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連作地黃根際群體感應(yīng)菌群變化及其作用機(jī)理

發(fā)布時(shí)間:2023-05-27 04:35
  地黃(Rehmannia glutinosa L.)是玄參科多年生草本藥用植物,其塊根藥用價(jià)值高,但其栽培過程中也存在十分嚴(yán)重的連作障礙問題。前人研究認(rèn)為,根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)變化與植物的生長(zhǎng)發(fā)育關(guān)系密切。土壤是個(gè)極其復(fù)雜的黑箱,土壤中的微生物間存在復(fù)雜的互作關(guān)系,如群體感應(yīng)(Quorum sensing,QS)與群體感應(yīng)淬滅(Quorum quenching,QQ)現(xiàn)象。然而,有關(guān)群體感應(yīng)與群體感應(yīng)淬滅在地黃連作障礙形成過程中的作用與角色,至今鮮有報(bào)道。故本研究以不同連作年限地黃根際土壤為研究對(duì)象,借助群體感應(yīng)檢測(cè)工程菌、96孔液體培養(yǎng)法等,系統(tǒng)分析地黃連作下群體感應(yīng)菌、群體感應(yīng)淬滅菌菌群動(dòng)態(tài)變化,并進(jìn)一步通過滴定法、OD值測(cè)定法等分析關(guān)鍵化感物質(zhì)對(duì)特異群體感應(yīng)與淬滅細(xì)菌生長(zhǎng)的影響,分析植物—微生物互作關(guān)系,以期闡明群體感應(yīng)與群體感應(yīng)淬滅在地黃連作障礙形成中的作用機(jī)制。具體研究結(jié)果如下:頭茬地黃根際土壤隨機(jī)挑選出的200株單菌落中有65株群體感應(yīng)(QS)菌,主要以假單胞菌屬(58.5%)為主,重茬地黃病土中隨機(jī)挑選出的200株單菌落中有34株群體感應(yīng)菌,主要以腸桿菌屬(73.5%)...

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 地黃及其連作障礙
        1.1.1 地黃概述
        1.1.2 連作障礙及其研究進(jìn)展
        1.1.3 地黃連作障礙與土壤微生物
    1.2 群體感應(yīng)與連作障礙問題
        1.2.1 群體感應(yīng)和群體感應(yīng)淬滅概念
        1.2.2 群體感應(yīng)與植物病害
        1.2.3 群體感應(yīng)淬滅與植物病害生物防治
        1.2.4 根系分泌物與群體感應(yīng)和群體感應(yīng)淬滅間的關(guān)系
        1.2.5 群體感應(yīng)和群體感應(yīng)淬滅與連作障礙
    1.3 群體感應(yīng)信號(hào)分子檢測(cè)方法
        1.3.1 群體感應(yīng)檢測(cè)工程菌指示法
        1.3.2 理化檢測(cè)法
    1.4 群體感應(yīng)淬滅檢測(cè)方法
        1.4.1 群體感應(yīng)淬滅菌篩選
        1.4.2 群體感應(yīng)淬滅劑篩選
    1.5 本實(shí)驗(yàn)研究目的及其意義
第二章 連作地黃根際群體感應(yīng)菌篩選鑒定及其功能分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 群體感應(yīng)菌的篩選
        2.1.2 待測(cè)菌株基因組DNA提取及16s rDNA基因PCR擴(kuò)增
        2.1.3 群體感應(yīng)菌對(duì)地黃主要致病性真菌的拮抗性評(píng)價(jià)及計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)
        2.1.4 群體感應(yīng)菌對(duì)地黃組培苗致病性驗(yàn)證
        2.1.5 群體感應(yīng)菌對(duì)根系分泌物中關(guān)鍵化感物質(zhì)-酚酸類物質(zhì)趨化性分析
        2.1.6 不同濃度混合酚酸對(duì)7株群體感應(yīng)菌菌體生長(zhǎng)的影響
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 地黃根際群體感應(yīng)菌的篩選
        2.2.2 群體感應(yīng)菌對(duì)地黃主要致病性真菌的拮抗性評(píng)價(jià)及計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)
        2.2.3 群體感應(yīng)菌對(duì)地黃組培苗致病性驗(yàn)證分析
        2.2.4 群體感應(yīng)菌對(duì)根系分泌物中關(guān)鍵化感物質(zhì)即酚酸類物質(zhì)的趨化性分析
        2.2.5 酚酸類物質(zhì)對(duì)特異關(guān)鍵群體感應(yīng)菌生長(zhǎng)的影響
    2.3 討論與小結(jié)
第三章 油菜假單胞菌特異性群體感應(yīng)淬滅菌篩選及其生理特性測(cè)定
    3.1 材料與方法
        3.1.1 油菜假單胞菌(PB) AHL信號(hào)分子的提取及檢測(cè)
        3.1.2 淬滅油菜假單胞菌AHL信號(hào)分子的群體感應(yīng)淬滅菌(QQ)篩選及鑒定
        3.1.3 不同濃度混合酚酸對(duì)PB群體感應(yīng)淬滅菌菌體生長(zhǎng)的影響
        3.1.4 PB特異群體感應(yīng)淬滅菌對(duì)地黃組培苗的致病性驗(yàn)證
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 油菜假單胞菌(PB) AHL信號(hào)分子檢測(cè)
        3.2.2 PB特異群體感應(yīng)淬滅菌種類分析及數(shù)量統(tǒng)計(jì)
        3.2.3 不同濃度混合酚酸對(duì)PB特異群體感應(yīng)淬滅菌生長(zhǎng)的影響
        3.2.4 PB特異群體感應(yīng)淬滅菌對(duì)地黃組培苗生長(zhǎng)的影響
    3.3 討論與小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝



本文編號(hào):3823901

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