藥用野生稻是我國3種野生稻之一,蘊含豐富的優(yōu)異基因資源,但由于其CC基因組與栽培稻的AA基因組差異大,遠緣雜交不親合,不易獲得后代材料,導(dǎo)致育種中優(yōu)異基因無法利用。構(gòu)建大片段基因組文庫是研究及利用基因的重要方法,而提取高質(zhì)量的染色體DNA是建立BIBAC等大片段基因組文庫的前提,但按常規(guī)方法很難從藥用野生稻中提取到Mb級的染色體DNA,需要對提取體系進行優(yōu)化。本研究對取材與研磨、細胞核的分離與包埋、組蛋白的去除與DNA釋放、DNA的酶解與回收等實驗步驟進行優(yōu)化,從藥用野生稻中成功提取出1.9Mb的高質(zhì)量染色體DNA,并對酶解消化體系進行了摸索,制備的染色體DNA可用于構(gòu)建大片段基因組文庫。 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
    1.2 試驗方法
        1.2.1 制備核懸液
        1.2.2 分離細胞核
        1.2.3 細胞核包埋
        1.2.4 細胞核裂解
        1.2.5 酶解
        1.2.6 電泳檢測
        1.2.7 目標DNA的收集
2 結(jié)果與分析
    2.1 藥用野生稻葉片細胞核的分離
    2.2 藥用野生稻葉片細胞核的包埋與洗滌
    2.3 藥用野生稻染色體DNA的釋放與消化
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]云南藥用野生稻對四種水稻主要病害的抗性鑒定[J]. 楊雅云,張敦宇,陳玲,陳越,殷富有,蔣春苗,肖素勤,柯學(xué),余騰瓊,王波,付堅,鐘巧芳,陳功友,程在全.  植物病理學(xué)報. 2019(01)
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[3]廣西藥用野生稻遺傳多樣性分析及SSR引物數(shù)量對遺傳多樣性結(jié)果的影響研究[J]. 蘇龍,徐志健,喬衛(wèi)華,鄭曉明,梁云濤,丁膺賓,劉莎,齊蘭,公婷婷,梁新霞,王君瑞,張麗芳,程云連,蘭進好,楊慶文.  植物遺傳資源學(xué)報. 2017(04)
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[6]東鄉(xiāng)野生稻耐冷分子機制研究進展[J]. 陳明亮,陳大洲,胡蘭香,吳小燕,熊煥金,肖葉青.  作物雜志. 2016(04)
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[9]藥用野生稻BIBAC文庫構(gòu)建過程中質(zhì)粒提取方法改進[J]. 侯思名,劉凌云,殷旭東,岑曉江,王波,程在全.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(01)
[10]利用SRAP標記研究海南野生稻的遺傳多樣性與遺傳分化[J]. 齊蘭,王效寧,張吉貞,唐清杰,孟衛(wèi)東,嚴小微.  植物遺傳資源學(xué)報. 2013(03)

博士論文
[1]藥用野生稻基因組文庫構(gòu)建與大片段DNA轉(zhuǎn)化[D]. 何瑞鋒.武漢大學(xué) 2003



本文編號：3703117