甘藍(lán)型油菜BnWRKY41-1轉(zhuǎn)錄因子在擬南芥葉片花青素積累方面的功能分析
發(fā)布時(shí)間:2021-09-22 01:11
作為我國(guó)種植面積最大的油料作物和世界第三大消耗食用油的來(lái)源,油菜在保障糧食安全中占據(jù)著舉足輕重的地位;ㄇ嗨卦诟纳撇俗延推焚|(zhì)、提供油菜選育的性狀標(biāo)記、提高油菜抗逆性和培育多彩油菜品種等方面發(fā)揮著積極的作用。為了優(yōu)化花青素對(duì)油菜的效用,需要不斷完善油菜花青素合成路徑相關(guān)的基因網(wǎng)絡(luò)。本研究發(fā)現(xiàn)BnWRKY41-1轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)負(fù)調(diào)控五個(gè)花青素積累相關(guān)基因的表達(dá),抑制了擬南芥葉片的花青素含量。為進(jìn)一步揭示BnWRKY41在油菜中的功能奠定了基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.在甘藍(lán)型油菜中,共存在兩個(gè)WRKY41同源拷貝,分別為BnWRKY41-1(XP013686534.1)和BnWRKY41-2(XP013695247.1)。本研究從Westar油菜品種中克隆得到BnWRKY41-1。蛋白質(zhì)序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,BnWRKY41-1與擬南芥AtWRKY41的親緣關(guān)系較近,兩者功能域的相似度是92%,所以兩者調(diào)控的下游基因和造成的表型變化很有可能是相似的。2.將pGreen-35S:BnWRKY41-1-6HA轉(zhuǎn)入擬南芥wrky41-2突變體(SALK<...
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 植物類黃酮概述
1.2 類黃酮中的一類:花青素
1.2.1 花青素的結(jié)構(gòu)
1.2.2 花青素的生物合成
1.2.3 花青素抗氧化的機(jī)理
1.2.4 花青素對(duì)作物的功能
1.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子
1.3.1 WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與分類
1.3.2 WRKY轉(zhuǎn)錄因子與DNA的結(jié)合
1.3.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物中的功能
1.4 問(wèn)題的提出與研究意義
第二章 材料與方法
2.1 植物材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 蛋白質(zhì)多序列比對(duì)
2.2.2 WRKY41蛋白質(zhì)序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析
2.2.3 引物設(shè)計(jì)
2.2.4 基因克隆與載體構(gòu)建
2.2.5 煙草葉片亞細(xì)胞定位
2.2.6 擬南芥的轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)基因植株的篩選
2.2.7 基因型鑒定
2.2.8 基因表達(dá)分析
2.2.9 葉片花青素含量測(cè)定
2.2.10 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)
2.2.11 染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)
第三章 BnWRKY41-1調(diào)控葉片花青素積累的機(jī)理分析
3.1 前言與技術(shù)路線
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 BnWRKY41-1蛋白質(zhì)的序列分析
3.2.2 BnWRKY41-1的亞細(xì)胞定位
3.2.3 植物材料的鑒定
3.2.4 葉片花青素含量的動(dòng)態(tài)分析
3.2.5 Col-0和wrky41-2間ACR-DEGs(花青素相關(guān)差異基因)的挖掘
3.2.6 ACR-DEGs的驗(yàn)證
3.2.7 AtWRKY41和BnWRKY41-1與ACR-DEGs結(jié)合位點(diǎn)的分析
3.3 討論
第四章 結(jié)論與展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3402849
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 植物類黃酮概述
1.2 類黃酮中的一類:花青素
1.2.1 花青素的結(jié)構(gòu)
1.2.2 花青素的生物合成
1.2.3 花青素抗氧化的機(jī)理
1.2.4 花青素對(duì)作物的功能
1.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子
1.3.1 WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與分類
1.3.2 WRKY轉(zhuǎn)錄因子與DNA的結(jié)合
1.3.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物中的功能
1.4 問(wèn)題的提出與研究意義
第二章 材料與方法
2.1 植物材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 蛋白質(zhì)多序列比對(duì)
2.2.2 WRKY41蛋白質(zhì)序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析
2.2.3 引物設(shè)計(jì)
2.2.4 基因克隆與載體構(gòu)建
2.2.5 煙草葉片亞細(xì)胞定位
2.2.6 擬南芥的轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)基因植株的篩選
2.2.7 基因型鑒定
2.2.8 基因表達(dá)分析
2.2.9 葉片花青素含量測(cè)定
2.2.10 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)
2.2.11 染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)
第三章 BnWRKY41-1調(diào)控葉片花青素積累的機(jī)理分析
3.1 前言與技術(shù)路線
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 BnWRKY41-1蛋白質(zhì)的序列分析
3.2.2 BnWRKY41-1的亞細(xì)胞定位
3.2.3 植物材料的鑒定
3.2.4 葉片花青素含量的動(dòng)態(tài)分析
3.2.5 Col-0和wrky41-2間ACR-DEGs(花青素相關(guān)差異基因)的挖掘
3.2.6 ACR-DEGs的驗(yàn)證
3.2.7 AtWRKY41和BnWRKY41-1與ACR-DEGs結(jié)合位點(diǎn)的分析
3.3 討論
第四章 結(jié)論與展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3402849
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