為研究水稻OsMPK7基因的功能,利用免疫印跡（Western blot,WB）技術(shù)檢測(cè)水稻苗期OsMPK7蛋白質(zhì)的表達(dá)特征,發(fā)現(xiàn)旱脅迫使OsMPK7蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào),提示OsMPK7基因在水稻旱脅迫應(yīng)答中發(fā)揮作用。為了進(jìn)一步驗(yàn)證其功能,構(gòu)建了OsMPK7超表達(dá)載體,用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方式轉(zhuǎn)化水稻,通過(guò)PCR和WB鑒定,獲得超表達(dá)純合株系。擬旱脅迫條件下,超表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻的種子萌發(fā)較晚,芽長(zhǎng)與根長(zhǎng)都顯著低于野生型。苗期的缺水試驗(yàn)結(jié)果表明,在干旱脅迫下,超表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻生長(zhǎng)弱于野生型,出現(xiàn)明顯的萎蔫現(xiàn)象。由此可見(jiàn),超表達(dá)OsMPK7蛋白質(zhì)降低了水稻對(duì)旱脅迫的耐受性。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1植物材料
        1.1.2菌株與質(zhì)粒
    1.2 方法
        1.2.1水稻樣品總蛋白質(zhì)提取及WB分析
        1.2.2水稻旱脅迫處理
        1.2.3超表達(dá)轉(zhuǎn)基因載體的構(gòu)建
        1.2.4農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.5水稻種子萌發(fā)期旱脅迫處理
        1.2.6苗期土培干旱脅迫處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 旱脅迫對(duì)OsMPK7蛋白質(zhì)的豐度的影響
    2.2 水稻OsMPK7超表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系的構(gòu)建和鑒定
    2.3 OsMPK7超表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻在萌發(fā)期旱脅迫下的形態(tài)特征
    2.4 OsMPK7超表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻苗期耐旱性鑒定
3 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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