大豆是重要的糧食作物和油料作物,同時(shí)也是具有根瘤固氮能力的作物。GmNMH7為大豆MADS-box家族轉(zhuǎn)錄因子,有研究表明該轉(zhuǎn)錄因子的編碼基因可能與大豆根發(fā)育及結(jié)瘤有關(guān),但其功能缺乏具體研究。本研究期望通過(guò)對(duì)該基因的系統(tǒng)探究,為確定該基因在根發(fā)育及結(jié)瘤調(diào)控過(guò)程中的作用提供分子基礎(chǔ)。從亞細(xì)胞定位、基因表達(dá)測(cè)定、功能鑒定及初步的機(jī)理解析等不同層面進(jìn)行研究,取得主要研究結(jié)果如下:1.成功克隆了GmNMH7基因CDS序列,該序列全長(zhǎng)684 bp;亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,GmNMH7蛋白在細(xì)胞膜和細(xì)胞核中均有表達(dá)。2.Real-time PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)自貢冬豆出苗后進(jìn)行28 d 12 h光照/12 h黑暗的短日處理后,GmNMH7基因在根和根瘤中的表達(dá)量明顯高于莖、葉、花等其它器官。對(duì)2周苗齡的自貢冬豆根瘤菌接種10 d內(nèi)GmNMH7基因的表達(dá)模式的分析,顯示其與已知的根瘤早期發(fā)育相關(guān)基因Gm ENOD40-1、GmENOD40-2、GmNFR5α等的表達(dá)模式相似,并且表達(dá)高峰早于該類基因。3.在發(fā)根轉(zhuǎn)化系統(tǒng)中過(guò)表達(dá)GmNMH7基因顯著降低根瘤數(shù)目及根長(zhǎng);在陽(yáng)性發(fā)根中,過(guò)表達(dá)Gm NMH7基... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

根瘤菌與豆科植物共生過(guò)程中的信號(hào)交換（Schultzeetal，1998）

圖 2.1 短日條件下花總 RNA 提取示意圖 圖 2.2 克隆 GmNMH7 基因 PCR 產(chǎn)物電泳圖Figure 2.1 Total RNAextraction of flower Figure 2.2 Electrophoregram of GmNMH7 gene PCRunder short day conditions. products.2.2.2 GmNMH7 與 MsNMH7、AtAP3 蛋白序列的一致性從 NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)獲得 GmNMH7（登錄號(hào)為：NP_001236857.1），MsNMH7（登錄號(hào)為：AEW43601.1）及 AtAP3 蛋白的氨基酸序列（登錄號(hào)為：NP_191002），利用軟件 BioEdit 進(jìn)行序列比對(duì)。預(yù)測(cè) GmNMH7 基因編碼長(zhǎng)為 227 氨基酸的蛋白序列，序列比對(duì)結(jié)果顯示該蛋白序列與苜蓿 MsNMH7 蛋白序列有 89.96%的一致性，與 AtAP3 有 54.74%的一致性（圖 2.3）。所有的序列都包括 MADS_MEF2（myocyte enhancer factor 2）_like 和 K-box 結(jié)構(gòu)域，并且保守性較高，均屬于第二類 MADS-box 蛋白。

克隆GmNMH7基因PCR產(chǎn)物電泳圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]不同氮素水平對(duì)大豆根瘤菌多樣性與結(jié)瘤固氮的影響[D]. 柏宇.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[2]施氮對(duì)大豆結(jié)瘤固氮及生長(zhǎng)的影響[D]. 嚴(yán)君.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]茉莉酸甲酯對(duì)大豆結(jié)瘤和固氮影響的研究[D]. 徐曲毅.華南師范大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3435712