR驗(yàn)證
        3.3.6 總糖含量、ATP和活性氧含量測(cè)定
    3.4 討論
        3.4.1 糖代謝與花藥發(fā)育
        3.4.2 能量代謝影響花藥生長(zhǎng)
        3.4.3 MADS-box轉(zhuǎn)錄因子與雄蕊心皮化
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3958433