道地藥材是經(jīng)過漫長臨床篩選的,療效可靠、活性成分穩(wěn)定的藥材。研究道地藥材的質(zhì)量形成可為優(yōu)化藥材質(zhì)量提供依據(jù)。有效成分是中藥材質(zhì)量的物質(zhì)基礎(chǔ),直接影響藥材的療效。有效成分的合成與積累是道地藥材質(zhì)量形成的關(guān)鍵。本文以陜西產(chǎn)道地藥材大葉秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)為研究對象,測定了不同生長條件下大葉秦艽中5種環(huán)烯醚萜類有效成分的含量以及與其合成相關(guān)的3個(gè)關(guān)鍵酶基因的表達(dá)情況,研究秦艽質(zhì)量形成的內(nèi)在機(jī)制,測定了不同干燥方法下秦艽藥材中的成分保留狀況,研究干燥方法對藥材質(zhì)量的影響,研究結(jié)果如下:不同年份的大田生長秦艽在6月底至9月初期間,活性成分的含量波動(dòng)變化均在較高值附近,地上部分中I₁(馬錢苷酸)含量值較高,G10H、SLS的相對表達(dá)差異倍數(shù)同樣維持在較高值水平,而DXR的相對表達(dá)差異倍數(shù)則在較低值的水平;4月底至10月中旬期間,地下部分中I₂(6’-O-β-葡萄糖基龍膽苦苷)、I₃(獐牙菜苦苷)、I₄(龍膽苦苷)、5成分和的含量均顯著大于地上部分,3種基因在葉、莖、根中均...

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語對照表
第一章 引言
    1.1 秦艽的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 中藥秦艽的來源種
        1.1.2 化學(xué)成分
        1.1.3 藥理研究
        1.1.4 藥材質(zhì)量評價(jià)
        1.1.5 影響環(huán)烯醚萜含量的因素
        1.1.6 秦艽中環(huán)烯醚萜類成分的生物合成
    1.2 道地藥材質(zhì)量形成研究現(xiàn)狀
        1.2.1 道地藥材的質(zhì)量評價(jià)與質(zhì)量形成
        1.2.2 道地藥材的質(zhì)量形成研究
    1.3 道地陜西秦艽質(zhì)量形成機(jī)制研究的目的和意義
第二章 秦艽成分含量動(dòng)態(tài)和相關(guān)酶基因表達(dá)規(guī)律研究
    2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.2 儀器與試劑
        2.2.1 儀器
        2.2.2 試劑
    2.3 有效成分含量測定
        2.3.1 色譜條件
        2.3.2 對照品溶液的制備
        2.3.3 方法學(xué)考察
        2.3.4 供試品溶液的制備與測定
    2.4 有效成分合成關(guān)鍵酶基因的表達(dá)測定
        2.4.1 秦艽各部位總RNA的提取
        2.4.2 RNA的檢測
        2.4.3 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        2.4.4 熒光定量PCR(q PCR)檢測
    2.5 結(jié)果與分析
        2.5.1 栽培秦艽五種成分的含量動(dòng)態(tài)
        2.5.2 不同年份秦艽同年春秋季環(huán)烯醚萜合成相關(guān)酶基因的表達(dá)動(dòng)態(tài)變化
    2.6 相關(guān)性分析
    2.7 討論
第三章 誘導(dǎo)子對秦艽成分和基因表達(dá)的影響
    3.1 儀器與試劑
        3.1.1 儀器
        3.1.2 試劑
    3.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    3.3 誘導(dǎo)子溶液的制備
        3.3.1 非生物誘導(dǎo)子溶液的制備
        3.3.2 真菌誘導(dǎo)子溶液的制備
    3.4 有效成分含量測定
        3.4.1 色譜條件
        3.4.2 對照品溶液的制備
        3.4.3 方法學(xué)考察
        3.4.4 供試品溶液的制備與測定
    3.5 基因表達(dá)測定
        3.5.1 總RNA的提取
        3.5.2 總RNA的檢測
        3.5.3 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        3.5.4 熒光定量PCR(q PCR)檢測
    3.6 結(jié)果與分析
        3.6.1 有效成分含量變化
        3.6.2 有效成分合成關(guān)鍵酶基因的表達(dá)變化
        3.6.3 相關(guān)性分析
    3.7 討論
第四章 干旱和鹽脅迫對秦艽成分和基因表達(dá)的影響
    4.1 儀器與試劑
        4.1.1 儀器
        4.1.2 試劑
    4.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        4.2.1 水分脅迫
        4.2.2 鹽分脅迫
    4.3 有效成分含量測定
    4.4 基因表達(dá)測定
    4.5 結(jié)果與分析
        4.5.1 有效成分含量測定
        4.5.2 有效成分合成關(guān)鍵酶基因的表達(dá)測定
    4.6 討論
第五章 干燥方法對秦艽藥材質(zhì)量的影響
    5.1 儀器與試劑
        5.1.1 儀器
        5.1.2 試劑
    5.2 材料與方法
    5.3 有效成分含量測定
    5.4 抗氧化活性測定
        5.4.1 供試品溶液的制備
        5.4.2 抗氧化活性測定
    5.5 最小抑菌濃度(MIC)的測定
        5.5.1 供試品溶液的制備
        5.5.2 培養(yǎng)基的制備
        5.5.3 菌懸液的制備
        5.5.4 MIC的測定
    5.6 結(jié)果與分析
        5.6.1 成分含量測定結(jié)果
        5.6.2 活性測定結(jié)果
    5.7 討論
第六章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果
致謝



本文編號：3770456