谷物種子中含有大量的貯藏蛋白,這些儲藏蛋白是人類和動物所需蛋白質的重要來源。玉米是我國重要的糧食作物�，F(xiàn)階段,在農業(yè)生產中使用的玉米大都是雜交種。關于玉米雜種優(yōu)勢的研究很多,但是雜種優(yōu)勢的遺傳機理仍不十分清楚,而且這些研究主要集中在農藝性狀上,如作物產量,有關其生理生化的研究很少。玉米種子中含有大約10%的蛋白質,其中60-80%為儲藏蛋白,主要存在于種子胚中。但是,有關玉米種子胚中貯藏蛋白在雜種后代和親本間的差異積累模式仍未見報道。本研究以兩個親本自交系鄭58和昌7-2,及其正交、反交雜種后代鄭58×昌7-2（即鄭單958）和昌7-2×鄭58的成熟玉米種子胚為材料,并以胚中的鹽溶儲藏蛋白為例,通過蛋白質雙向電泳（2-DE）、串聯(lián)質譜（MS/MS）和生物信息學分析,對雜種后代和親本之間種子胚中鹽溶蛋白的積累進行了比較蛋白質組學分析,并進一步對雜交種中非加性鹽溶蛋白的表達模式進行了分類。主要獲得以下研究結果:（1）從2-DE圖譜中,我們發(fā)現(xiàn)雜種后代胚中鹽溶蛋白的積累模式更偏向于母本。利用軟件對蛋白質豐度進行定量分析后發(fā)現(xiàn),共有12個蛋白點豐度差異達到2倍以上。經MS/MS鑒定發(fā)現(xiàn),這些差... 

【文章來源】：河南農業(yè)大學河南省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗設計流程圖

種后代與親本胚中清蛋白和鹽溶蛋白的電泳圖譜。1-4 分別代表第一次到第四次連區(qū)域表示被富集的鹽溶蛋白。SDS-PAGE of albumins and salt-soluble proteins in embryos of the reciprocal hybred lines. 1-4 represent the first to the fourth sequential extraction of albumins fr; red boxed indicate the regions of enriched salt-soluble proteins.種子胚中蛋白質含量的測定解種子胚中鹽溶蛋白在不同雜種后代和親本之間的含量變化關系，我們溶蛋白提取法分別提取了各個種子胚中的全蛋白和鹽溶蛋白，并對各種分析，每組實驗設五次生物學重復。從表 1 可以看出，玉米胚中總蛋2 mg（每克干重），鹽溶蛋白含量約為 3.3-4.3 mg。鹽溶蛋白所占百％。 對四種玉米種子蛋白質含量進行差異顯著分析后發(fā)現(xiàn)，無論是全正交組合與鄭 58 的含量更接近，反交組合與昌 7-2 的更接近。表 1 種子胚中全蛋白和鹽溶蛋白含量

時我們選用了 pH 4-7 和 pH 7-10 兩種 IPG 膠條進行胚中鹽溶蛋白的pH 7-10 電泳圖譜中發(fā)現(xiàn)大量蛋白發(fā)生修飾，而且蛋白橫向“拖尾”于 2-DE 在分離極堿性蛋白方面的局限性，影響了蛋白點的分離。因果較好的 pH 4-7 膠條進行 2-DE 分析。從 2-DE 結果可以看出（圖 3親本胚中鹽溶蛋白的圖譜大體上相似。但是，與昌 7-2 相比，正交組；同樣地，與鄭 58 相比，反交組合的圖譜更傾向于昌 7-2。也就是是反交組合，雜種后代中鹽溶蛋白的積累更偏向于母本，尤其是圖 Quest 軟件對雜交種與親本種子胚中鹽溶蛋白的蛋白質圖譜進行分蛋白點。對這些蛋白點進行豐度分析后發(fā)現(xiàn)，共有 12 個蛋白在雜交達到 2 倍以上（圖 3 和圖 4）。點 4-8 所指蛋白在正交組合和反交組一定程度上表明鹽溶蛋白的遺傳穩(wěn)定性。正交組合中的蛋白點 9 和而與鄭 58 相比差異不大；反交組合中蛋白點 9-12 與鄭 58 相比均上，表明雜種后代鹽溶蛋白的積累更傾向于母本。胚中差異積累的鹽溶蛋白的蛋白質組學分析

【參考文獻】：
期刊論文
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