煙草是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物,以葉片為主要收獲對象,煙葉品質(zhì)極易受到外界生物或非生物脅迫的影響。類鈣調(diào)神經(jīng)素B亞基蛋白CBL（Calcineurin B-like protein）和互作蛋白激酶CIPK（CBL-interacting protein kinase）形成的信號通路參與植物細(xì)胞對多種生物脅迫或非生物脅迫的響應(yīng)過程。因此,充分解析和利用煙草中的CBL-CIPK調(diào)控網(wǎng)絡(luò),有助于明確煙草在脅迫下的防御機(jī)制,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步開展品種選育工作,對于穩(wěn)定煙葉品質(zhì)具有重要意義。本研究將林煙草（Nicotiana sylvestris）NsylCBL10和NsylCBL5基因在擬南芥中進(jìn)行異源表達(dá),對兩個(gè)基因的功能在不同脅迫下的功能進(jìn)行了探究。同時(shí),通過順式作用元件預(yù)測和GUS（β-Glucuronidase）化學(xué)染色分析,對NsylCBL10和NsylCBL5的啟動子進(jìn)行了分析。通過脅迫表型觀察發(fā)現(xiàn):在100μM低鉀（K⁺）條件下,隨著銨（NH₄⁺）濃度從0 mM上升到30 mM,NsylCBL10過表達(dá)株系和回復(fù)株系的根部... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CBL4-CIPK24信號通路示意圖

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言使 SOS1 將細(xì)胞內(nèi)過多的 Na+排出細(xì)胞外（Qiu, et al., 2002; Zhu, 2003）。PP2C（protein phosphatase2C）蛋白磷酸酶家族的成員 ABI2（abscisic acid-insensitive 2）可與 CIPK24 互作（Ohta, et al., 2003），并負(fù)向調(diào)節(jié) SOS 耐鹽通路（Ohta, et al., 2003），但調(diào)節(jié)機(jī)理還不清楚。研究認(rèn)為，與 CIPK24 結(jié)合后，ABI2 可能通過去磷酸化 SOS1（圖 1.1b）或 CIPK24（圖 1.1c）兩種途徑來阻斷CBL4-CIPK24-SOS1 通路（Ohta, et al., 2003）.1.2 CBL 和 CIPK 家族成員的分類和表達(dá)模式

圖 1.3 擬南芥中 CIPKs 的進(jìn)化分析及基因外顯子-內(nèi)含子的分布Figure 1.3 Phylogenetic analysis and intron-exon distribution of CIPKs in Arabidopsis thaliana列來自于 UniProt 數(shù)據(jù)庫。CIPK家族基因的 CDS 序列和基因組序列來自于 TAIR 數(shù)據(jù)庫。需要指明的是，一些成體，我們選擇了具有代表性的剪接方式。MEGA6 采用鄰接法，分析在線軟件采用在線軟件 GSDS2.0（gsds.cbi.pk）進(jìn)行分析。no acid sequences are obtained from UniProt. The coding sequences (CDS) and genomic sequences of CIPKs were obtained Information Resource (TAIR). It is noted that only the representative splice variant was selected for the analysis as to somle splice variants. MEGA6 with Neighbor-Joining method and an online software GSDS 2.0 (gsds.cbi.pku.edu.cn/) was usanalysis.關(guān)系近的基因可能具有相似的功能，它們的協(xié)作對于植物適應(yīng)復(fù)雜多變的外界環(huán) TAIR 數(shù)據(jù)庫中 CIPKs 在不同非生物脅迫下的表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，多內(nèi)含K1 和 CIPK3（r = 0.86272，p < 0.0001；r 和 p 分別代表相關(guān)性和相關(guān)概率）、CIr = 0.57839，p < 0.0001）（圖 1.4a，b），少內(nèi)含子分支中的 CIPK7 和 CIPK12（r = 0.61）（圖 1.4c）表達(dá)模式相關(guān)性很強(qiáng)。值得注意的是，盡管同源基因通常具有相似的相似的旁系同源基因卻可能會進(jìn)化出一些不同的功能（Pandey, et al., 2004）。CBL和很多旁系同源基因，如 CBL1/9、CBL2/3、CIPK1/17、CIPK2/10、CIPK4/7、CIP

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]杜梨PbCBL10基因表達(dá)與啟動子功能分析[J]. 許園園,藺經(jīng),李曉剛,李慧,常有宏.  果樹學(xué)報(bào). 2014(06)
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博士論文
[1]玉米逆境脅迫響應(yīng)基因ZmSnRK2.11、ZmCBL9及ZmCBL10的功能分析[D]. 張凡.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]林煙草CBL基因家族成員NsylCBL10的功能分析[D]. 董連紅.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015



本文編號：3423890