川貝母(Bulbus of Fritillaria cirrhosa,BFC)是《中華人民共和國藥典》中收錄的一味著名的傳統(tǒng)中藥材,具有悠久的藥用歷史和出色的止咳、化痰、平喘作用。藥物的遺傳毒性是指藥物直接或間接干擾遺傳物質(DNA和染色體)完整性的能力。DNA損傷和染色體不穩(wěn)定(CIN)可以造成細胞死亡、組織和器官衰老。大量證據(jù)表明,DNA損傷以及CIN與癌癥、神經退行性疾病和心血管疾病等疾病的發(fā)生風險顯著相關。然而,BFC是否具有遺傳毒性仍然缺乏深入的研究。本研究以人正常結腸粘膜上皮NCM460細胞為實驗模型,通過(1)胞質阻斷微核試驗分析CIN[以微核(MN)、核質橋(NPB)和核芽(NB)發(fā)生率作為評價指標];(2)以有絲分裂異常分析試驗檢測有絲分裂錯誤[以染色體錯誤排布(CMA)、多極排布(MPA)、滯后染色體(LC)、染色質橋(CB)和多極分離(MPS)作為評價指標];(3)以諾考達唑脅迫試驗分析可防止CIN的紡錘體組裝檢查點(SAC)活性;(4)以胸苷、諾考達唑和細胞松弛素B進行細胞同步化分析;(5)以RT-qPCR進行基因轉錄表達分析,探究了 BFC及其活性成分貝母甲素...

【文章頁數(shù)】：184 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 引言
    1.1 貝母
    1.2 藥物毒理學概覽
    1.3 實驗目的
第二章 文獻綜述
    2.1 有絲分裂
    2.2 染色體不穩(wěn)定及其發(fā)生機制
    2.3 染色體不穩(wěn)定與腫瘤
第三章 實驗材料和方法
    3.1 試驗用試劑的配制
    3.2 細胞培養(yǎng)
    3.3 川貝母提取物和貝母生物堿
    3.4 臺粉藍拒染法
    3.5 胞質阻斷微核試驗
    3.6 有絲分裂指數(shù)和有絲分裂錯誤分析
    3.7 SAC活性測定
    3.8 細胞同步化
    3.9 實時定量PCR
    3.10 胞質分裂失敗的測定
    3.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及作圖
第四章 川貝母誘發(fā)染色體不穩(wěn)定
    4.2 引言
    4.3 結果
    4.4 討論
    4.5 結論
第五章 川貝母降低紡錘體組裝檢查點活性
    5.2 引言
    5.3 結果
    5.4 討論
    5.5 結論
第六章 川貝母誘發(fā)胞質分裂失敗
    6.2 引言
    6.3 結果
    6.4 討論
    6.5 結論
第七章 川貝母誘發(fā)紡錘體多極性
    7.2 引言
    7.3 結果
    7.4 討論
    7.5 結論
第八章 貝母生物堿促進染色體不穩(wěn)定
    8.2 引言
    8.3 結果與討論
    8.4 結論
第九章 總結與展望
    9.1 總結
    9.2 創(chuàng)新點
    9.3 不足
    9.4 展望
參考文獻
在學期間發(fā)表論文和所獲獎勵
致謝



本文編號：3875731