大豆MADS-box家族基因GmNMH7在根發(fā)育和結(jié)瘤過程中的功能研究
發(fā)布時間：2021-10-14 07:28
大豆是重要的糧食作物和油料作物,同時也是具有根瘤固氮能力的作物。GmNMH7為大豆MADS-box家族轉(zhuǎn)錄因子,有研究表明該轉(zhuǎn)錄因子的編碼基因可能與大豆根發(fā)育及結(jié)瘤有關(guān),但其功能缺乏具體研究。本研究期望通過對該基因的系統(tǒng)探究,為確定該基因在根發(fā)育及結(jié)瘤調(diào)控過程中的作用提供分子基礎(chǔ)。從亞細胞定位、基因表達測定、功能鑒定及初步的機理解析等不同層面進行研究,取得主要研究結(jié)果如下:1.成功克隆了GmNMH7基因CDS序列,該序列全長684 bp;亞細胞定位結(jié)果顯示,GmNMH7蛋白在細胞膜和細胞核中均有表達。2.Real-time PCR實驗結(jié)果表明,對自貢冬豆出苗后進行28 d 12 h光照/12 h黑暗的短日處理后,GmNMH7基因在根和根瘤中的表達量明顯高于莖、葉、花等其它器官。對2周苗齡的自貢冬豆根瘤菌接種10 d內(nèi)GmNMH7基因的表達模式的分析,顯示其與已知的根瘤早期發(fā)育相關(guān)基因Gm ENOD40-1、GmENOD40-2、GmNFR5α等的表達模式相似,并且表達高峰早于該類基因。3.在發(fā)根轉(zhuǎn)化系統(tǒng)中過表達GmNMH7基因顯著降低根瘤數(shù)目及根長;在陽性發(fā)根中,過表達Gm NMH7基...
【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
根瘤菌與豆科植物共生過程中的信號交換（Schultzeetal，1998）
圖 2.1 短日條件下花總 RNA 提取示意圖 圖 2.2 克隆 GmNMH7 基因 PCR 產(chǎn)物電泳圖Figure 2.1 Total RNAextraction of flower Figure 2.2 Electrophoregram of GmNMH7 gene PCRunder short day conditions. products.2.2.2 GmNMH7 與 MsNMH7、AtAP3 蛋白序列的一致性從 NCBI 數(shù)據(jù)庫獲得 GmNMH7（登錄號為：NP_001236857.1），MsNMH7（登錄號為：AEW43601.1）及 AtAP3 蛋白的氨基酸序列（登錄號為：NP_191002），利用軟件 BioEdit 進行序列比對。預測 GmNMH7 基因編碼長為 227 氨基酸的蛋白序列，序列比對結(jié)果顯示該蛋白序列與苜蓿 MsNMH7 蛋白序列有 89.96%的一致性，與 AtAP3 有 54.74%的一致性（圖 2.3）。所有的序列都包括 MADS_MEF2（myocyte enhancer factor 2）_like 和 K-box 結(jié)構(gòu)域，并且保守性較高，均屬于第二類 MADS-box 蛋白。
克隆GmNMH7基因PCR產(chǎn)物電泳圖
【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同氮肥施用量對大豆生長狀況的影響[J]. 宋秀麗. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2015(06)
[2]施氮時期對大豆結(jié)瘤和生長的影響[J]. 寸植賢,李春葦,湯東生,秀洪學. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2015(01)
[3]盆栽條件下土壤無機氮濃度對大豆結(jié)瘤、固氮和產(chǎn)量的影響[J]. 嚴君,韓曉增. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2014(10)
[4]不同供N方式對大豆生長和結(jié)瘤固氮的影響[J]. 王樹起,韓曉增,喬云發(fā),嚴君,李曉慧. 大豆科學. 2009(05)
[5]施氮對大豆根瘤生長和結(jié)瘤固氮的影響[J]. 王樹起,韓曉增,喬云發(fā),嚴君,李曉慧. 華北農(nóng)學報. 2009(02)
[6]大豆結(jié)瘤固氮對磷素的需求[J]. 苗淑杰,喬云發(fā),韓曉增. 農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學與綜合研究. 2006(04)
[7]固氮正調(diào)節(jié)基因nifA促進大豆根瘤菌的結(jié)瘤效率[J]. 趙潔平,戴小密,許玲,朱家璧,沈善炯,俞冠翹. 科學通報. 2001(23)
[8]缺硼對大豆根瘤結(jié)構(gòu)和功能的影響[J]. 吳靜,李春儉,王賀,張福鎖,江榮風. 西北植物學報. 1999(03)
[9]組成型nifA對大豆根瘤菌（Rhizobium fredii）HN01lux結(jié)瘤固氮效率的促進作用[J]. 陳昌斌,戴小密,俞冠翹,沈善炯. 科學通報. 1999(05)
[10]硼對大豆結(jié)瘤和固氮作用的影響——Ⅰ.對生長、營養(yǎng)元素吸收與分布和固氮量影響[J]. 江榮風,張福鎖. 植物營養(yǎng)與肥料學報. 1994(01)
碩士論文
[1]不同氮素水平對大豆根瘤菌多樣性與結(jié)瘤固氮的影響[D]. 柏宇.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[2]施氮對大豆結(jié)瘤固氮及生長的影響[D]. 嚴君.東北農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]茉莉酸甲酯對大豆結(jié)瘤和固氮影響的研究[D]. 徐曲毅.華南師范大學 2004
本文編號：3435712
【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
根瘤菌與豆科植物共生過程中的信號交換（Schultzeetal，1998）
圖 2.1 短日條件下花總 RNA 提取示意圖 圖 2.2 克隆 GmNMH7 基因 PCR 產(chǎn)物電泳圖Figure 2.1 Total RNAextraction of flower Figure 2.2 Electrophoregram of GmNMH7 gene PCRunder short day conditions. products.2.2.2 GmNMH7 與 MsNMH7、AtAP3 蛋白序列的一致性從 NCBI 數(shù)據(jù)庫獲得 GmNMH7（登錄號為：NP_001236857.1），MsNMH7（登錄號為：AEW43601.1）及 AtAP3 蛋白的氨基酸序列（登錄號為：NP_191002），利用軟件 BioEdit 進行序列比對。預測 GmNMH7 基因編碼長為 227 氨基酸的蛋白序列，序列比對結(jié)果顯示該蛋白序列與苜蓿 MsNMH7 蛋白序列有 89.96%的一致性，與 AtAP3 有 54.74%的一致性（圖 2.3）。所有的序列都包括 MADS_MEF2（myocyte enhancer factor 2）_like 和 K-box 結(jié)構(gòu)域，并且保守性較高，均屬于第二類 MADS-box 蛋白。
克隆GmNMH7基因PCR產(chǎn)物電泳圖
【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同氮肥施用量對大豆生長狀況的影響[J]. 宋秀麗. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2015(06)
[2]施氮時期對大豆結(jié)瘤和生長的影響[J]. 寸植賢,李春葦,湯東生,秀洪學. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2015(01)
[3]盆栽條件下土壤無機氮濃度對大豆結(jié)瘤、固氮和產(chǎn)量的影響[J]. 嚴君,韓曉增. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2014(10)
[4]不同供N方式對大豆生長和結(jié)瘤固氮的影響[J]. 王樹起,韓曉增,喬云發(fā),嚴君,李曉慧. 大豆科學. 2009(05)
[5]施氮對大豆根瘤生長和結(jié)瘤固氮的影響[J]. 王樹起,韓曉增,喬云發(fā),嚴君,李曉慧. 華北農(nóng)學報. 2009(02)
[6]大豆結(jié)瘤固氮對磷素的需求[J]. 苗淑杰,喬云發(fā),韓曉增. 農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學與綜合研究. 2006(04)
[7]固氮正調(diào)節(jié)基因nifA促進大豆根瘤菌的結(jié)瘤效率[J]. 趙潔平,戴小密,許玲,朱家璧,沈善炯,俞冠翹. 科學通報. 2001(23)
[8]缺硼對大豆根瘤結(jié)構(gòu)和功能的影響[J]. 吳靜,李春儉,王賀,張福鎖,江榮風. 西北植物學報. 1999(03)
[9]組成型nifA對大豆根瘤菌（Rhizobium fredii）HN01lux結(jié)瘤固氮效率的促進作用[J]. 陳昌斌,戴小密,俞冠翹,沈善炯. 科學通報. 1999(05)
[10]硼對大豆結(jié)瘤和固氮作用的影響——Ⅰ.對生長、營養(yǎng)元素吸收與分布和固氮量影響[J]. 江榮風,張福鎖. 植物營養(yǎng)與肥料學報. 1994(01)
碩士論文
[1]不同氮素水平對大豆根瘤菌多樣性與結(jié)瘤固氮的影響[D]. 柏宇.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[2]施氮對大豆結(jié)瘤固氮及生長的影響[D]. 嚴君.東北農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]茉莉酸甲酯對大豆結(jié)瘤和固氮影響的研究[D]. 徐曲毅.華南師范大學 2004
本文編號：3435712
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