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基于多糖糖譜及結(jié)構(gòu)解析技術(shù)的黃芪種質(zhì)資源評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2023-10-06 14:31
  選題依據(jù):黃芪,是山西入選國家道地藥材庫的8味道地藥材之一,用藥量巨大,素有“十方八芪”之說。目前市場(chǎng)上,黃芪可以分為傳統(tǒng)黃芪(仿野生種植)和移栽黃芪(育苗移栽種植)。屠鵬飛等人按照目前黃芪質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)不同等級(jí)規(guī)格的黃芪進(jìn)行分析,得出的結(jié)論是移栽芪的品質(zhì)不亞于傳統(tǒng)芪。然而國際市場(chǎng)和國內(nèi)的一些老中醫(yī)并不認(rèn)可移栽芪。這些矛盾說明目前的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)不能夠全面準(zhǔn)確的反映黃芪品質(zhì)。因此需要建立更加合理的評(píng)價(jià)指標(biāo)。多糖類是黃芪發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性的主要物質(zhì),同時(shí)也是黃芪中含量最豐富的化合物。但由于目前苯酚-硫酸法測(cè)總多糖含量的方法缺乏專屬性特征,不能全面反映多糖的特征。近年來發(fā)展出現(xiàn)的新技術(shù)--糖譜技術(shù)是基于糖類化合物的水解而發(fā)展形成具有專屬性特征的指紋圖譜技術(shù),可用于多糖的定性、定量分析,還可用于藥材的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)。目的:通過構(gòu)建黃芪多糖糖譜,篩選出可以鑒別不同種質(zhì)資源黃芪的差異性糖片段,并對(duì)差異性糖片段進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析與活性評(píng)價(jià),最終建立該活性糖片段的含量測(cè)定方法用于不同種質(zhì)資源黃芪的評(píng)價(jià)。研究方法與研究?jī)?nèi)容:對(duì)不同種質(zhì)資源的黃芪多糖進(jìn)行部分酸水解,通過PACE、HPTLC對(duì)黃芪多糖部分酸水解產(chǎn)物...

【文章頁數(shù)】:107 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
符號(hào)、縮略詞術(shù)語注釋表
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 立題背景及意義
    1.2 研究?jī)?nèi)容、技術(shù)流程圖及創(chuàng)新點(diǎn)
        1.2.1 研究?jī)?nèi)容
        1.2.2 技術(shù)路線圖
        1.2.3 創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 糖譜技術(shù)及其研究進(jìn)展
        2.1.1 電泳法構(gòu)建糖譜方法
        2.1.2 高效薄層色譜構(gòu)建糖譜法
        2.1.3 高效液相色譜構(gòu)建糖譜法
    2.2 多糖的結(jié)構(gòu)解析
        2.2.1 單糖組成分析
        2.2.2 糖苷鍵連接位置的測(cè)定
        2.2.3 多糖結(jié)構(gòu)驗(yàn)證
    2.3 黃芪多糖免疫藥理活性的研究進(jìn)展
第三章 基于部分酸水解構(gòu)建黃芪多糖糖譜及黃芪差異性糖片段的篩選
    3.1 引言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 植物材料
        3.2.2 試劑
        3.2.3 儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 黃芪多糖的制備與純化
        3.3.2 黃芪多糖部分酸水解及衍生化方法的建立
        3.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳方法的建立
        3.3.4 高效薄層色譜方法的建立
        3.3.5 單糖及寡糖標(biāo)準(zhǔn)品的制備
        3.3.6 數(shù)據(jù)處理
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 黃芪多糖的純度及得率
        3.4.2 黃芪多糖TFA水解反應(yīng)條件的優(yōu)化
        3.4.3 黃芪多糖ANTS衍生化反應(yīng)條件的優(yōu)化
        3.4.4 電泳條件的優(yōu)化
        3.4.5 HPTLC分析條件的優(yōu)化
        3.4.6 不同種質(zhì)資源黃芪多糖部分酸水解產(chǎn)物的PACE和HPTLC圖譜
        3.4.7 不同種質(zhì)資源黃芪多糖部分酸水解產(chǎn)物PACE和HPTLC圖譜的數(shù)據(jù)分析
        3.4.8 不同種質(zhì)資源黃芪多糖部分酸水解產(chǎn)物PACE圖譜的聚類分析
    3.5 小結(jié)
第四章 黃芪專屬性糖片段的確認(rèn)與活性評(píng)價(jià)
    4.1 引言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 植物材料
        4.2.2 試劑
        4.2.3 儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 黃芪差異性糖片段的純化及結(jié)構(gòu)解析
        4.3.2 黃芪專屬性糖片段的確認(rèn)
        4.3.3 體外抗氧化活性評(píng)價(jià)
        4.3.4 免疫活性評(píng)價(jià)
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 黃芪差異性糖片段的結(jié)構(gòu)解析
        4.4.2 黃芪專屬性糖片段的確認(rèn)
        4.4.3 黃芪專屬性糖片段的體外抗氧化活性分析
        4.4.4 黃芪專屬性糖片段的免疫活性分析
    4.5 小結(jié)
第五章 建立黃芪專屬性活性糖片段含量測(cè)定方法及不同種質(zhì)資源黃芪的評(píng)價(jià)
    5.1 引言
    5.2 材料和儀器
        5.2.1 植物材料
        5.2.2 試劑
        5.2.3 儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 線性關(guān)系考察
        5.3.2 重復(fù)性
        5.3.3 穩(wěn)定性
        5.3.4 檢測(cè)限
        5.3.5 不同種質(zhì)資源黃芪的評(píng)價(jià)
    5.4 結(jié)果
        5.4.1 方法學(xué)考察
        5.4.2 不同種質(zhì)資源黃芪的評(píng)價(jià)
    5.5 小結(jié)
第六章 基于酶水解和人工胃液水解構(gòu)建黃芪多糖糖譜及不同種質(zhì)資源黃芪的鑒別
    6.1 引言
    6.2 材料與方法
        6.2.1 植物材料
        6.2.2 儀器與試劑
    6.3 實(shí)驗(yàn)方法
        6.3.1 黃芪多糖的提取和純化
        6.3.2 人工胃液的配制
        6.3.3 模擬人工胃液的黃芪多糖降解
        6.3.4 黃芪多糖的酶解
        6.3.5 黃芪多糖的酶解和人工胃液水解產(chǎn)物的衍生化電泳分析
        6.3.6 數(shù)據(jù)處理
    6.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        6.4.1 不同種質(zhì)資源黃芪多糖酶解產(chǎn)物的電泳指紋圖譜
        6.4.2 不同種質(zhì)資源黃芪多糖人工胃液水解產(chǎn)物的電泳指紋圖譜
        6.4.3 不同種質(zhì)資源黃芪多糖酶解產(chǎn)物PACE圖譜的數(shù)據(jù)分析
        6.4.4 不同種質(zhì)資源黃芪多糖人工胃液水解產(chǎn)物PACE圖譜的數(shù)據(jù)分析
    6.5 小結(jié)
第七章 總結(jié)與展望
    7.1 研究工作總結(jié)
    7.2 展望
    7.3 學(xué)習(xí)心得
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式



本文編號(hào):3851884

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