大豆PAL2-3基因的功能研究
發(fā)布時間:2024-03-31 16:04
大豆異黃酮是主要存在于大豆中的一種酚類次生代謝產(chǎn)物,因其對人類和植物具有重要的生理功能而備受關注。大豆異黃酮的代謝途徑是苯丙氨酸代謝途徑的一個分支,而在苯丙氨酸代謝途徑中苯丙氨酸解氨酶PAL(phenylalanine ammonia-lyase)是一個關鍵酶和限速酶。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)PAL基因的相對表達量與大豆異黃酮含量具有明顯的協(xié)同增減趨勢,并且在PAL基因家族成員時空表達模式分析中發(fā)現(xiàn),PAL2-3(XM003542493)基因是PAL基因家族中相對表達量較高的主要表達成員之一。本試驗通過基因工程技術手段克隆大豆中PAL2-3基因;構建植物過表達載體p CAMBIA3301-Gm PAL2-3;根據(jù)RNAi干擾技術原理構建RNAi干擾植物表達載體p FGC5941-Gm PAL2-3;將將構建好的重組載體質粒轉化到根癌農(nóng)桿菌EHA105中;采用農(nóng)桿菌介導的大豆子葉節(jié)遺傳轉化法獲得轉基因植株,對獲得的陽性轉基因植株進行PAL2-3基因相對表達量分析;并對轉基因植株成熟大豆籽粒進行異黃酮含量測定;分析PAL2-3基因表達量對大豆異黃酮含量的影響,來研究PAL...
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3944173
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圖1-1大豆異黃酮苷元結構
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圖1-3大豆異黃酮合成的代謝途徑Fig.1-3Metabolicpathwayofsoybeanisoflavonesynthesis
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圖3-1大豆R7期豆?俁NA的提取Fig.3-1ExtractionoftotalRNAfromsoybeanR7seed
圖3-1大豆R7期豆粒總RNA的提取Fig.3-1ExtractionoftotalRNAfromsoybeanR7seed基因的克隆
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