麥角甾醇是蟲草類真菌主要的甾醇類成分,具有抗腫瘤、抗炎、抗纖維化等藥理活性,在醫(yī)藥領(lǐng)域表現(xiàn)出巨大的潛在應(yīng)用價值。然而關(guān)于蟲草麥角甾醇的研究缺乏系統(tǒng)的探索和評價,蟲草麥角甾醇基礎(chǔ)研究及產(chǎn)業(yè)開發(fā)均較為薄弱。本研究對蟲草麥角甾醇提取方法、不同蟲草物種及菌株間含量分布特征以及其合成途徑相關(guān)基因等進行探索,主要獲得以下結(jié)果:1利用響應(yīng)面分析法對HPLC測定蟲草麥角甾醇方法進行優(yōu)化。以提取溶劑甲醇濃度、固液比、浸泡時間、超聲時間、超聲次數(shù)為初步考察因素進行單因素試驗,在此基礎(chǔ)上應(yīng)用響應(yīng)面法,考察固液比、浸泡時間及超聲時間對蟲草麥角甾醇提取量的影響,優(yōu)化提取工藝。試驗獲得較優(yōu)提取工藝條件為:提取溶劑純甲醇,固液比1:40,浸泡時間3.3 h,超聲時間50 min,超聲提取次數(shù)兩次。驗證試驗證明模型預(yù)測值與實驗值之間具有良好的擬合性,結(jié)合方法性驗證,證明提取及測定方法穩(wěn)定可行。2測定不同科屬8種蟲草菌絲體生長過程中生物量及麥角甾醇含量,并結(jié)合總麥角甾醇含量,繪制時間曲線,揭示三者隨時間變化規(guī)律,并分析蟲草菌絲體麥角甾醇含量與生物量的相關(guān)性。結(jié)果顯示,菌絲體生長過程中,生物量多為先升高再持平最后降低規(guī)律... 

【文章來源】：云南大學(xué)云南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２麥角甾醇與維生素Ｄ２結(jié)構(gòu)式及其轉(zhuǎn)化關(guān)系??

反應(yīng)步驟在調(diào)控合成途徑中十分重要。在釀酒酵母中，這一階段共包括９步反應(yīng)，??９個相關(guān)基因（幻？Ｇ２０基因之前）參與，有五及Ｇ／３、／／ＭＧ八／／ＭＧ２、??ＭＧＳ、現(xiàn)Ｇ７９、／Ｄ／／和現(xiàn)Ｇ２０?（圖１．４）。這９個基因都是生長必需的，敲除致??死，且外源添加麥角留醇也不能獲得缺失突變體。第二階段是后角鯊烯合成途徑??（ｐｏｓｔ－ｓｑｕａｌｅｎｅ?ｐａｔｈｗａｙ），從角鳘煤形成開始（Ｌｅｅｓ?ｅｆ?ａ／．，１９９９）。保守性相對??比第一個階段低，相關(guān)基因并非生長必需，比如現(xiàn)基因缺失致死，但??在外源培養(yǎng)基中添加麥角留醇能獲得基因缺失突變體。共包括１２步反應(yīng)，參與的??麵有?ＥＲＧ９、ＥＲＧｉ、ＥＲＧ７、ＥＲＧｉｌ、ＥＲＧ２４、ＥＲＧ２５、ＥＲＧ２６、ＥＲＧ２７、ＥＲＧ２８、??ＥＲＧ６、ＥＲＧ２、ＥＲＧ３、ＥＲＧ５?和?ＥＲＧ４?（凰＼．３、。??Ｂ??Ａ?ｆａｍｃｓｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ??２－ａｃｃｔｙｌ￣ＣｏＡ?？?Ｉ??ＬＲＧ９?ｉ?Ｍ＾ｕａｌｒｎｃ?ｓｙｎｔｈａｓｅ??找ＣＩＯ?｜?ａｃｃｔＯＫｃｒｙｌ－ＣｏＡｌｈｉｏＵｓｃ??ａ〇Ｃｔ〇ａＣ？＞?ｌ－Ｃ〇Ａ?Ｅ／ｔＧＩ?丄?＜ｑｔｕ）ｒｎｒ?ｃｐｏｘｉｄａａｃ??ＥＸＧ１３?丄?ＨＭＧ?ＣｏＡ?ｓｙｎｔｈａｓｅ?ｓｑｉｕｉｋｎｅ?ｒｐｏｘｉｄｅ??ＨＭＧ?ＣｏＡ?ＥＲＧ７?‘?ｌａｎｏｓｌｃｒｏｌ?ｓｙｎＵｕｉｓ？??ＨＭＧｌ

Ｆｉｇ．?２．２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｍｅｔｈａｎｏｌ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??對麥角留醇提取量的影響??液比１：１０－１：５０（０．１?ｇ樣品加ＭｍＬ甲醇）考察提取液劑量響，結(jié)果見圖２．３，結(jié)果表明，隨固液比增加麥角Ｓ醇提取時含量較高并出現(xiàn)轉(zhuǎn)折。原因可能為樣品中麥角甾醇隨提加，到固液比１：３０以后溶解量達飽和，提取量保持不變。??２５００?－??Ｉ?２０００?－?＾￣一＾??＿?１５００?ｉ??？?１０００?－??Ｍ?５００?＇??０?Ｊ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?！?Ｉ?！??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同培養(yǎng)因素對蟬花培養(yǎng)物中麥角甾醇的影響[J]. 劉艷菊,張忠亮,董建飛,陳桃寶,施偉勤,王玉芹.  藥物評價研究. 2016(04)
[2]HPLC法測定不同產(chǎn)地不同品種馬勃藥材中麥角甾醇[J]. 相聰坤,宿樹蘭,關(guān)勝江,黃懷鵬,王巧,安福麗,陳迎春,吳海燕,朱珊.  中草藥. 2016(08)
[3]冬蟲夏草核苷類成分分析研究進展[J]. 艾中,錢正明,李文佳,楊豐慶,陳淑琳,李二偉.  菌物學(xué)報. 2016(04)
[4]冬蟲夏草中蟲草多糖的藥理研究進展[J]. 胡賢達,周菲,黃雪,岳穎,黃福開.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2016(06)
[5]我國蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀、問題及展望——蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展金湖宣言[J]. 董彩虹,李文佳,李增智,閆文娟,李泰輝,劉杏忠,蔡磊,曾文波,柴美清,陳仕江,陳自宏,代永東,戴天機,都興范,顧寅鈺,郭良棟,郭曉玲,郭英蘭,韓日疇,何沛平,賀宗毅,黃顯智,柯傳奎,孔德勇,郎寧,李兵,李毅,李春如,李建剛,李培榮,李玉玲,林文飛,劉文海,劉艷芳,劉乙清,劉作易,陸震鳴,羅信昌,呂作舟,馬欣,錢正明,施新琴,史勁松,王瑩,王成樹,王國強,王文風(fēng),王元兵,旺姆,溫魯,魏江春,文戈,吳根土,肖波,謝放,辛樹權(quán),徐娟,徐國華,徐鴻雁,徐泰浩,許正宏,陽武雄,易斯富,于興軍,虞泓,袁峰,翟立泰,趙豐麗,朱景明,朱榮才.  菌物學(xué)報. 2016(01)
[6]蛹蟲草多糖和D-甘露醇深層發(fā)酵的非結(jié)構(gòu)動力學(xué)模型[J]. 王曉玲,周廣乙,劉高強.  菌物學(xué)報. 2016(10)
[7]響應(yīng)面設(shè)計法優(yōu)選金蟬花麥角甾醇提取工藝[J]. 楊安倫,陳忠,李建生.  實用藥物與臨床. 2015(11)
[8]響應(yīng)面法優(yōu)化荷葉離褶傘菌絲體產(chǎn)漆酶條件[J]. 梁倩倩,魏生龍,席亞麗,焦揚.  菌物學(xué)報. 2016(03)
[9]響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲提取蘭坪被毛孢多糖和D-甘露醇[J]. 杜亞茜,虞泓,葛鋒,劉迪秋,陳朝銀.  食品工業(yè)科技. 2015(08)
[10]RP-HPLC測定人工蟲草和天然蟲草中麥角甾醇含量[J]. 張薇薇,龔韜,韓東河,胡永君.  中國中醫(yī)藥信息雜志. 2014(04)

博士論文
[1]多頭霉新科系統(tǒng)發(fā)育研究[D]. 王元兵.云南大學(xué) 2016
[2]猴頭菌麥角甾醇高產(chǎn)菌株篩選及代謝調(diào)控的研究[D]. 戴肖東.東北林業(yè)大學(xué) 2014
[3]小麥赤霉病菌麥角甾醇生物合成途徑中關(guān)鍵基因的功能研究[D]. 劉馨.浙江大學(xué) 2012

碩士論文
[1]蛹蟲草、粉棒束孢和蝙蝠蛾擬青霉培養(yǎng)過程中化學(xué)成分的比較研究[D]. 楊俊媛.云南大學(xué) 2015
[2]珊瑚狀猴頭菌子實體化學(xué)成分及總甾體含量測定的研究[D]. 張鵬.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]麥角甾醇產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件研究[D]. 熊寧波.天津科技大學(xué) 2003



本文編號：3446264