北柴胡（Bupleurum chinense DC.）是柴胡藥材的基原植物之一。柴胡皂苷是柴胡的主要藥效成分,目前已經(jīng)分離到了柴胡皂苷單體120多種,其中北柴胡中分離到了柴胡皂苷單體20多種,多為齊墩果烷型三萜皂苷和烏蘇烷型三萜皂苷,目前研究較多的是柴胡皂苷a、c、d和b。中國藥典將柴胡皂苷a和d作為柴胡品質(zhì)評價(jià)的指標(biāo)。三萜皂苷合成途徑主要分為前體形成、骨架構(gòu)建、后修飾三個(gè)過程,受植物生長發(fā)育及環(huán)境條件影響調(diào)控。已有研究表明轉(zhuǎn)錄因子參與這一調(diào)控過程。課題組前期從北柴胡轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中獲得一些轉(zhuǎn)錄因子基因的序列,初步分析了這些轉(zhuǎn)錄因子基因的組織表達(dá)和茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)特性,在此基礎(chǔ)上,本研究構(gòu)建了轉(zhuǎn)錄因子基因BcAP2-13過表達(dá)的北柴胡毛狀根株系,分析了過表達(dá)株系的柴胡皂苷含量變化,制備了 BcAP2-13的抗體,以期進(jìn)一步解析BcAP2-13的生物功能。另外,對前期已獲得的BcbZIP134過表達(dá)毛狀根株系進(jìn)行了重復(fù)功能驗(yàn)證,研究獲得如下結(jié)果:1、利用煙草葉片的瞬時(shí)表達(dá)體系,證實(shí)了 BcAP2-13基因定位于細(xì)胞核中;利用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化,獲得了BcAP2-1 過表達(dá)的北柴胡毛狀... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１植物萜類代謝合成途徑??１．２萜類化合物轉(zhuǎn)錄調(diào)控進(jìn)展??［１７］，［１８］，ｍｉＲＮＡ，Ａ％］，⑶］，??

圖２柴胡阜苷ａ，?Ｃ，?ｄ結(jié)構(gòu)圖??３．２柴胡皂苷抗體及基因抗體研究進(jìn)展??抗體是一類能與特定抗體結(jié)合的免疫球蛋白，在臨床上抗體主要是用于疾病的斷與治療。分子生物學(xué)上抗體主要是檢測蛋白的表達(dá)量，研究基因的作用位點(diǎn)，探各種分子機(jī)制，柴胡作為我國的大宗藥材，柴胡皂苷作為重要的藥效活性成分，探其背后的合成機(jī)制很重要。２０１３年，劉洋釆用碘酸鈉法合成了柴胡皂苷ａ的人工抗

圖３?ＢｃＡＰ２－１?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3361454