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糜子超長(zhǎng)鏈脂肪醇合成酶基因PmFAR的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-08-31 00:21
  糜子(Panicum miliaceum L.)在我國(guó)干旱半干旱地區(qū)廣泛種植,同時(shí)也是重要的糧食作物。糜子的生理代謝、生長(zhǎng)發(fā)育、產(chǎn)量及品質(zhì)均受干旱的影響。植物表皮蠟質(zhì)可以通過(guò)減少植物表皮水分的散失,進(jìn)而對(duì)植物起到保水抗旱的作用,因此研究糜子表皮蠟質(zhì)組成、晶體結(jié)構(gòu)以及其生物學(xué)功能,將為糜子抗旱性研究和品種選育提供一條新的思路和途徑。本試驗(yàn)以黃土高原區(qū)種植的普通糜子品種榆黍1號(hào)、雁黍7號(hào)、隴糜8號(hào)、晉黍9號(hào)和寧糜10號(hào)為試驗(yàn)材料,利用GC-MS、GC-FID和SEM等試驗(yàn)技術(shù)分別檢測(cè)不同品種及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期糜子葉片表皮蠟質(zhì)成分、含量及蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)和分布的變化特點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上,根據(jù)糜子基因組測(cè)序結(jié)果,通過(guò)同源比對(duì)搜索糜子中具有FAR基因保守結(jié)構(gòu)域的Pm FAR基因,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析。同時(shí)將不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期糜子葉片測(cè)序分析,以確定Pm FAR基因在不同時(shí)期的表達(dá)量。對(duì)Pm FAR基因進(jìn)行克隆和表達(dá)載體構(gòu)建,并轉(zhuǎn)入酵母及擬南芥中進(jìn)行功能驗(yàn)證,通過(guò)對(duì)表達(dá)結(jié)果進(jìn)行分析,從而驗(yàn)證糜子中Pm FAR基因的生物學(xué)功能。研究結(jié)果如下:1.糜子不同品種及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期葉片表皮蠟質(zhì)中,初級(jí)醇和烷烴均是主... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

糜子超長(zhǎng)鏈脂肪醇合成酶基因PmFAR的克隆與功能分析


技術(shù)路線

蠟質(zhì),糜子,葉片,表皮


西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文 2.3.2 不同糜子品種旗葉葉片表皮蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)觀察 掃描電鏡觀察結(jié)果表明,糜子旗葉葉片表面覆蓋有大量的蠟質(zhì)晶體,晶體類型主要呈片狀。葉片上下兩個(gè)表面的蠟質(zhì)晶體密集度具有明顯的差異,呈片狀的蠟質(zhì)晶體緊密而均勻地分布于整個(gè)葉片的上表面,葉片下表面的片狀蠟質(zhì)晶體很少,整個(gè)表面相對(duì)比較平滑。不同糜子品種間葉片表皮蠟質(zhì)晶體密集程度存在顯著差異,其中榆黍 1 號(hào)和晉黍 9 號(hào)葉片上表面蠟質(zhì)晶體分布最為緊密,寧糜 10 號(hào)則相對(duì)稀疏。并且榆黍 1 號(hào)葉片下表面含有少量顆粒狀蠟質(zhì)晶體而其他品種則相對(duì)比較平滑(圖 2.3)。

氨基酸序列,葉片,基因,糜子


第三章糜子PmFAR基因的克隆及表達(dá)分析21長(zhǎng)15天-35天時(shí)表達(dá)上調(diào),而在發(fā)育后期表達(dá)開始下調(diào);PmFAR2基因在糜子生長(zhǎng)15天-25天時(shí)表達(dá)上調(diào),25天-35天時(shí)表達(dá)下調(diào),而后輕微上調(diào)。我們發(fā)現(xiàn)大部分PmFAR基因在25天至35天時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高。其中PmFAR3基因表達(dá)量最高,達(dá)到63.01。以上分析表明,不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期均能夠誘導(dǎo)基因的表達(dá),其中PmFAR3、PmFAR10表達(dá)量在35天時(shí)明顯上升,推測(cè)它們可能是糜子葉片表皮蠟質(zhì)的主要合成基因。圖3.1不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期PmFAR基因的表達(dá)Figure3.1ExpressionlevelofPmFARgenesatdifferentgrowthstages注:YU-15d~YU-40d:榆黍1號(hào)生長(zhǎng)發(fā)育15天的葉片~榆黍1號(hào)生長(zhǎng)發(fā)育40天的葉片;L-15d~L-40d:隴糜8號(hào)生長(zhǎng)發(fā)育15天的葉片~隴糜8號(hào)生長(zhǎng)發(fā)育40天的葉片。Note:YU-15d~YU-40d:Yushu1leavesgrowingfor15days~Yushu1leavesgrowingfor40days;L-15d~L-40d:Longmi8leavesgrowingfor15days~Longmi8leavesgrowingfor40days.3.3.2糜子PmFAR系統(tǒng)進(jìn)化樹分析利用PmFAR基因的氨基酸序列與來(lái)自擬南芥和其他物種中的FAR氨基酸序列進(jìn)行構(gòu)建進(jìn)化樹分析,結(jié)果表明(圖3.2),PmFAR1與ZmFAR3聚為一類。PmFAR2與SiFAR3聚為一類,PmFAR10與PmFAR13相似性極高,同時(shí)與PmFAR3和SiFAR1聚為一類。進(jìn)化樹結(jié)果也表明這五個(gè)PmFAR基因與谷子和玉米中FAR基因相似度很高,由此推測(cè)這五個(gè)候選基因也可能與谷子和玉米中的同源基因相似,在蠟質(zhì)合成過(guò)程中起類似的作用。


本文編號(hào):3373796

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