甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）是豆科、甘草屬多年生草本植物,被譽(yù)為中藥之王,具有重要的藥用價值,是我國最常用的中藥之一。目前,甘草資源匱乏,在改善品質(zhì)、育種和栽培等方面有諸多問題亟待解決。DNA甲基化是真核細(xì)胞基因組重要的一種表觀遺傳調(diào)控機(jī)制,能夠在不改變DNA序列的情況下調(diào)節(jié)基因組的功能,使基因在需要時表達(dá),不需要時保持沉默。在植物中,DNA甲基化主要參與植物基因表達(dá)調(diào)控,調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育。植物體可通過甲基化與去甲基化來調(diào)控不同環(huán)境條件和不同發(fā)育階段的基因表達(dá),以維持植物正常的生長發(fā)育。本文的研究利用甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性技術(shù)（MSAP）分析了甘草種子在經(jīng)18kV/25min的電場條件處理后基因組DNA甲基化的變化。MSAP的分析結(jié)果顯示,在高壓靜電場作用下,甘草種子CCGG位點(diǎn)的甲基化水平約為12.89%,與對照組相比增加了 0.7%,以雙鏈甲基化為主。種子中DNA甲基化水平在萌發(fā)過程中呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢。在子葉期,對照組和高壓靜電場處理組總甲基化水平分別為11.42%和17.48%,顯示高壓靜電場脅迫誘導(dǎo)甘草子葉總的甲基化水平升高了 6.... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－３?Ｈ化Ｃ流程圖??巧ｇｕｒｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ?ｏｆ?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｈｉｇｈ?Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ?Ｌｉｑｕｉｄ?Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ??

．實(shí)，透水性差，自然條件下發(fā)芽率低。因此，需進(jìn)濃硫酸浸種法處理實(shí)驗(yàn)所需甘草種子。操作方法如，放入燒杯中，加適量９８％的濃硫酸，用玻璃棒迅泡ｌＯｍｉｎ左右，取少量種子用純水清洗觀察，若種皮清水反復(fù)沖洗甘草種子，洗掉種子表面酸液，驚千分別選�。保埃傲饬蛩崽幚砗蟮姆N子用于實(shí)驗(yàn)分析，本實(shí)驗(yàn)室前人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置電場處理?xiàng)l件為：０溶液消毒ｌＯｍｉｎ后，置于鋪有２層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，的濕度，然后放入人工氣候室（２５±２’Ｃ）進(jìn)行暗培養(yǎng)。苗，液氮保存?zhèn)溆谩??

代表雙鏈外部發(fā)生甲基化或無ＣＣＧＧ位點(diǎn)，被視為超甲ｌ和巧ｗｌｌ只能準(zhǔn)確的識別Ｉ型、ＩＩ型和曲型，因此本實(shí)驗(yàn)至統(tǒng)計前Ｈ得甲基化水平可能低于實(shí)際水平。??表２．９ＭＡＳＰ帶型??Ｔａｂｌｅ?２．９?Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ?Ｂａｎｄ?Ｔｙｐｅ??模式??Ｐａｔｔｅｒｎｅｄ?ＭＳＡＰ?帶型????ＭＳＡＰ?ｂａｎｄ?ｔｙｐｅ??Ｍｓｐ?Ｉ?ＨａｐＷ??１?１?Ｉ非甲基化??０?１?ＩＩ半甲基化??１?０?ＩＩＩ全甲基化??ＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨＭＨ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]非生物脅迫下植物表觀遺傳變異的研究進(jìn)展[J]. 王淑妍,郭九峰,劉曉婷,苑號坤,李亞嬌,那日.  西北植物學(xué)報. 2016(03)
[2]靜電場的植物生物效應(yīng)研究概述[J]. 王淑妍,郭九峰,劉曉婷,苑號坤,李亞嬌,那日.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2015(35)
[3]干旱脅迫下高羊茅基因組甲基化分析[J]. 唐曉梅,王艷,馬東偉,程海洋,楊宏,代婭,陶向,馬欣榮.  草業(yè)學(xué)報. 2015(04)
[4]電場處理檸條種子對干旱條件下幼葉基因表達(dá)的影響[J]. 劉翔宇,楊體強(qiáng),胡燕飛,王鄭,哈斯阿古拉,劉瑤,王文星,趙清春.  西北植物學(xué)報. 2014(12)
[5]甘草的藥理作用及現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 張利.  中醫(yī)臨床研究. 2014(10)
[6]運(yùn)用MSAP研究鎘脅迫對擬南芥幼苗基因甲基化的影響[J]. 李照令,王鶴潼,陳瑞娟,賈春云,李曉軍,臺培東,李培軍,劉宛.  農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報. 2014(01)
[7]中國甘草資源的生態(tài)分布及其繁殖技術(shù)研究[J]. 李學(xué)斌,陳林,李國旗,安慧.  生態(tài)環(huán)境學(xué)報. 2013(04)
[8]NaCl脅迫對黃瓜種子萌發(fā)的影響及DNA甲基化的MSAP分析[J]. 黃韞宇,張海軍,邢燕霞,齊艷,孫倩倩,周春蕾,趙冰,郭仰東.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(08)
[9]植物DNA甲基化研究進(jìn)展[J]. 李娜,張旸,解莉楠,李玉花.  植物生理學(xué)報. 2012(11)
[10]DNA甲基化及其生物學(xué)功能[J]. 沈秀平,林月霞,徐琪.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(06)

博士論文
[1]激光輻射誘導(dǎo)水稻發(fā)生可遺傳DNA甲基化變異和轉(zhuǎn)座子激活及其可能機(jī)制研究[D]. 李思圓.東北師范大學(xué) 2011

碩士論文
[1]電場處理檸條種子對萌發(fā)與幼苗生長抗旱性影響的時效性[D]. 朱海英.內(nèi)蒙古大學(xué) 2013
[2]高壓靜電場對羽衣甘藍(lán)種子萌發(fā)過程DNA甲基化的影響[D]. 李娜.東北林業(yè)大學(xué) 2013
[3]激光輻射誘導(dǎo)水稻吉粳88號可遺傳DNA甲基化變異和轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座激活的研究[D]. 王丹.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]靜電場脅迫處理誘導(dǎo)不同基因型水稻DNA甲基化變異[D]. 田芹.東北師范大學(xué) 2010
[5]高壓芒刺靜電場處理羊草種子對其幼苗抗鹽堿特性影響的研究[D]. 種建娜.東北師范大學(xué) 2007



本文編號：3611548