野生黑果枸杞再生體系建立與染色體加倍
發(fā)布時(shí)間:2021-11-11 12:32
黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)為茄科枸杞屬落葉小灌木。在中國(guó)主要分布于新疆、寧夏、西藏、甘肅、青海、和內(nèi)蒙等地區(qū),是一種富含各種營(yíng)養(yǎng)成分,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥用價(jià)值的野生植物。為解決采摘困難、果實(shí)產(chǎn)量低等黑果枸杞產(chǎn)業(yè)發(fā)展限制條件,為我國(guó)農(nóng)業(yè)及環(huán)境問(wèn)題提供有價(jià)值的資料,本研究分別以格爾木黑果枸杞一年生枝條和種子無(wú)菌苗為外植體,分別建立離體培養(yǎng)生再體系,比較兩種外植體選擇適宜度,旨在為黑果枸杞的離體培養(yǎng)技術(shù)方向開(kāi)拓思路,為黑果枸杞種質(zhì)資源的挖掘與保存提供參考依據(jù)。同時(shí),利用該品系種子為供試材料,用秋水仙素進(jìn)行染色體加倍試驗(yàn),以期獲得多倍體(四倍體)植株,并采用形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)等多種染色體鑒定法鑒定染色體倍性(四倍體),為該品系黑果杞種質(zhì)創(chuàng)制、資源合理利用建立理論與實(shí)踐依據(jù)。研究結(jié)果如下:(1)黑果枸杞一年生莖段做為外植體消毒最佳方式為75%乙醇溶液浸泡1min~2min,再用8%的次氯酸鈉溶液浸泡12min。(2)愈傷組織培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L,出愈率為94.89%;愈傷組織增殖培養(yǎng)基為:MS+IAA0.1mg/L+...
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1技術(shù)路線圖??Fig.l?Mathod?roadmap??
?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文?19??2ml預(yù)冷的WPB解離液,用手術(shù)刀迅速切碎,再低溫孵育3?5min后用移液槍在300??目過(guò)濾網(wǎng)上過(guò)濾進(jìn)離心管。用l〇〇〇r/min轉(zhuǎn)速離心5min,棄上清液后得到約500yl??單細(xì)胞核懸浮液,再加入15?ul?PI染色液,在冰中低溫避光染色30min,為防止阻塞??細(xì)胞儀,再進(jìn)行一次過(guò)濾,加入進(jìn)樣管中上機(jī)檢測(cè)。并以二倍體黑果枸杞做對(duì)照組進(jìn)??行對(duì)比分析。??!?f—?mm?1??HHSSH&I??圖2流式細(xì)胞儀??Fig.2?FLOW?Cytometry??
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淺談林木植物組織培養(yǎng)技術(shù)中存在的問(wèn)題及對(duì)策[J]. 劉文靜,徐俊杰. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020(05)
[2]不同培養(yǎng)基和基質(zhì)對(duì)大別山冬青組培苗生根的影響[J]. 方宇鵬,汪詩(shī)德. 安慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020(01)
[3]野生黑果枸杞染色體加倍及其多倍體核型分析[J]. 高粉紅,何麗君,陳海軍,劉嘉偉,單玉梅,汪文晶,于立霞. 分子植物育種. 2020(22)
[4]植物組織培養(yǎng)中褐變和玻璃化及污染的治理研究[J]. 熱娜古麗·吐魯洪,惠浩亮,劉甜甜,閆芬芬,王新建. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(11)
[5]落地生根植物組織培養(yǎng)及試管苗的移栽研究[J]. 高威,李田春,謝玲,張禹瑤,息佳琦. 遼寧科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(05)
[6]不同質(zhì)量濃度NAA、IBA對(duì)栓皮櫟、蒙古櫟黃化嫩枝扦插生根的影響[J]. 張杰,李健康,段安安,孫宇涵,劉洪山,武素然,李貴芬,李云. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(07)
[7]多倍體與二倍體枇杷葉片特征及抗旱性初步分析[J]. 溫國(guó),孫皓浦,黨江波,蔣朋飛,王金英,楊垚,郭啟高,梁國(guó)魯. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2019(08)
[8]木本植物組織培養(yǎng)[J]. 吉訓(xùn)志,秦曉威,胡麗松,王曉陽(yáng),李付鵬,郝朝運(yùn). 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(04)
[9]誘變劑對(duì)蘆筍單倍體染色體加倍的比較[J]. 包艷存,李保華,牟萌,牛曉雪,李霞. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(05)
[10]黑果枸杞組織培養(yǎng)研究[J]. 汪清銳,呂林芳. 山西林業(yè)科技. 2019(01)
碩士論文
[1]生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)荸薺離體植株再生的影響[D]. 徐映萍.浙江大學(xué) 2019
[2]西部沙櫻快繁體系的建立[D]. 馬曉璐.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]萱草屬植物種質(zhì)資源倍性鑒定與核型分析[D]. 張俊.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]八倍體黑果枸杞離體誘導(dǎo)研究[D]. 王蕾.延邊大學(xué) 2018
[5]不同地理種源黑果枸杞的組織培養(yǎng)研究[D]. 王方琳.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]黑果枸杞種子萌發(fā)特性及組織培養(yǎng)研究[D]. 張沛.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[7]長(zhǎng)葉紅砂愈傷組織的誘導(dǎo)分化及莖尖扦插生根[D]. 欒志強(qiáng).內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[8]不同種類(lèi)及種源枸杞染色體核型分析[D]. 何麗娟.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[9]紅葉腺柳組織培養(yǎng)及建立再生體系研究[D]. 胡珊.北京林業(yè)大學(xué) 2016
[10]長(zhǎng)穗桑(Morus wittiorum Handel-Mazzetti)組織培養(yǎng)和四倍體新種質(zhì)誘導(dǎo)的技術(shù)研究[D]. 何建.西南大學(xué) 2006
本文編號(hào):3488862
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1技術(shù)路線圖??Fig.l?Mathod?roadmap??
?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文?19??2ml預(yù)冷的WPB解離液,用手術(shù)刀迅速切碎,再低溫孵育3?5min后用移液槍在300??目過(guò)濾網(wǎng)上過(guò)濾進(jìn)離心管。用l〇〇〇r/min轉(zhuǎn)速離心5min,棄上清液后得到約500yl??單細(xì)胞核懸浮液,再加入15?ul?PI染色液,在冰中低溫避光染色30min,為防止阻塞??細(xì)胞儀,再進(jìn)行一次過(guò)濾,加入進(jìn)樣管中上機(jī)檢測(cè)。并以二倍體黑果枸杞做對(duì)照組進(jìn)??行對(duì)比分析。??!?f—?mm?1??HHSSH&I??圖2流式細(xì)胞儀??Fig.2?FLOW?Cytometry??
?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文?21??敘1??圖3?6min消毒污染產(chǎn)生的白色菌絲??Fig.3?Disinfect?the?white?hyphae?produced?by?contamination?for?6min??3.1.2黑果枸杞莖段愈傷組織培養(yǎng)??愈傷組織培養(yǎng)培養(yǎng)基篩選結(jié)果:本試驗(yàn)部分參考其他品系黑果枸杞組培適用的基??本培養(yǎng)基后,決定選用MS和WPM培養(yǎng)基作兩者之間的比較,在培養(yǎng)基中都添加了??6-BA0.5mg/L?和?IAA0.5mg/L?的激素組合。??表14不同培養(yǎng)基對(duì)黑果枸杞莖段愈傷組織培養(yǎng)??Table.?14?Callus?culture?of?stem?segment?of?Lycium?ruthenium?in?different?media??養(yǎng)總數(shù)存活數(shù)出愈率(%)平均,愈率?愈傷長(zhǎng)勢(shì)??基?(%)???50?50?90.00?表面濕潤(rùn)、長(zhǎng)勢(shì)較好、??MS?50?49?87.75?86.06?愈傷較大、綠色約占??50?46?80.43?3/4?體積??5〇?45?71-11?表面濕潤(rùn)、長(zhǎng)勢(shì)一般、??50?42?55'81?愈傷較孝褐色較多???50?42?66.?67???由表14的數(shù)據(jù)可做如下總結(jié):這兩種培養(yǎng)基的愈傷形成率差距較大,在MS培??養(yǎng)基上接種的莖段有明顯被誘導(dǎo)出愈傷組織的效果,而且產(chǎn)生的愈傷組織顏色鮮艷、??生長(zhǎng)狀態(tài)優(yōu)良、質(zhì)量高,且愈傷組織的平均形成率為86.06%;?WPM培養(yǎng)基中的莖段??也可以形成愈傷組織,但愈傷組織的質(zhì)量不高,長(zhǎng)勢(shì)較弱、愈傷組織較孝有褐化現(xiàn)??象。而且WPM培養(yǎng)基的缺點(diǎn)可以通過(guò)存活率的微小差
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淺談林木植物組織培養(yǎng)技術(shù)中存在的問(wèn)題及對(duì)策[J]. 劉文靜,徐俊杰. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020(05)
[2]不同培養(yǎng)基和基質(zhì)對(duì)大別山冬青組培苗生根的影響[J]. 方宇鵬,汪詩(shī)德. 安慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020(01)
[3]野生黑果枸杞染色體加倍及其多倍體核型分析[J]. 高粉紅,何麗君,陳海軍,劉嘉偉,單玉梅,汪文晶,于立霞. 分子植物育種. 2020(22)
[4]植物組織培養(yǎng)中褐變和玻璃化及污染的治理研究[J]. 熱娜古麗·吐魯洪,惠浩亮,劉甜甜,閆芬芬,王新建. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(11)
[5]落地生根植物組織培養(yǎng)及試管苗的移栽研究[J]. 高威,李田春,謝玲,張禹瑤,息佳琦. 遼寧科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(05)
[6]不同質(zhì)量濃度NAA、IBA對(duì)栓皮櫟、蒙古櫟黃化嫩枝扦插生根的影響[J]. 張杰,李健康,段安安,孫宇涵,劉洪山,武素然,李貴芬,李云. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(07)
[7]多倍體與二倍體枇杷葉片特征及抗旱性初步分析[J]. 溫國(guó),孫皓浦,黨江波,蔣朋飛,王金英,楊垚,郭啟高,梁國(guó)魯. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2019(08)
[8]木本植物組織培養(yǎng)[J]. 吉訓(xùn)志,秦曉威,胡麗松,王曉陽(yáng),李付鵬,郝朝運(yùn). 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(04)
[9]誘變劑對(duì)蘆筍單倍體染色體加倍的比較[J]. 包艷存,李保華,牟萌,牛曉雪,李霞. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(05)
[10]黑果枸杞組織培養(yǎng)研究[J]. 汪清銳,呂林芳. 山西林業(yè)科技. 2019(01)
碩士論文
[1]生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)荸薺離體植株再生的影響[D]. 徐映萍.浙江大學(xué) 2019
[2]西部沙櫻快繁體系的建立[D]. 馬曉璐.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]萱草屬植物種質(zhì)資源倍性鑒定與核型分析[D]. 張俊.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]八倍體黑果枸杞離體誘導(dǎo)研究[D]. 王蕾.延邊大學(xué) 2018
[5]不同地理種源黑果枸杞的組織培養(yǎng)研究[D]. 王方琳.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]黑果枸杞種子萌發(fā)特性及組織培養(yǎng)研究[D]. 張沛.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[7]長(zhǎng)葉紅砂愈傷組織的誘導(dǎo)分化及莖尖扦插生根[D]. 欒志強(qiáng).內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[8]不同種類(lèi)及種源枸杞染色體核型分析[D]. 何麗娟.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[9]紅葉腺柳組織培養(yǎng)及建立再生體系研究[D]. 胡珊.北京林業(yè)大學(xué) 2016
[10]長(zhǎng)穗桑(Morus wittiorum Handel-Mazzetti)組織培養(yǎng)和四倍體新種質(zhì)誘導(dǎo)的技術(shù)研究[D]. 何建.西南大學(xué) 2006
本文編號(hào):3488862
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