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OsRPK1基因過表達(dá)和RNA干涉對水稻苗期耐鹽性的影響

發(fā)布時間:2023-11-18 07:34
  水稻OsRPK1基因?qū)儆诟缓涟彼嶂貜?fù)序列的類受體蛋白激酶,在鹽脅迫下其表達(dá)量暫時升高后出現(xiàn)明顯下降。前期研究表明, OsRPK1基因過表達(dá)會造成擬南芥非生物脅迫耐受性明顯降低。本研究對OsRPK1基因在水稻中實現(xiàn)過表達(dá)和RNA干涉,進(jìn)而對OsRPK1的抗逆性功能加以探究。結(jié)果表明, OsRPK1基因表達(dá)量增加時,水稻幼苗表現(xiàn)為耐鹽性下降;RNA干涉則使水稻幼苗表現(xiàn)為耐鹽性增加。鹽脅迫后OsRPK1過表達(dá)植株脯氨酸含量低于野生型、MDA含量和相對電導(dǎo)率顯著高于野生型,而OsRPK1-RNAi水稻植株的脯氨酸含量顯著高于野生型、MDA含量和相對電導(dǎo)率顯著低于野生型。因此, OsRPK1基因的表達(dá)量對水稻耐鹽性具有明顯影響,脯氨酸含量及細(xì)胞質(zhì)膜受破損程度的改變可能是造成轉(zhuǎn)基因水稻耐鹽性變化的內(nèi)在原因。本研究為進(jìn)一步闡明OsRPK1基因的抗逆作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ),對于通過調(diào)整該基因表達(dá)改良水稻的耐鹽性具有重要意義。

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 OsRPK1基因在鹽脅迫下的表達(dá)模式分析
        1.2.2 OsRPK1基因過量表達(dá)與RNAi表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.3 水稻愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化及鑒定
        1.2.4 轉(zhuǎn)基因水稻的耐鹽性檢測
        1.2.5 轉(zhuǎn)基因水稻的生理指標(biāo)檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 鹽脅迫后OsRPK1基因在水稻中的表達(dá)模式
    2.2 OsRPK1過表達(dá)和RNAi轉(zhuǎn)基因水稻的獲得
        2.2.1 OsRPK1過表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.2 OsRPK1-RNAi表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.3 水稻愈傷組織的培養(yǎng)與轉(zhuǎn)化
    2.3 水稻OsRPK1轉(zhuǎn)基因植株的鑒定和耐鹽性檢測
        2.3.1 水稻OsRPK1轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        2.3.2 水稻OsRPK1轉(zhuǎn)基因植株的耐鹽性檢測
    2.4 水稻OsRPK1轉(zhuǎn)基因植株的生理指標(biāo)檢測
        2.4.1脯氨酸含量的檢測
        2.4.2 MDA含量的檢測
        2.4.3 相對電導(dǎo)率的檢測
3 討論
4 結(jié)論



本文編號:3864837

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