類胡蘿卜素對(duì)煙葉香氣供獻(xiàn)率大,是影響煙葉香氣質(zhì)和香氣量的重要組分。為了探討煙草F1代類胡蘿卜素性狀雜種優(yōu)勢(shì)形成的分子機(jī)理,本文篩選類胡蘿卜素性狀雜種優(yōu)勢(shì)不同的組合,對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中雜種優(yōu)勢(shì)的表現(xiàn)及其與類胡蘿卜素合成關(guān)鍵酶基因的差異表達(dá)進(jìn)行分析,旨為煙草類胡蘿卜素性狀的改良和進(jìn)一步認(rèn)識(shí)雜種優(yōu)勢(shì)形成的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ)。采用完全隨機(jī)遺傳交配設(shè)計(jì),利用16個(gè)親本組配了57個(gè)組合,篩選出類胡蘿卜素強(qiáng)弱優(yōu)勢(shì)組合。分別測(cè)定強(qiáng)弱優(yōu)勢(shì)組合在移栽42d、56d、70d和77d時(shí)的類胡蘿卜素含量及其雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn),同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量（Real Time PCR）技術(shù)探討了強(qiáng)弱雜種優(yōu)勢(shì)組合在不同生育期,類胡蘿卜素合成關(guān)鍵酶基因的差異表達(dá)變化與雜種優(yōu)勢(shì)形成的相關(guān)性。主要研究結(jié)果如下:1、成熟采烤期:親本類胡蘿卜素含量最高的為NC82,0.2935 mg/g;最低為湄潭大蠻煙,0.2009 mg/g;均值為0.2302 mg/g。雜交組合類胡蘿卜素含量最高為紅大×TN90,0.3034mg/g;含量最低為K326×紅大,0.1660 mg/g;均值為0.2320mg/g。表現(xiàn)出類胡蘿卜素性狀存在超高親優(yōu)勢(shì)和超低... 

【文章來(lái)源】：貴州大學(xué)貴州省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

移栽42d、56d、70d、77d類胡蘿卜素性狀雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)單位（%）

圖 4 RNA 瓊脂糖電泳檢測(cè)圖譜Fig.4 RNA agarose gel electrophoresis patterns如圖 4 可得出：所提取的煙草 RNA 質(zhì)量較高，表現(xiàn)為 28S 和 18S 條帶清晰，5S 模糊，沒(méi)有拖尾現(xiàn)象，說(shuō)明 RNA 沒(méi)有降解；提取的 RNA 28S 條帶與 18S 條帶比例接近或大于 2:1，說(shuō)明其完整性佳；上方無(wú)雜帶，點(diǎn)樣孔附近也無(wú)發(fā)亮現(xiàn)象存在，說(shuō)明沒(méi)有 DNA 和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)污染，可用于后續(xù)試驗(yàn)。3.4.1.2 紫外分光光度計(jì)檢測(cè) RNA 純度和濃度波長(zhǎng) 260、280 nm 下的吸光度分別代表了核酸和蛋白等有機(jī)物的值。當(dāng) A260/A280<1.8時(shí)，說(shuō)明提取物中有糖、肽、苯酚等有機(jī)物污染，當(dāng) A260/A280>2.2 時(shí)，說(shuō)明 RNA 已經(jīng)水解成單核苷酸。經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，各樣品 RNA 純度較高，其 A260/A280在 1.824～1.902之間，說(shuō)明糖、肽、苯酚等有機(jī)物污染少，幾乎無(wú)降解現(xiàn)象，其濃度和純度達(dá)到后續(xù)試驗(yàn)要求，可以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

可用于后續(xù)試驗(yàn)。3.4.1.2 紫外分光光度計(jì)檢測(cè) RNA 純度和濃度波長(zhǎng) 260、280 nm 下的吸光度分別代表了核酸和蛋白等有機(jī)物的值。當(dāng) A260/A280<1.8時(shí)，說(shuō)明提取物中有糖、肽、苯酚等有機(jī)物污染，當(dāng) A260/A280>2.2 時(shí)，說(shuō)明 RNA 已經(jīng)水解成單核苷酸。經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，各樣品 RNA 純度較高，其 A260/A280在 1.824～1.902之間，說(shuō)明糖、肽、苯酚等有機(jī)物污染少，幾乎無(wú)降解現(xiàn)象，其濃度和純度達(dá)到后續(xù)試驗(yàn)要求，可以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。3.4.1.3 cDNA 單鏈的檢測(cè)將提取的總 RNA 反轉(zhuǎn)錄為 cDNA 單鏈，后以 cDNA 單鏈為模版，Actin 為引物等配置檢測(cè)體系，進(jìn)行煙草管家基因 Actin 檢測(cè)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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