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基于FISH的中甸刺玫細(xì)胞核型及雜交起源研究

發(fā)布時間:2023-10-06 16:56
  中甸刺玫是云南特有的重要高山觀賞花卉和耐低溫的月季種質(zhì)資源,也是迄今薔薇屬野生種上唯一有報道的異源10倍體,是該屬植物中目前發(fā)現(xiàn)的最高倍性的植物,其雜交起源目前尚不明確。此外,中甸刺玫種內(nèi)具有豐富的表型變異,這種變異的細(xì)胞和分子基礎(chǔ)尚不清楚。為了明確中甸刺玫雜交起源的可能親本以及中甸刺玫種內(nèi)是否存在染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)變化,本研究以中甸刺玫及與其同域分布的20個近緣種為研究材料,以45S rDNA和5S rDNA為探針,采用雙色熒光原位雜交(FISH)技術(shù)研究其細(xì)胞核型;同時,對中甸刺玫種內(nèi)不同表型的10個代表性植株的體細(xì)胞有絲分裂中期染色體進行了45S rDNA和5S rDNA物理定位。研究結(jié)果如下:(1)45S rDNA和5S rDNA的FISH能準(zhǔn)確地定位薔薇屬植物的部分染色體,使核型分析結(jié)果更加精確。21種薔薇屬植物中只有中甸刺玫的核型為2B,其它種的核型均為2A。(2)45S rDNA的雜交位點與薔薇屬植物的倍性一致,在部分種中能自發(fā)出現(xiàn)脆性位點。除擬木香細(xì)胞分裂間期的45S rDNA的雜交位點與倍性不一致外,其它20種薔薇細(xì)胞分裂間期的45S rDNA的位點數(shù)與倍性相同;所有薔...

【文章頁數(shù)】:82 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 薔薇屬植物研究進展
        1.1.1 薔薇屬植物簡介
        1.1.2 中甸刺玫的種群現(xiàn)狀、系統(tǒng)位置、起源演化等研究進展
    1.2 薔薇屬植物的核型研究進展
        1.2.1 薔薇屬染色體制片技術(shù)
        1.2.2 薔薇屬核型研究進展
    1.3 熒光原位雜交
        1.3.1 熒光原位雜交的原理
        1.3.2 靶核酸的類型
        1.3.3 常用的探針
        1.3.4 探針標(biāo)記物
        1.3.5 探針的標(biāo)記法
        1.3.6 rDNA-FISH在植物親緣關(guān)系及異源染色體鑒定中的應(yīng)用
        1.3.7 熒光原位雜交在薔薇屬植物中的應(yīng)用
    1.4 本研究的目的與意義
        1.4.1 研究的目的
        1.4.2 研究的意義
    1.5 技術(shù)路線
第二章 中甸刺玫及其近緣種的細(xì)胞核型
    2.1 研究材料
        2.1.1 靶染色體
        2.1.2 供試探針
    2.2 主要儀器與試劑
        2.2.1 主要儀器
        2.2.2 常用溶液與試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 45S rDNA探針的制備
        2.3.2 5S rDNA探針的制備
        2.3.3 探針的標(biāo)記
        2.3.4 染色體的制備方法
        2.3.5 熒光原位雜交流程
        2.3.6 圖像數(shù)據(jù)處理
        2.3.7 核型分析
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 染色體核型
        2.4.2 21種野薔薇基于45S rDNA和5S rDNA位點的核型分析
        2.4.3 21種野薔薇的染色體結(jié)構(gòu)特征
        2.4.4 基于染色體結(jié)構(gòu)的的中甸刺玫的可能親本
    2.5 討論
        2.5.1 薔薇屬植物的染色體特征
        2.5.2 脆性位點的發(fā)現(xiàn)
        2.5.3 薔薇屬植物45S rDNA雜交位點
        2.5.4 薔薇屬植物5S rDNA雜交位點
        2.5.5 中甸刺玫可能的起源
第三章 中甸刺玫種內(nèi)不同表型植株的核型差異
    3.1 實驗材料
        3.1.1 靶染色體
        3.1.2 供試探針
    3.2 主要儀器與試劑
    3.3 實驗方法
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 染色體核型
        3.4.2 中甸刺玫不同表型的個體的基于45S rDNA和5S rDNA位點的染色體結(jié)構(gòu)
    3.5 討論
        3.5.1 中甸刺玫種內(nèi)的細(xì)胞核型變異
        3.5.2 中甸刺玫種內(nèi)的染色體數(shù)量差異
        3.5.3 中甸刺玫種內(nèi)45S rDNA和5S rDNA雜交位點的差異
第四章 總結(jié)
    4.1 結(jié)論
    4.2 存在的問題及解決的方法
附表1
附表2
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號:3852094

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