小麥?zhǔn)鞘澜绲诙笞魑?干旱是小麥減產(chǎn)的重要原因之一。深入理解植物抗旱機(jī)理對(duì)品種選育與改良提供理論基礎(chǔ)。磷脂酶D(PLD)是重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)酶,在多種脅迫下被激活,通過(guò)水解磷脂產(chǎn)生信使物質(zhì)磷脂酸(PA),從而參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程。正丁醇(BA)在許多研究中被用來(lái)激活PLD活性,也在一些研究中抑制PLD的轉(zhuǎn)�；饔�,即抑制磷脂向PA的轉(zhuǎn)化。由于PLD為多基因家族,且各PLD同種型具有底物特異性和對(duì)脅迫種類響應(yīng)方面的特異性,不同脅迫下,PA產(chǎn)生特定的分子種組成。本研究首先通過(guò)ESI-MS/MS技術(shù),鑒定PEG脅迫下PA的分子種組成,之后通過(guò)BA處理加強(qiáng)PLD活性,測(cè)定PA分子種組成的變化,以及PA變化對(duì)小麥抗旱性的影響。再通過(guò)同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(iTRAQ)和LC-MS/MC手段分析PA變化不同代謝途徑上蛋白質(zhì)表達(dá)的影響,深入揭示PA參與抗旱性調(diào)節(jié)的機(jī)理。主要結(jié)論如下:(1)BA在小麥幼苗于干旱條件下促進(jìn)PLD活性PA(34:3)、PA(34:2)、PA(36:6)、PA(36:5)和PA(36:4)表現(xiàn)出了信號(hào)特征,即先上升,之后迅速下降。BA處理在干旱脅迫10min和1h時(shí)促進(jìn)了PA的產(chǎn)...

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 植物生理對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)
    1.2 磷脂酶D在多種脅迫中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用研究進(jìn)展
        1.2.1 PLD生化特性
        1.2.2 不同PLDs的生理功能研究進(jìn)展
    1.3 植物磷脂酸多種脅迫下作用機(jī)制研究進(jìn)展
        1.3.0 PA的產(chǎn)生與分解
        1.3.1 正丁醇對(duì)PLD介導(dǎo)的PA產(chǎn)生的影響
        1.3.2 不同脅迫下植物產(chǎn)生特定的PA分子種組成
        1.3.3 不同結(jié)合蛋白具有PA分子種特異性
        1.3.4 PA的作用模式
        1.3.5 PA在調(diào)節(jié)氣孔關(guān)閉方面的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用
    1.4 展望
    1.5 研究?jī)?nèi)容
    1.6 技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.2 生理指標(biāo)測(cè)定
        2.2.1 株高根長(zhǎng)測(cè)定
        2.2.2 光合參數(shù)
        2.2.3 丙二醛含量
        2.2.4 細(xì)胞膜離子滲漏率
        2.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2.3 葉片脂質(zhì)提取和通過(guò)ESI-MS/MS的分子種分析
        2.3.1 葉片脂質(zhì)提取
        2.3.2 基于ESI-MS/MS的葉片脂質(zhì)組測(cè)定
        2.3.3 脂質(zhì)組數(shù)據(jù)處理
    2.4 小麥葉片蛋白質(zhì)組測(cè)定
        2.4.1 蛋白提取
        2.4.2 膜輔助溶液內(nèi)蛋白酶切
        2.4.3 iTraq定量標(biāo)記
        2.4.4 HLB固相萃取柱除鹽
        2.4.5 離線高PH反相高效液相色譜分離i TRAQ標(biāo)記多肽
        2.4.6 LC-MS/MS分析
        2.4.7 蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)處理
    2.5 QRT-PCR分析
第三章 干旱脅迫下PLD對(duì)小麥幼苗生理作用的影響
    3.1 引言
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 干旱脅迫下BA對(duì) PA總量的影響
        3.2.2 植物生長(zhǎng)
        3.2.3 光合參數(shù)
        3.2.4 細(xì)胞膜穩(wěn)定性
        3.2.5 PA對(duì)干旱脅迫下細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響
    3.3 討論
第四章 磷脂酸調(diào)節(jié)植物干旱脅迫應(yīng)答的機(jī)制
    4.1 引言
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 干旱脅迫下差異蛋白鑒定與分析
        4.2.2 干旱脅迫下PA參與調(diào)控的蛋白質(zhì)鑒定與分析
    4.3 討論
        4.3.1 干旱脅迫對(duì)小麥葉片代謝途徑的影響
        4.3.2 PA作用對(duì)小麥葉片代謝途徑的影響
第五章 脂質(zhì)組成變化對(duì)干旱脅迫下膜穩(wěn)定性的影響
    5.1 前言
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 磷脂組成隨脅迫時(shí)間變化
        5.2.2 磷脂的DBI在滲透脅迫下發(fā)生變化
        5.2.3 膜糖脂組成隨脅迫時(shí)間的變化
    5.3 討論
        5.3.1 磷脂降解和膜通透性升高
        5.3.2 半乳糖脂降解和光合速率降低
        5.3.3 滲透脅迫下具有相同酰基鏈的脂質(zhì)分子種具有類似的變化趨勢(shì)
        5.3.4 滲透脅迫下脂質(zhì)不飽和度的變化
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3858216