近年來極端高溫天氣頻繁發(fā)生,嚴(yán)重影響農(nóng)作物的生長發(fā)育。植物遭受高溫脅迫時(shí),誘導(dǎo)大量產(chǎn)生HSP70蛋白,其作為分子伴侶協(xié)助植物抵抗高溫脅迫的影響。Micro RNA（mi RNA）是一類長度為21-24nt普遍存在于真核生物體內(nèi)的內(nèi)源性單鏈非編碼小RNA,介導(dǎo)靶基因切割或抑制其翻譯來調(diào)控生物體內(nèi)的多種生命活動(dòng),如參與調(diào)控植物高溫脅迫途徑。本研究中novel-mi R311是利用高通量技術(shù)在甘藍(lán)型油菜莖尖中發(fā)現(xiàn)的新mi RNA,其靶基因?yàn)镠SP70家族基因。構(gòu)建novel-mi R311超表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化擬南芥和甘藍(lán)型油菜,通過對(duì)轉(zhuǎn)基因植株高溫脅迫后的表型鑒定和后續(xù)q PCR及可溶性糖含量分析結(jié)果,初步闡明了其生物學(xué)功能。主要結(jié)果如下。1.通過對(duì)novel-mi R311前體序列與甘藍(lán)型油菜和擬南芥基因組序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)其存在于甘藍(lán)型油菜Bna A06g01660D第一個(gè)內(nèi)含子上,擬南芥中無其相似序列。甘藍(lán)型油菜J572中克隆Bna A06g01660D,發(fā)現(xiàn)克隆的Bna A06g01660D中無novelmi R311前體序列。進(jìn)而分別在白菜、甘藍(lán)、芥菜型油菜和甘藍(lán)型油菜的多個(gè)品種中克隆no... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

miRNA基因的三種產(chǎn)生方式(Cuietal2017)

miRNA的生物合成(RogersandChen2013)

Bna-novel-miR311-HSC70-1模塊響應(yīng)甘藍(lán)型油菜熱脅迫5之形成蛋白沉默復(fù)合體而回到細(xì)胞核中，且甲基化其靶標(biāo)基因的靶位點(diǎn)，從而使靶基因表達(dá)下調(diào)(Wuetal2010)。總而言之，miRNA能在轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后和翻譯三個(gè)水平抑制其靶基因的表達(dá)。圖1.3miRNA的調(diào)控機(jī)制(RogersandChen2013)Fig.1.3miRNAregulationmechanism(RogersandChen2013)1.1.5植物miRNA及其靶基因的挖掘近年來，因高通量技術(shù)的迅速發(fā)展，大量miRNA在多種植物中被發(fā)現(xiàn)，序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)植物中的miRNA大部分都是高度保守的(Axtelletal2006)。miRNA表達(dá)量較高的，通常易被檢測到，且這些miRNA一般都是高度保守的；miRNA的高通量測序也檢測到諸多不保守的，特別是種類特異性的miRNAs，這些miRNAs的發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步拓展了植物中miRNA的研究。為更深層次的解析miRNA的功能，對(duì)miRNA靶基因的挖掘顯得十分重要。miRNA靶基因的挖掘，目前普遍使用兩種方法，第一種是使用psRNATarget(http://plantgrn.noble.org/psRNATarget/）等在線軟件來預(yù)測，這種方法的原理是利用miRNA和其靶基因堿基互補(bǔ)配對(duì)，由于miRNA與其靶基因的表達(dá)模式在植物體內(nèi)存在著時(shí)空和組織特異性，使得這種方法最大的缺點(diǎn)便是準(zhǔn)確性差。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]油菜miRNA研究現(xiàn)狀與展望[J]. 陳麗,魯海琴,李日慧,傅廷棟,沈金雄.  中國油料作物學(xué)報(bào). 2018(05)
[2]利用非條件和條件QTL解析油菜產(chǎn)量相關(guān)性狀的遺傳關(guān)系[J]. 焦聰聰,黃吉祥,汪義龍,張曉玉,熊化鑫,倪西源,趙堅(jiān)義.  作物學(xué)報(bào). 2015(10)
[3]葉綠體J蛋白研究進(jìn)展[J]. 孔凡英,鄧永勝,孟慶偉.  植物生理學(xué)報(bào). 2011(03)
[4]小RNA的研究進(jìn)展[J]. 郭曉麗.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2010(03)
[5]分子設(shè)計(jì)育種在油菜育種中的應(yīng)用展望[J]. 劉勛,殷家明,徐新福.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(07)
[6]植物熱激蛋白的功能及其基因表達(dá)的調(diào)控[J]. 黃祥富,黃上志,傅家瑞.  植物學(xué)通報(bào). 1999(05)

博士論文
[1]苯磺隆誘導(dǎo)甘藍(lán)型油菜雄性敗育的機(jī)理及自體吞噬在苯磺隆抗性中的作用[D]. 趙倫.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]甘藍(lán)型油菜自交不親和分子恢復(fù)機(jī)理研究及應(yīng)用[D]. 高長斌.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]miR395調(diào)節(jié)油菜（Brassica napus）耐鎘功能的研究[D]. 張柳偉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3457895