發(fā)布時(shí)間：2021-07-04 06:37

　　植物轉(zhuǎn)錄因子WRINKLED1（WRI1）屬于AP2/EREBP類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子成員,參與調(diào)控糖酵解及質(zhì)體內(nèi)脂肪酸從頭合成相關(guān)基因的表達(dá),是植物種子油脂合成積累的重要調(diào)節(jié)者。迄今,已從模式植物擬南芥、玉米、亞麻薺和油菜等普通油料作物發(fā)育種子克隆到編碼轉(zhuǎn)錄因子WRI1的基因序列并做功能分析。蓖麻（RicinuscommunisL.）是重要工業(yè)油料作物,種子含油量高達(dá)60%,油脂主要積累在胚乳細(xì)胞,油脂中90%是功能獨(dú)特的蓖麻酸。有關(guān)蓖麻轉(zhuǎn)錄因子WRI1種類(lèi)、功能及調(diào)控活性的研究還未見(jiàn)報(bào)道。為解析蓖麻種子高水平合成積累油脂的機(jī)制,并鑒定獲得具有高效調(diào)控活性的WRI1以用于在植物營(yíng)養(yǎng)器官組裝油脂富集代謝途徑,本研究從蓖麻發(fā)育種子分離編碼RcWRI1轉(zhuǎn)錄因子的cDNA克隆,分析RcWRI1基因結(jié)構(gòu)及時(shí)空表達(dá)特性,構(gòu)建RcWRI1超表達(dá)載體,對(duì)普通煙草進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化并鑒定轉(zhuǎn)基因株系油脂組成等表型,系統(tǒng)分析RcWRI1的功能和應(yīng)用于植物油脂代謝工程的價(jià)值。主要研究結(jié)果如下:1.以擬南芥編碼AtWRI1的CDs序列為探針,對(duì)蓖麻基因組數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST分析顯示,RcWRI1基因（LOC8283400）有兩... 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－ｌ價(jià)腳／／Ｊ和心沙７？／／－萬(wàn)的基因結(jié)構(gòu)圖??Ｆｉｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅｅｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｓｌｉｃｅ?ｆｏｒｍｓ?ＲｃＷＲＩｌ－Ａ?ａｎｄ?ＲｃＷＲＩｌ－Ｂ??

?ＣｅＷＲＨ??Ｗ??圖２－４?ＲｃＷＲＩｌｓ和來(lái)自其他物種的ＷＲｌｌ同源物的系統(tǒng)發(fā)育分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ＲｃＷＲＩ?Ｉｓ?ａｎｄ?ＷＲＩ?１?ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ?ｆｒｏｍ?ｏｔｈｅｒ?ｐｌａｎｔ?ｓｐｅｃｉｅｓ??ＢｎＷＲＩｌ?（ＡＤ０１６３４６）?，?ＺｍＷＲＩｌ－Ａ?（ＡＣＧ３２３６７．１）?，?ＺｍＷＲＩｌ－Ｂ?（ＡＩＢ０５０３６．１）?，?ＣｅＷＲＩｌ??（ＳＲＸ１０７９４３１）?，?ＰｔＷＲＩｌ?（ＸＰ?００２３１１９２１．２）?，?ＧｍＷＲＩＩ?（ＸＰ?００６５９６９８６．１）?，?ＢｄＷＲＩＩ?（Ｂｒａｉ４ｇ４３８７７），??ＡｔＷＲＩｌ?（ＡＡＰ８０３８２）?，?ＡｔＷＲＩ２?（ＡＢＧ２５０７４）?，?ＡｔＷＲＩ３?（ＮＰ＿００１３２０８５２．１）?，?ＡｔＷＲＩ４?（ＡＢＫ３２１８２．１?），??ＲｃＷＲＩ２?（ＢＡＭ７５１７９．１）?，?ＥｇＷＲＩｌ?（ＡＨＸ７１６７６．１）．??２．３．４系統(tǒng)發(fā)育分析??為了闡明兩種ＲｃＷＲＩｌ剪接體和ＡｔＷＲＩｌ之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，通過(guò)ＭＥＧＡ６．０軟件，??

停粒簦祝遙桑矗?約襖醋圓煌?鎦值鈉淥?祝遙賞?崳?源蛋白構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示，相比于其他三種擬南芥ＷＲＩ蛋白，ＲｃＷＲＩｌ－Ａ??和ＲｃＷＲＩｌ－Ｂ與ＡｔＷＲＩｌ最接近（圖２－４），它們落入與ＡｔＷＲＩｌ和ＢｎＷＲＩｌ相同的進(jìn)化??枝中。研究表明，ＡｔＷＲＩｌ是擬南芥ＷＲＩ家族成員中唯一一個(gè)負(fù)責(zé)調(diào)控種子中ＴＡＧ積累??的轉(zhuǎn)錄因子。??２．３．５鹿麻不同組織ＲＮＡ提取質(zhì)量的檢測(cè)??提取蓖麻不同組織總ＲＮＡ，將提�。遥危翗悠愤M(jìn)行瓊脂糖凝膠（１％）電泳檢測(cè)。采用??Ｍａｒｋｅｒ?Ｄ２０００?（Ｇｅｎｓｔａｒ），上樣量５?ｐＬ，ＲＮＡ樣品的上樣量均為５?｜ｉＬ。通過(guò)Ｂｉｏ－ｒａｄ凝膠??成像系統(tǒng)觀察瓊脂糖凝膠電泳圖（圖２－５）。電泳圖顯示提取的ＲＮＡ樣品電泳條帶完好，??１８Ｓ和２８Ｓ電泳條帶清晰明亮。用核酸濃度測(cè)定儀（Ｂｉｏ－ｒａｄ）檢測(cè)ＲＮＡ的濃度及純度，??蓖麻花、葉、果實(shí)、果皮ＲＮＡ樣品ＯＤ２６ｇ／ＯＤ２８Ｃ分別為２．０、］．９６、１．９１、２．０１。從這些檢??測(cè)結(jié)果來(lái)看，這些提取的ＲＮＡ純度符合要求，可用來(lái)做后續(xù)試驗(yàn)。??果實(shí)果皮葉?花Ｍａｋｅｒ??Ｂ２０００ｂｐ??ｌＯＯＯｂｐ??圖２－５蓖麻各個(gè)組織ＲＮＡ１％瓊脂糖凝膠電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｏｒｇａｎｓ?ｏｆ?ｃａｓｔｏｒ?ｗｅｒｅ?ａｎａｌｙｚｅｄ?ｏｎ?１％?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌｓ??２．３．６?和／＾＿／廠(chǎng)５不同組織的表達(dá)分析??我們?cè)O(shè)計(jì)乂和的特異性引物，通過(guò)ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)了和??此呢／八５在蓖麻不同組織器官中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示（圖２－６）

【參考文獻(xiàn)】：
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