為了闡明翻譯控制腫瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein, TCTP)在小麥-葉銹菌互作中的作用及其機(jī)制,本研究克隆了TaTCTP的開放閱讀框(ORF)全長(zhǎng),并經(jīng)過(guò)原核表達(dá)、親和純化、動(dòng)物免疫,制備了TaTCTP兔多克隆抗體。結(jié)果表明,該基因CDS區(qū)全長(zhǎng)為507 bp,編碼168個(gè)氨基酸,預(yù)期分子量為18.8 kD,并具有較高的可溶性。以純化后的TaTCTP重組蛋白制備的抗體可以特異性識(shí)別TaTCTP,效價(jià)為1∶6 400。Western blotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn)TaTCTP在葉銹菌侵染后受誘導(dǎo)上調(diào)。本研究為進(jìn)一步研究TaTCTP在小麥與葉銹菌互作過(guò)程中的功能及其作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
        1.1.1植物材料及供試菌株
        1.1.2試劑與藥品
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1植物培養(yǎng)
        1.2.2基因克隆及載體構(gòu)建
        1.2.3蛋白質(zhì)可溶性分析
        1.2.4TaTCTP蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
        1.2.5TaTCTP蛋白的純化
        1.2.6TaTCTP蛋白多克隆抗體的制備及特異性檢測(cè)
        1.2.7Westernblotting免疫印跡法檢測(cè)抗體特異性
2 結(jié)果與分析
    2.1 TaTCTP的克隆、分析與表達(dá)載體的構(gòu)建
    2.2 TaTCTP的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
    2.3 TaTCTP抗體的制備及效價(jià)檢測(cè)
    2.4 TaTCTP抗體的特異性檢測(cè)
    2.5 小麥-葉銹菌互作中TaTCTP的表達(dá)
3 結(jié)論與討論



本文編號(hào)：3774050