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野生黑果枸杞再生體系建立與染色體加倍

發(fā)布時間:2021-11-11 12:32
  黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)為茄科枸杞屬落葉小灌木。在中國主要分布于新疆、寧夏、西藏、甘肅、青海、和內(nèi)蒙等地區(qū),是一種富含各種營養(yǎng)成分,具有較高的營養(yǎng)價值及藥用價值的野生植物。為解決采摘困難、果實產(chǎn)量低等黑果枸杞產(chǎn)業(yè)發(fā)展限制條件,為我國農(nóng)業(yè)及環(huán)境問題提供有價值的資料,本研究分別以格爾木黑果枸杞一年生枝條和種子無菌苗為外植體,分別建立離體培養(yǎng)生再體系,比較兩種外植體選擇適宜度,旨在為黑果枸杞的離體培養(yǎng)技術方向開拓思路,為黑果枸杞種質(zhì)資源的挖掘與保存提供參考依據(jù)。同時,利用該品系種子為供試材料,用秋水仙素進行染色體加倍試驗,以期獲得多倍體(四倍體)植株,并采用形態(tài)學、細胞學及流式細胞術等多種染色體鑒定法鑒定染色體倍性(四倍體),為該品系黑果杞種質(zhì)創(chuàng)制、資源合理利用建立理論與實踐依據(jù)。研究結果如下:(1)黑果枸杞一年生莖段做為外植體消毒最佳方式為75%乙醇溶液浸泡1min~2min,再用8%的次氯酸鈉溶液浸泡12min。(2)愈傷組織培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L,出愈率為94.89%;愈傷組織增殖培養(yǎng)基為:MS+IAA0.1mg/L+... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

野生黑果枸杞再生體系建立與染色體加倍


圖1技術路線圖??Fig.l?Mathod?roadmap??

細胞,低溫,農(nóng)業(yè)大學,手術刀


?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文?19??2ml預冷的WPB解離液,用手術刀迅速切碎,再低溫孵育3?5min后用移液槍在300??目過濾網(wǎng)上過濾進離心管。用l〇〇〇r/min轉速離心5min,棄上清液后得到約500yl??單細胞核懸浮液,再加入15?ul?PI染色液,在冰中低溫避光染色30min,為防止阻塞??細胞儀,再進行一次過濾,加入進樣管中上機檢測。并以二倍體黑果枸杞做對照組進??行對比分析。??!?f—?mm?1??HHSSH&I??圖2流式細胞儀??Fig.2?FLOW?Cytometry??

菌絲,白色,愈傷組織,培養(yǎng)基


?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文?21??敘1??圖3?6min消毒污染產(chǎn)生的白色菌絲??Fig.3?Disinfect?the?white?hyphae?produced?by?contamination?for?6min??3.1.2黑果枸杞莖段愈傷組織培養(yǎng)??愈傷組織培養(yǎng)培養(yǎng)基篩選結果:本試驗部分參考其他品系黑果枸杞組培適用的基??本培養(yǎng)基后,決定選用MS和WPM培養(yǎng)基作兩者之間的比較,在培養(yǎng)基中都添加了??6-BA0.5mg/L?和?IAA0.5mg/L?的激素組合。??表14不同培養(yǎng)基對黑果枸杞莖段愈傷組織培養(yǎng)??Table.?14?Callus?culture?of?stem?segment?of?Lycium?ruthenium?in?different?media??養(yǎng)總數(shù)存活數(shù)出愈率(%)平均,愈率?愈傷長勢??基?(%)???50?50?90.00?表面濕潤、長勢較好、??MS?50?49?87.75?86.06?愈傷較大、綠色約占??50?46?80.43?3/4?體積??5〇?45?71-11?表面濕潤、長勢一般、??50?42?55'81?愈傷較孝褐色較多???50?42?66.?67???由表14的數(shù)據(jù)可做如下總結:這兩種培養(yǎng)基的愈傷形成率差距較大,在MS培??養(yǎng)基上接種的莖段有明顯被誘導出愈傷組織的效果,而且產(chǎn)生的愈傷組織顏色鮮艷、??生長狀態(tài)優(yōu)良、質(zhì)量高,且愈傷組織的平均形成率為86.06%;?WPM培養(yǎng)基中的莖段??也可以形成愈傷組織,但愈傷組織的質(zhì)量不高,長勢較弱、愈傷組織較孝有褐化現(xiàn)??象。而且WPM培養(yǎng)基的缺點可以通過存活率的微小差

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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[5]不同地理種源黑果枸杞的組織培養(yǎng)研究[D]. 王方琳.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2017
[6]黑果枸杞種子萌發(fā)特性及組織培養(yǎng)研究[D]. 張沛.西北農(nóng)林科技大學 2017
[7]長葉紅砂愈傷組織的誘導分化及莖尖扦插生根[D]. 欒志強.內(nèi)蒙古大學 2016
[8]不同種類及種源枸杞染色體核型分析[D]. 何麗娟.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2016
[9]紅葉腺柳組織培養(yǎng)及建立再生體系研究[D]. 胡珊.北京林業(yè)大學 2016
[10]長穗桑(Morus wittiorum Handel-Mazzetti)組織培養(yǎng)和四倍體新種質(zhì)誘導的技術研究[D]. 何建.西南大學 2006



本文編號:3488862

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