發(fā)布時間：2024-02-06 21:00

　　黃草烏(Aconitum vilmorimianum Kom.)為云南白藥主要成分之一,是烏頭屬(Aconitum L.)毛茛科(Ranunculaceae)一種應(yīng)用廣泛的中藥材,具有鎮(zhèn)痛除濕的功效,同時也是當(dāng)代醫(yī)學(xué)中治療糖尿病、高血壓等病癥的理想材料。然而,其入藥部分根狀莖含有劇毒,嚴重約束了該藥物在臨床上的應(yīng)用。根據(jù)本研究組前期發(fā)現(xiàn),BAHD基因家族是造成黃草烏毒性的主要原因,為后期驗證基因功能提供植株再生遺傳轉(zhuǎn)化體系,本實驗以黃草烏種子、腋芽、莖段、葉片為外植體,通過消毒條件的優(yōu)選、芽誘導(dǎo)、愈傷組織誘導(dǎo)和分化等步驟,構(gòu)建黃草烏再生體系,研究如下:種子萌發(fā)體系:以黃草烏種子為外植體,經(jīng)過消毒條件優(yōu)選、萌發(fā)誘導(dǎo)摸索黃草烏種子萌發(fā)體系的最適培養(yǎng)條件。在選擇合適的外植體消毒條件的實驗中,0.1%HgCl₂為消毒劑,種子不萌發(fā);75%酒精消毒30 s,10%NaClO消毒30 min條件下種子污染率為1.33±1.33%,是種子最佳消毒條件。該消毒條件下,種子在MS+2.0 mg/l 6-BA+0.1 mg/l NAA芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中萌發(fā)率達到66.00±4.89%,是...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 黃草烏的生物學(xué)習(xí)性及國內(nèi)外研究進展
    1.2 植物組織培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用
    1.3 再生體系建立技術(shù)目前存在的問題
    1.4 再生體系建立技術(shù)在藥用植物方面的應(yīng)用
    1.5 研究目的和意義
    1.6 研究技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗試劑與儀器
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 培養(yǎng)基質(zhì)與培養(yǎng)條件
        2.3.2 種子萌發(fā)體系的建立
        2.3.3 莖段快繁體系的建立
        2.3.4 愈傷組織誘導(dǎo)及分化
        2.3.5 黃草烏基因組大小測定
        2.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 種子萌發(fā)體系建立
        3.1.1 種子吸水曲線
        3.1.2 GA₃對種子萌發(fā)的影響
        3.1.3 種子表面超微形態(tài)的觀察
        3.1.4 消毒條件對種子表面消毒的影響
        3.1.5 附生菌鑒定
    3.2 莖段快繁體系的建立
        3.2.1 消毒條件對外植體表面消毒的影響
        3.2.2 外植體對芽誘導(dǎo)影響
        3.2.3 激素對不定芽誘導(dǎo)的影響
        3.2.4 激素對不定芽增殖的影響
    3.3 愈傷組織誘導(dǎo)及分化
        3.3.1 愈傷組織誘導(dǎo)
        3.3.2 愈傷組織分化
    3.4 黃草烏基因組大小測定
第四章 討論
    4.1 種子快繁體系的研究
        4.1.1 消毒條件對種子表面消毒的影響
        4.1.2 黃草烏種子休眠的解除
    4.2 莖段快繁體系的研究
        4.2.1 消毒條件和外植體對莖段快繁體系的影響
        4.2.2 芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)基中激素的選擇
    4.3 愈傷組織誘導(dǎo)及分化研究
        4.3.1 愈傷組織誘導(dǎo)
        4.3.2 愈傷組織分化
附錄一 縮略語
參考文獻
致謝



本文編號：3896178