大豆異黃酮是主要存在于大豆中的一種酚類次生代謝產(chǎn)物,因其對人類和植物具有重要的生理功能而備受關(guān)注。大豆異黃酮的代謝途徑是苯丙氨酸代謝途徑的一個分支,而在苯丙氨酸代謝途徑中苯丙氨酸解氨酶PAL(phenylalanine ammonia-lyase)是一個關(guān)鍵酶和限速酶。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)PAL基因的相對表達(dá)量與大豆異黃酮含量具有明顯的協(xié)同增減趨勢,并且在PAL基因家族成員時空表達(dá)模式分析中發(fā)現(xiàn),PAL2-3(XM₀03542493)基因是PAL基因家族中相對表達(dá)量較高的主要表達(dá)成員之一。本試驗通過基因工程技術(shù)手段克隆大豆中PAL2-3基因;構(gòu)建植物過表達(dá)載體p CAMBIA3301-Gm PAL2-3;根據(jù)RNAi干擾技術(shù)原理構(gòu)建RNAi干擾植物表達(dá)載體p FGC5941-Gm PAL2-3;將將構(gòu)建好的重組載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到根癌農(nóng)桿菌EHA105中;采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因植株,對獲得的陽性轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PAL2-3基因相對表達(dá)量分析;并對轉(zhuǎn)基因植株成熟大豆籽粒進(jìn)行異黃酮含量測定;分析PAL2-3基因表達(dá)量對大豆異黃酮含量的影響,來研究PAL...

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圖1-1大豆異黃酮苷元結(jié)構(gòu)

圖1-1大豆異黃酮苷元結(jié)構(gòu)Fig.1-1Soybeanisoflavoneaglyconesstructure木黃酮，三者合為1大類型；9種糖苷可分為3大類型，3種為葡萄糖苷型、3種為丙葡萄糖苷型，3種為乙�；咸烟擒招蚚25]。在大豆籽粒中，大約有....

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圖1-2大豆異黃酮糖苷結(jié)構(gòu)Fig.1-2Soybeanisoflavoneglucosidestructure大豆異黃酮的含量分布豆異黃酮主要分布在大豆的籽粒中，種皮中所占的比例較小，雖然胚軸中的異

圖1-3大豆異黃酮合成的代謝途徑Fig.1-3Metabolicpathwayofsoybeanisoflavonesynthesis

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圖3-1大豆R7期豆粒總RNA的提取Fig.3-1ExtractionoftotalRNAfromsoybeanR7seed

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